| 论文创新点 | 第5-6页 |
| 缩写对照表 | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1. 引言 | 第15-59页 |
| 1.1 多肽合成方法简介 | 第15-40页 |
| 1.1.1 C-端羧基与N-端氨基反应形成肽键 | 第15-24页 |
| 1.1.1.1 碳二亚胺类化合物作为缩合剂 | 第18-21页 |
| 1.1.1.2 脲/铵盐作为缩合剂 | 第21-22页 |
| 1.1.1.3 膦盐作为缩合剂 | 第22-23页 |
| 1.1.1.4 形成活性氧酯 | 第23-24页 |
| 1.1.2 C-端硫代酸与N-端氨基反应形成肽键 | 第24-30页 |
| 1.1.2.1 氧化酰化形成肽键 | 第24-25页 |
| 1.1.2.2 通过硫酯中间体形成肽键 | 第25-26页 |
| 1.1.2.3 非金属催化形成肽键 | 第26-28页 |
| 1.1.2.4 金属催化形成肽键 | 第28-29页 |
| 1.1.2.5 气体参与的形成肽键反应 | 第29-30页 |
| 1.1.3 C-端硫酯与N-端含半胱氨酸残基的肽段形成肽键 | 第30-35页 |
| 1.1.3.1 天然化学连接法(NCL)形成肽键 | 第30-31页 |
| 1.1.3.2 辅助基团参与的天然化学连接形成肽键 | 第31-35页 |
| 1.1.4 C-端硫酯与N-端不含半胱氨酸残基的肽段形成肽键 | 第35-38页 |
| 1.1.4.1 金属催化形成肽键 | 第35-36页 |
| 1.1.4.2 分子内形成肽键 | 第36-38页 |
| 1.1.5 C-端氧酯与N-端氨基形成肽键 | 第38-40页 |
| 1.2 阿霉素研究进展 | 第40-59页 |
| 1.2.1 蒽环类化合物抗肿瘤作用机理 | 第41-43页 |
| 1.2.1.1 阿霉素嵌入DNA | 第41-42页 |
| 1.2.1.2 阿霉素-DNA加成物 | 第42-43页 |
| 1.2.2 阿霉素心脏毒性及临床解决办法 | 第43-45页 |
| 1.2.2.1 阿霉素心脏毒性分类 | 第43-44页 |
| 1.2.2.2 临床上剂降低蒽环类药物心脏毒性的方法 | 第44-45页 |
| 1.2.3 阿霉素-多肽偶联物的研究进展 | 第45-55页 |
| 1.2.3.1 基质金属蛋白酶活化的阿霉素-多肽偶联物 | 第45-46页 |
| 1.2.3.2 阿霉素-细胞穿透肽偶联物 | 第46-49页 |
| 1.2.3.3 阿霉素-特异性受体的配体片段偶联物 | 第49-51页 |
| 1.2.3.4 阿霉素与多肽的连接方式对细胞毒性的影响 | 第51-55页 |
| 1.2.4 肿瘤化学治疗中的多药耐药性问题 | 第55-56页 |
| 1.2.5 表皮生长因子简介 | 第56-58页 |
| 1.2.6 表皮生长因子受体与肿瘤 | 第58-59页 |
| 2. 前期工作基础 | 第59-61页 |
| 2.1 硫酯化学合成多肽的研究 | 第59页 |
| 2.2 阿霉素-多肽偶联物的合成及靶向性研究 | 第59-61页 |
| 3. 实验部分 | 第61-123页 |
| 3.1 HMDO促进多肽合成研究 | 第61-98页 |
| 3.1.1 仪器和试剂 | 第61页 |
| 3.1.2 合成方法 | 第61-88页 |
| 3.1.2.1 氨基酸硫酯和氧酯的合成 | 第61-70页 |
| 3.1.2.2 氨基酸酯盐酸盐脱盐制备游离胺 | 第70页 |
| 3.1.2.3 多肽和其他化合物的合成 | 第70-86页 |
| 3.2.2.4 溶菌酶的修饰及DOX-EBP合成 | 第86-88页 |
| 3.1.3 结果与讨论 | 第88-97页 |
| 3.1.3.1 反应条件的筛选 | 第88-89页 |
| 3.1.3.2 反应底物适应性研究 | 第89-90页 |
| 3.1.3.3 产物消旋性研究 | 第90-93页 |
| 3.1.3.4 氧酯通过HMDO介导合成二肽的研究 | 第93-94页 |
| 3.1.3.5 肉桂酰-L-苯丙氨酸乙酯反应过程的监测 | 第94-95页 |
| 3.1.3.6 溶菌酶修饰结果 | 第95-96页 |
| 3.1.3.7 DOX-EBP的合成结果 | 第96-97页 |
| 3.1.4 后续工作设想 | 第97-98页 |
| 3.2 DOX-EBP克服多药耐药性研究 | 第98-123页 |
| 3.2.1 仪器和试剂 | 第98-99页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第99-105页 |
| 3.2.2.1 耐药细胞SW480/DOX的建立方法 | 第99页 |
| 3.2.2.2 Western blot分析ABC蛋白的表达情况 | 第99-100页 |
| 3.2.2.3 体外细胞毒性试验(MTT法) | 第100页 |
| 3.2.2.4 LDH释放实验 | 第100页 |
| 3.2.2.5 细胞内阿霉素含量实验 | 第100-101页 |
| 3.2.2.6 ATPase活性实验 | 第101-102页 |
| 3.2.2.7 Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡 | 第102页 |
| 3.2.2.8 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第102页 |
| 3.2.2.9 细胞内分布试验 | 第102-103页 |
| 3.2.2.10 细胞吸收试验 | 第103页 |
| 3.2.2.11 细胞吸收抑制试验 | 第103-104页 |
| 3.2.2.12 细胞内吞抑制试验 | 第104页 |
| 3.2.2.13 C225对细胞内游离药物分布的影响 | 第104页 |
| 3.2.2.14 内吞标记物共定位实验 | 第104-105页 |
| 3.2.3 结果与讨论 | 第105-120页 |
| 3.2.3.1 SW480/DOX细胞对游离阿霉素的抗药性研究 | 第105-107页 |
| 3.2.3.2 P-gp在SW480/DOX细胞中的过量表达 | 第107-108页 |
| 3.2.3.3 DOX-EBP对SW480/DOX细胞的杀细胞效果 | 第108-112页 |
| 3.2.3.4 DOX-EBP在SW480/DOX细胞内的分布 | 第112-115页 |
| 3.2.3.5 EGFR的内吞作用对DOX-EBP在细胞内累积量的影响 | 第115-116页 |
| 3.2.3.6 SW480/DOX细胞中EGFR介导的DOX-EBP内吞内化 | 第116-120页 |
| 3.2.4 讨论 | 第120-122页 |
| 3.2.5 展望 | 第122-123页 |
| 附录 | 第123-162页 |
| 参考文献 | 第162-178页 |
| 攻博期间发表的与学位论文相关的科研成果目录 | 第178-179页 |
| 致谢 | 第179页 |
