| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 插图和附表清单 | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-30页 |
| 1.1 musashi基因的发现和功能 | 第11-15页 |
| 1.2 Musashi和癌症 | 第15-17页 |
| 1.3 哺乳动物小肠上皮结构和小肠干细胞 | 第17-25页 |
| 1.4 肠道肿瘤的发生 | 第25-29页 |
| 1.5 研究意义 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-50页 |
| 2.1 菌株及质粒 | 第30页 |
| 2.2 实验动物以及细胞 | 第30页 |
| 2.3 实验用常规试剂及试剂盒 | 第30页 |
| 2.4 培养基及细胞培养液配制 | 第30-31页 |
| 2.5 其他常规试剂配制 | 第31-32页 |
| 2.6 实验耗材及抗体 | 第32页 |
| 2.7 主要仪器设备 | 第32页 |
| 2.8 分析工具软件 | 第32页 |
| 2.9 感受态细胞制备 | 第32-33页 |
| 2.10 Qiagen去内毒素试剂盒提取sh-hMSI2 | 第33页 |
| 2.11 总RNA的提取与纯化 | 第33-34页 |
| 2.12 总RNA的纯化(去除DNA] | 第34页 |
| 2.13 反转录 | 第34-35页 |
| 2.14 荧光实时定量PCR反应 | 第35-36页 |
| 2.15 常规PCR反应 | 第36页 |
| 2.16 小鼠小肠组织取样和固定 | 第36-37页 |
| 2.17 免疫组化 | 第37-38页 |
| 2.18 H&E染色 | 第38-39页 |
| 2.19 免疫印迹实验(Western Blot) | 第39-40页 |
| 2.20 小鼠小肠上皮细胞分离 | 第40-41页 |
| 2.21 小肠上皮细胞流式细胞分析 | 第41-42页 |
| 2.22 小肠隐窝组织培养(Oganoid cluture) | 第42页 |
| 2.23 病毒包埋及细胞转染 | 第42-43页 |
| 2.24 TOP Flash/FOP Flash Wnt信号通路检测实验 | 第43页 |
| 2.25 双荧光素酶检测 | 第43-44页 |
| 2.26 MTT细胞生长实验 | 第44页 |
| 2.27 小肠上皮细胞Clip-seq筛选Msi2/MSI2蛋白靶基因 | 第44-49页 |
| 2.28 人结直肠癌细胞的异种移植 | 第49-50页 |
| 第三章 结果 | 第50-75页 |
| 3.1 Msi2在人消化道癌症和APC~(min/+)小鼠腺瘤中表达量的分析 | 第50-52页 |
| 3.2 抑制Msi2基因表达对人结直肠癌细胞系的影响 | 第52-54页 |
| 3.3 Msi2过表达小鼠与APC功能缺失小鼠具有相似的表型 | 第54-61页 |
| 3.4 Msi2过表达所引起小肠表型改变不依赖于Msi1蛋白 | 第61-63页 |
| 3.5 Msi2过表达引起的基因表达特征与APC缺失的相似,但并不依赖于APC功能缺失或者β-catenin的激活 | 第63-67页 |
| 3.6 Msi2蛋白结合位点的转录组水平分析 | 第67-71页 |
| 3.7 Msi2/MSI2通过调控PTEN激活mTORC1信号通路 | 第71-75页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第75-78页 |
| 4.1 Msi2是结直肠癌的一个有效的致癌基因 | 第75页 |
| 4.2 Msi2过表达后小肠上皮细胞获得与APC功能缺失后相似表型 | 第75页 |
| 4.3 Msi2过表达导致结直肠肿瘤的发生不依赖于Wnt信号通路 | 第75-76页 |
| 4.4 Msi2/MSI2激活mTOR信号通路促进肿瘤形成 | 第76-78页 |
| 第五章 结论 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 个人简历 | 第99页 |
