| 缩写词对照表 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 引言 | 第10-21页 |
| 1. 细胞间隙连接与Innexin蛋白 | 第10-11页 |
| 2. 细胞的凋亡 | 第11-16页 |
| 2.1 线粒体途径 | 第12-14页 |
| 2.2 死亡受体途径 | 第14-15页 |
| 2.3 内质网途径 | 第15-16页 |
| 3. 三种信号途径的关系 | 第16-17页 |
| 4. PI3K/Akt信号通路 | 第17-18页 |
| 4.1 PI3K | 第17-18页 |
| 4.2 Akt | 第18页 |
| 5. PI3K/Akt信号通路在细胞凋亡中的研究 | 第18-19页 |
| 5.1 PI3K/Akt信号通路在脊椎动物细胞凋亡中的研究概况 | 第18-19页 |
| 5.2 PI3K/Akt信号通路在昆虫细胞凋亡中的研究概况 | 第19页 |
| 6. 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 材料与方法 | 第21-42页 |
| 1. 材料 | 第21-25页 |
| 1.1 斜纹夜蛾 | 第21页 |
| 1.2 哺乳动物细胞 | 第21页 |
| 1.3 质粒和受体菌株 | 第21页 |
| 1.4 限制性内切酶及其他酶类 | 第21页 |
| 1.5 试剂盒及抗体 | 第21-22页 |
| 1.6 其他主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.7 大肠杆菌培养基 | 第23页 |
| 1.8 缓冲液 | 第23-24页 |
| 1.9 实验耗材 | 第24页 |
| 1.10 部分仪器设备 | 第24-25页 |
| 2. 方法 | 第25-42页 |
| 2.1 甘油菌的复苏 | 第25页 |
| 2.2 CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第25页 |
| 2.3 质粒提取 | 第25-26页 |
| 2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
| 2.5 DNA片段回收 | 第27页 |
| 2.6 目的DNA片段inx2、inx3、EGFP的获取 | 第27-31页 |
| 2.7 目的片段T载体的构建 | 第31-33页 |
| 2.8 目的片段真核表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 2.9 细胞转染 | 第36-38页 |
| 2.10 Western blot | 第38-39页 |
| 2.11 斜纹夜蛾血淋巴cDNA的合成 | 第39-41页 |
| 2.12 Annexin V-FITC和PI双染法检测细胞凋亡 | 第41-42页 |
| 结果 | 第42-76页 |
| 1. 斜纹夜蛾Innexin的亚克隆 | 第42-48页 |
| 1.1 pIZT/V5-His-Spliinx2、pIZT/V5-His-Spliinx3、pIB/V5-His-EGFP质粒的提取及检测 | 第42-43页 |
| 1.2 双酶切获取目的片段inx2、inx3、EGFP | 第43页 |
| 1.3 目的片段的T载体的构建 | 第43-44页 |
| 1.4 重组质粒的鉴定 | 第44-45页 |
| 1.5 测序结果及分析 | 第45-48页 |
| 2. 哺乳动物细胞表达质粒的构建 | 第48-51页 |
| 2.1 载体与目的基因双酶切 | 第48-49页 |
| 2.2 连接,转化及重组FLAG质粒的鉴定 | 第49-51页 |
| 3. FLAG质粒转染HeLa、HCT116、293T细胞 | 第51-56页 |
| 3.1 FLAG质粒转染HeLa细胞 | 第51-52页 |
| 3.2 HeLa细胞转染后的定点观察 | 第52-53页 |
| 3.3 FLAG质粒转染293T细胞 | 第53-55页 |
| 3.4 FLAG质粒转染HCT116细胞 | 第55-56页 |
| 4. 三种细胞转染后细胞凋亡的FCM检测 | 第56-60页 |
| 5. 三种细胞总蛋白的Western blot | 第60-76页 |
| 5.1 目的蛋白在293T,HCT116和HeLa细胞内的表达 | 第60-62页 |
| 5.2 转染HeLa、HCT116后mRNA水平上inx2,inx3基因的检测 | 第62-64页 |
| 5.3 转染HeLa、HCT116、293T细胞后Caspase 3蛋白检测 | 第64-68页 |
| 5.4 Innexin促进细胞凋亡与PI3K/Akt信号通路的关系 | 第68-72页 |
| 5.5 转染293T、HCT116、HeLa细胞后Bid蛋白检测 | 第72-76页 |
| 讨论 | 第76-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 研究的不足 | 第80页 |
| 本研究的创新之处 | 第80-81页 |
| 附录1 斜纹夜蛾integrni Ⅰ/βⅠ克隆 | 第81-90页 |
| 附录2 有关Ang Ⅱ诱导大鼠心肌细胞H9C2表达分泌CypA的相关工作 | 第90-92页 |
| 附录3 主要试剂配方 | 第92-95页 |
| 参考文献 | 第95-102页 |
| 国内会议论文摘要 | 第102页 |
| 获奖情况 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
