| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-29页 |
| 1 紫茎泽兰概况 | 第17页 |
| 2 紫茎泽兰的危害 | 第17-18页 |
| 3 紫茎泽兰的生态适应性 | 第18-25页 |
| 3.1 紫茎泽兰的光合作用 | 第18-19页 |
| 3.2 紫茎泽兰的化感作用 | 第19-20页 |
| 3.3 紫茎泽兰的遗传多样性 | 第20-21页 |
| 3.4 紫茎泽兰入侵的EICA机制 | 第21页 |
| 3.5 紫茎泽兰的耐寒机制研究 | 第21-25页 |
| 4 逆境下植物基因表达的表观遗传调控 | 第25-29页 |
| 4.1 DNA甲基化 | 第26页 |
| 4.2 DNA甲基化的生物学意义 | 第26-29页 |
| 4.2.1 DNA甲基化与基因表达调控 | 第26页 |
| 4.4.2 DNA甲基化与非生物胁迫 | 第26-29页 |
| 第二章 紫茎泽兰种群耐寒性分化的生物地理分布规律的研究 | 第29-45页 |
| 1 试验材料 | 第31页 |
| 1.1 植物材料 | 第31页 |
| 1.2 仪器 | 第31页 |
| 1.3 分析软件 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-33页 |
| 2.1 紫茎泽兰各种群耐低温能力评价 | 第31-32页 |
| 2.2 用Imaging-PAM比较紫茎泽兰各种群耐寒性 | 第32页 |
| 2.2.1 材料种植 | 第32页 |
| 2.2.2 低温处理 | 第32页 |
| 2.2.3 Imaging-PAM参数设定 | 第32页 |
| 2.2.4 用Imaging-PAM测定各种群耐寒性 | 第32页 |
| 2.3 用Handy-PEA比较紫茎泽兰各种群耐寒性 | 第32-33页 |
| 2.3.1 材料准备 | 第32页 |
| 2.3.2 最佳处理温度的选择 | 第32-33页 |
| 2.3.3 各种群耐寒性比较 | 第33页 |
| 2.4 紫茎泽兰采集地极端温度等数据采集 | 第33页 |
| 2.5 紫茎泽兰耐寒性与极端最低温度、最冷月平均温和纬度的相关性分析 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-43页 |
| 3.1 紫茎泽兰地理种群信息 | 第33-35页 |
| 3.2 紫茎泽兰各种群耐低温能力比较 | 第35-37页 |
| 3.3 用Imaging-PAM比较紫茎泽兰各种群耐寒性 | 第37-38页 |
| 3.4 用Handy-PEA比较紫茎泽兰各种群耐寒性 | 第38-41页 |
| 3.4.1 最佳处理温度的选择 | 第38-39页 |
| 3.4.2 用Handy-PEA比较各种群耐寒性 | 第39-41页 |
| 3.5 紫茎泽兰种群在中国分布规律 | 第41-42页 |
| 3.6 紫茎泽兰种群耐寒性与分布区域纬度、极端最低温度和最冷月平均温的相关性分析 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 紫茎泽兰种群耐寒性分化的ICE-CBFs转录途径分化的研究 | 第45-65页 |
| 1 试验材料 | 第47页 |
| 1.1 植物材料 | 第47页 |
| 1.2 感受态与质粒 | 第47页 |
| 1.3 酶、生化试剂及仪器 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-55页 |
| 2.1 紫茎泽兰AaCBF3、AaCBF2基因克隆和序列分析 | 第47-53页 |
| 2.1.1 利用TIANGEN公司的TRNzol总RNA提取试剂提取RNA | 第47-48页 |
| 2.1.2 反转录cDNA第一链的合成 | 第48页 |
| 2.1.3 设计简并引物得到基因的中间片段 | 第48-49页 |
| 2.1.4 切胶回收 | 第49-50页 |
| 2.1.5 连接反应 | 第50页 |
| 2.1.6 重组载体转化大肠杆菌 | 第50页 |
| 2.1.7 转化子的检测鉴定 | 第50-51页 |
| 2.1.8 用RACE方法得到基因的3’端 | 第51页 |
| 2.1.9 用RACE方法得到基因的5’端 | 第51-52页 |
| 2.1.10 扩增cDNA全长序列 | 第52-53页 |
| 2.2 荧光定量PCR实验(SYBR Green嵌合荧光法) | 第53-55页 |
| 2.2.1 获得cDNA样品 | 第53页 |
| 2.2.2 绘制标准曲线 | 第53页 |
| 2.2.3 Real Time PCR | 第53-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-62页 |
| 3.1 紫茎泽兰AaCBF3、AaCBF2基因克隆 | 第55-56页 |
| 3.2 紫茎泽兰AaCBF3和AaCBF2基因序列分析 | 第56-58页 |
| 3.3 四种群紫茎泽兰AaCBF3和AaCBF2基因序列比较 | 第58-59页 |
| 3.4 CBF转录途径基因表达量的比较与分析 | 第59-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 第四章 紫茎泽兰种群ICE-CBFs转录途径分化的分子机制研究 | 第65-81页 |
| 1 试验材料 | 第67页 |
| 1.1 植物材料 | 第67页 |
| 1.2 感受态与质粒 | 第67页 |
| 1.3 酶、生化试剂及仪器 | 第67页 |
| 2 实验方法 | 第67-72页 |
| 2.1 DNA提取 | 第67-68页 |
| 2.2 侧翼序列扩增(Tail-PCR) | 第68-70页 |
| 2.3 DNA亚硫酸氢盐处理 | 第70-71页 |
| 2.4 PCR扩增 | 第71页 |
| 2.5 切胶回收 | 第71页 |
| 2.6 连接反应 | 第71页 |
| 2.7 重组载体转化大肠杆菌 | 第71-72页 |
| 2.8 转化子的检测鉴定 | 第72页 |
| 3 实验结果与分析 | 第72-79页 |
| 3.1 紫茎泽兰AaICE1、AaCBF3基因侧翼序列扩增及分析 | 第72-73页 |
| 3.2 紫茎泽兰种群间AaICE1、AaCBF3基因侧翼序列比较 | 第73-75页 |
| 3.3 紫茎泽兰种群间AaICE1、AaCBF3甲基化位点比较 | 第75-79页 |
| 3.3.1 紫茎泽兰种群间AaICE1基因区域和启动子区域甲基化位点比较 | 第75-78页 |
| 3.3.2 紫茎泽兰种群间AaCBF3基因区域和启动子区域甲基化位点比较 | 第78-79页 |
| 4 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
