摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 真菌概述 | 第12-13页 |
1.2 真菌免疫调节蛋白FIPs研究进展 | 第13-19页 |
1.2.1 真菌免疫调节蛋白的结构特征 | 第13-16页 |
1.2.2 FIPs的生物学功能 | 第16-19页 |
1.3 蛋白重组表达 | 第19-21页 |
1.3.1 原核表达系统 | 第19页 |
1.3.2 昆虫细胞表达系统 | 第19页 |
1.3.3 酵母表达系统 | 第19-20页 |
1.3.4 其他重组表达系统 | 第20页 |
1.3.5 FIPs重组表达研究进展 | 第20-21页 |
1.4 大型真菌遗传转化体系的构建 | 第21-23页 |
1.4.1 遗传转化方法 | 第21-23页 |
1.4.2 金针菇遗传转化研究进展 | 第23页 |
1.5 本论文的研究意义 | 第23-25页 |
第二章 农杆菌介导金针菇FIP-fve基因沉默的遗传转化 | 第25-45页 |
2.1 试验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 菌种与质粒 | 第25页 |
2.1.2 试剂 | 第25页 |
2.1.3 仪器 | 第25-26页 |
2.1.4 培养基 | 第26页 |
2.2 试验方法 | 第26-37页 |
2.2.1 金针菇子实体中FIP-fve的前期检测 | 第26-27页 |
2.2.2 金针菇FIP-fve基因正反片段的克隆 | 第27-30页 |
2.2.3 金针菇FIP-fve的RNAi载体构建 | 第30-34页 |
2.2.4 农杆菌介导金针菇遗传转化体系的构建 | 第34-37页 |
2.3 结果与分析 | 第37-43页 |
2.3.1 金针菇子实体FIP-fve的前期检测 | 第37-38页 |
2.3.2 金针菇免疫调节蛋白基因正反片段的克隆 | 第38页 |
2.3.3 金针菇免疫调节蛋白基因RNAi载体构建 | 第38-40页 |
2.3.4 农杆菌LBA4404介导转化金针菇的遗传转化体系 | 第40-43页 |
2.4 讨论与结论 | 第43-45页 |
第三章 血红铆钉菇FIP基因克隆及重组表达 | 第45-61页 |
3.1 试验材料 | 第45-46页 |
3.1.1 菌种与质粒 | 第45页 |
3.1.2 酶及试剂 | 第45页 |
3.1.3 试验仪器 | 第45页 |
3.1.4 培养基 | 第45-46页 |
3.2 试验方法 | 第46-53页 |
3.2.1 血红铆钉菇FIP-cru的克隆及生物信息学分析 | 第46-47页 |
3.2.2 重组表达载体构建 | 第47页 |
3.2.3 重组酵母转化子的获得与筛选 | 第47-49页 |
3.2.4 rFIP-cru的表达与检测 | 第49-51页 |
3.2.5 rFIP-cru生物活性检测 | 第51-53页 |
3.3 试验结果与分析 | 第53-60页 |
3.3.1 血红铆钉菇FIP-cru克隆及生物信息学分析 | 第53-54页 |
3.3.2 重组表达载体构建 | 第54-55页 |
3.3.3 重组酵母转化子获得与鉴定 | 第55-56页 |
3.3.4 rFIP-cru蛋白的表达、纯化与检测 | 第56-58页 |
3.3.5 rFIP-cru蛋白生物活性检测 | 第58-60页 |
3.4 讨论与结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录:英文缩略词 | 第68-70页 |
攻读学位期间发表的学术文章 | 第70页 |