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农杆菌介导金针菇FIP-fve基因沉默的遗传转化和血红铆钉菇FIP基因克隆及重组表达

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一章 文献综述第12-25页
    1.1 真菌概述第12-13页
    1.2 真菌免疫调节蛋白FIPs研究进展第13-19页
        1.2.1 真菌免疫调节蛋白的结构特征第13-16页
        1.2.2 FIPs的生物学功能第16-19页
    1.3 蛋白重组表达第19-21页
        1.3.1 原核表达系统第19页
        1.3.2 昆虫细胞表达系统第19页
        1.3.3 酵母表达系统第19-20页
        1.3.4 其他重组表达系统第20页
        1.3.5 FIPs重组表达研究进展第20-21页
    1.4 大型真菌遗传转化体系的构建第21-23页
        1.4.1 遗传转化方法第21-23页
        1.4.2 金针菇遗传转化研究进展第23页
    1.5 本论文的研究意义第23-25页
第二章 农杆菌介导金针菇FIP-fve基因沉默的遗传转化第25-45页
    2.1 试验材料第25-26页
        2.1.1 菌种与质粒第25页
        2.1.2 试剂第25页
        2.1.3 仪器第25-26页
        2.1.4 培养基第26页
    2.2 试验方法第26-37页
        2.2.1 金针菇子实体中FIP-fve的前期检测第26-27页
        2.2.2 金针菇FIP-fve基因正反片段的克隆第27-30页
        2.2.3 金针菇FIP-fve的RNAi载体构建第30-34页
        2.2.4 农杆菌介导金针菇遗传转化体系的构建第34-37页
    2.3 结果与分析第37-43页
        2.3.1 金针菇子实体FIP-fve的前期检测第37-38页
        2.3.2 金针菇免疫调节蛋白基因正反片段的克隆第38页
        2.3.3 金针菇免疫调节蛋白基因RNAi载体构建第38-40页
        2.3.4 农杆菌LBA4404介导转化金针菇的遗传转化体系第40-43页
    2.4 讨论与结论第43-45页
第三章 血红铆钉菇FIP基因克隆及重组表达第45-61页
    3.1 试验材料第45-46页
        3.1.1 菌种与质粒第45页
        3.1.2 酶及试剂第45页
        3.1.3 试验仪器第45页
        3.1.4 培养基第45-46页
    3.2 试验方法第46-53页
        3.2.1 血红铆钉菇FIP-cru的克隆及生物信息学分析第46-47页
        3.2.2 重组表达载体构建第47页
        3.2.3 重组酵母转化子的获得与筛选第47-49页
        3.2.4 rFIP-cru的表达与检测第49-51页
        3.2.5 rFIP-cru生物活性检测第51-53页
    3.3 试验结果与分析第53-60页
        3.3.1 血红铆钉菇FIP-cru克隆及生物信息学分析第53-54页
        3.3.2 重组表达载体构建第54-55页
        3.3.3 重组酵母转化子获得与鉴定第55-56页
        3.3.4 rFIP-cru蛋白的表达、纯化与检测第56-58页
        3.3.5 rFIP-cru蛋白生物活性检测第58-60页
    3.4 讨论与结论第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67-68页
附录:英文缩略词第68-70页
攻读学位期间发表的学术文章第70页

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