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吉非替尼治疗椎间盘退变与半月板损伤的效应和机制研究

致谢第5-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词第10-16页
绪论第16-20页
第一部分 EGFR抑制剂吉非替尼治疗椎间盘退变的效应及机制研究第20-54页
    1 EGFR受体在椎间盘退变中的表达第20-26页
        1.1 引言第20页
        1.2 实验试剂与仪器第20-22页
            1.2.1 材料和试剂第20-21页
            1.2.2 相关试剂的配制第21-22页
        1.3 实验方法第22-24页
            1.3.1 组织蛋白样本准备第22页
            1.3.2 Western-Blot第22-23页
            1.3.3 组织免疫荧光第23-24页
        1.4 实验结果第24-26页
            1.4.1 EGFR和自噬相关因子在人和大鼠正常与退变椎间盘的表达差异第24-26页
    2 软骨特异性敲除EGFR在小鼠椎间盘退变模型发展中的作用第26-34页
        2.1 引言第26页
        2.2 实验试剂与仪器第26-27页
            2.2.1 实验动物第26页
            2.2.2 相关试剂配制第26-27页
        2.3 实验方法第27-32页
            2.3.1 小鼠椎间盘退变造模第27页
            2.3.2 基因型鉴定第27-29页
            2.3.3 影像学检查第29-32页
        2.4 实验结果第32-34页
            2.4.1 软骨特异性敲除EGFR在小鼠椎间盘退变模型发展中的作用第32-34页
    3 EGFR抑制剂吉非替尼对髓核细胞的功能维持作用和机制研究第34-40页
        3.1 引言第34页
        3.2 实验试剂与仪器第34-35页
            3.2.1 材料和试剂第34-35页
            3.2.2 髓核细胞培养基配制第35页
        3.3 实验方法第35-37页
            3.3.1 大鼠细胞的分离和培养第35页
            3.3.2 细胞冻存第35-36页
            3.3.3 细胞复苏第36页
            3.3.4 逆转录合成cDNA第36页
            3.3.5 实时荧光定量PCR(Real time PCR)第36-37页
            3.3.6 细胞蛋白样本准备第37页
            3.3.7 Western-blot第37页
        3.4 实验结果第37-40页
            3.4.1 EGFR受体在对髓核细胞功能维持的作用第37-38页
            3.4.2 吉非替尼在髓核细胞功能维持中的作用和机制第38-40页
    4 EGFR抑制剂吉非替尼在大鼠椎间盘退变治疗中的作用和机制研究第40-49页
        4.1 引言第40页
        4.2 实验试剂与仪器第40-41页
            4.2.1 材料和试剂第40-41页
            4.2.2 实验仪器及材料第41页
            4.2.3 实验动物第41页
            4.2.4 相关溶液的配制第41页
        4.3 实验方法第41-45页
            4.3.1 透明质酸吉非替尼复合水凝胶的制备第41页
            4.3.2 扫描电镜样本制备第41-42页
            4.3.3 傅里叶红外分光光度计第42页
            4.3.4 流变学分析第42页
            4.3.5 体外评估水凝胶的生物相容性第42页
            4.3.6 体内评估水凝胶的生物相容性第42-43页
            4.3.7 吉非替尼缓释检测第43页
            4.3.8 建立SD大鼠尾椎椎闻盘退变模型第43-44页
            4.3.9 动物给药方式第44页
            4.3.10 SO染色第44页
            4.3.11 免疫组化(IHC)染色第44-45页
            4.3.12 磁共振成像第45页
        4.4 实验结果第45-49页
            4.4.1 吉非替尼透明质酸水黏胶构建与表征第45-47页
            4.4.2 吉非替尼大鼠体内延缓椎间盘退变进展第47-49页
    5 吉非替尼在非小细胞肺癌合并椎间盘退变患者中的治疗效应第49-52页
        5.1 引言第49页
        5.2 实验试剂与仪器第49页
            5.2.1 材料和试剂第49页
        5.3 实验结果第49-52页
    第一部分 讨论第52-54页
第二部分 EGFR抑制剂吉非替尼复合个体化胶原支架促进半月板缺损再生及预防骨性关节炎的研究第54-82页
    6 EGFR受体在半月板损伤中的表达第56-61页
        6.1 引言第56页
        6.2 实验试剂与仪器第56-57页
            6.2.1 材料和试剂第56-57页
            6.2.2 相关试剂的配制第57页
        6.3 实验方法第57-59页
            6.3.1 组织蛋白样本准备第57页
            6.3.2 Western-Blot第57-58页
            6.3.3 组织免疫组化第58-59页
        6.4 实验结果第59-61页
            6.4.1 EGFR在半月板损伤中的表达第59-61页
    7 软骨特异性敲除EGFR在小鼠半月板损伤中的作用第61-64页
        7.1 引言第61页
        7.2 实验试剂与仪器第61-62页
            7.2.1 实验动物第61-62页
        7.3 实验方法第62页
            7.3.1 小鼠半月板损伤造模第62页
            7.3.2 基因型鉴定第62页
            7.3.3 Safrain-O染色第62页
            7.3.4 免疫组织化学第62页
        7.4 实验结果第62-64页
            7.4.1 软骨特异性敲除EGFR在小鼠半月板损伤中的作用第62-64页
    8 EGFR抑制剂吉非替尼对半月板纤维软骨细胞的功能研究第64-68页
        8.1 引言第64页
        8.2 实验试剂与仪器第64-65页
            8.2.1 材料和试剂第64-65页
            8.2.2 大鼠半月板细胞培养基配制第65页
        8.3 实验方法第65-66页
            8.3.1 大鼠半月板纤维软骨细胞的分离和培养第65页
            8.3.2 细胞冻存第65页
            8.3.3 细胞复苏第65-66页
            8.3.4 逆转录合成cDNA第66页
            8.3.5 实时荧光定量PCR(Real time PCR)第66页
            8.3.6 Western-blot第66页
        8.4 实验结果第66-68页
            8.4.1 吉非替尼在髓核细胞中的功能和机制第66-68页
    9 EGFR抑制剂吉非替尼在小鼠半月损伤治疗中的作用第68-72页
        9.1 引言第68页
        9.2 实验试剂与仪器第68页
            9.2.1 实验动物第68页
        9.3 实验方法第68-70页
            9.3.1 小鼠半月板损伤造模第68页
            9.3.2 动物给药方式第68页
            9.3.3 Safrain-O染色第68-69页
            9.3.4 免疫组织化学第69-70页
        9.4 实验结果第70-72页
    10 个体化胶原支架复合关节腔注射吉非替尼促进半月板的再生及预防骨性关节炎的研究第72-80页
        10.1 引言第72页
        10.2 材料和试剂第72-73页
            10.2.1 实验仪器及材料第73页
            10.2.2 相关试剂的配制第73页
            10.2.3 实验动物第73页
        10.3 实验方法第73-74页
            10.3.1 扫描电镜分析第73页
            10.3.2 兔子骨软骨缺损的建立和支架植入第73页
            10.3.3 兔子膝关节半月板样本的评估第73-74页
            10.3.4 影像学评估关节间隙第74页
        10.4 实验结果第74-80页
            10.4.1 个体化层状胶原支架制备及表征第74-75页
            10.4.2 个体化胶原支架复合关节腔注射吉非替尼促进半月板的再生的研究第75-80页
    第二部分 讨论第80-82页
第三部分 总结第82-86页
    1 温敏透明质酸水凝胶缓释吉非替尼治疗椎间盘退变的效应和机制研究第82-83页
    2 吉非替尼通过定制的胶原支架递送表皮促进兔半月板缺损再生与骨性关节炎的预防第83-86页
参考文献第86-97页
综述第97-113页
    参考文献第106-113页
作者简历第113-116页

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