| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-27页 |
| 一、BoHV-1生物学研究概述 | 第13-16页 |
| 1. BoHV-1流行病学 | 第13页 |
| 2. BoHV-1感染的特点 | 第13-15页 |
| 2.1 持续性感染 | 第13-14页 |
| 2.2 潜伏性感染 | 第14页 |
| 2.3 继发性感染 | 第14-15页 |
| 3. BoHV-1感染临床症状 | 第15页 |
| 4. 防治 | 第15-16页 |
| 二、ROS简述 | 第16-18页 |
| 1. ROS产生的机制 | 第16-17页 |
| 2. ROS调节多病毒感染 | 第17-18页 |
| 三、MAPK信号通路 | 第18-19页 |
| 1. MAPK家族 | 第18页 |
| 2. MAPK生物学功能 | 第18-19页 |
| 3. MAPK通路与病毒感染 | 第19页 |
| 四、PLC信号通路的调控 | 第19-20页 |
| 1. PLC的结构与功能 | 第19-20页 |
| 2. PLC参与炎症反应 | 第20页 |
| 五、本研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 第一章 BoHV-1感染调节炎症相关介质分子ROS产生的分子机制 | 第27-43页 |
| 1. 材料 | 第28-29页 |
| 1.1 细胞与病毒 | 第28页 |
| 1.2 试验试剂 | 第28-29页 |
| 2. 方法 | 第29-32页 |
| 2.1 经紫外线照射将BoHV-1灭活 | 第29页 |
| 2.2 BoHV-1感染MDBK细胞过程中胞内ROS水平的检测 | 第29页 |
| 2.3 ROS对BoHV-1感染MDBK细胞的影响 | 第29-30页 |
| 2.4 分析GSH对BoHV-1感染诱导ROS产生的影响 | 第30页 |
| 2.5 分析GSH对BoHV-1复制的影响 | 第30-31页 |
| 2.6 分析GSH联合ACV的抗病毒效果 | 第31页 |
| 2.7 分析BoHV-1感染是否对线粒体造成损伤 | 第31-32页 |
| 2.8 分析BoHV-1感染对细胞内ATP生成的影响 | 第32页 |
| 3. 结果 | 第32-38页 |
| 3.1 BoHV-1感染MDBK细胞过程中诱导ROS产生 | 第32-33页 |
| 3.2 ROS影响BoHV-1感染MDBK细胞过程中的复制 | 第33-34页 |
| 3.3 GSH影响BoHV-1感染诱导的ROS表达 | 第34-35页 |
| 3.4 GSH对病毒复制起重要作用 | 第35-36页 |
| 3.5 GSH提高ACV的抗病毒效果 | 第36-37页 |
| 3.6 BoHV-1感染诱导ROS产生造成线粒体功能障碍 | 第37-38页 |
| 3.7 BoHV-1感染影响细胞内ATP生成 | 第38页 |
| 4. 讨论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 第二章 BoHV-1感染调节MAPK通路的机制研究 | 第43-59页 |
| 1. 材料 | 第44-45页 |
| 1.1 病毒和细胞 | 第44页 |
| 1.2 抗体和试剂 | 第44-45页 |
| 2. 方法 | 第45-46页 |
| 2.1 BoHV-1感染病毒滴度测定 | 第45页 |
| 2.2 紫外线照射灭活BoHV-1 | 第45页 |
| 2.3 siRNA干扰 | 第45-46页 |
| 2.4 分析SP600125和SB203580两种抑制剂对病毒复制的影响 | 第46页 |
| 2.5 细胞裂解和Western blotting | 第46页 |
| 3. 结果 | 第46-52页 |
| 3.1 BoHV-1感染激活p38MAPK和JNK信号通路 | 第46-48页 |
| 3.2 JNK信号影响BoHV-1复制 | 第48-50页 |
| 3.3 BoHV-1感染通过JNK信号激活c-Jun | 第50-52页 |
| 3.4 ROS不参与BoHV-1感染激活MAPK通路 | 第52页 |
| 4. 讨论 | 第52-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 第三章 PLC信号调控多因素诱导的炎症反应 | 第59-79页 |
| 1. 材料 | 第60-61页 |
| 1.1 细胞与病毒 | 第60页 |
| 1.2 试剂与抗体 | 第60-61页 |
| 2. 方法 | 第61-63页 |
| 2.1 小鼠腹腔巨噬细胞采集 | 第61页 |
| 2.2 PMA诱导U937细胞分化 | 第61页 |
| 2.3 流式细胞术 | 第61页 |
| 2.4 荧光定量PCR分析 | 第61-62页 |
| 2.5 细胞因子的ELISA检测 | 第62页 |
| 2.6 Western blotting分析 | 第62页 |
| 2.7 细胞内ROS水平检测 | 第62-63页 |
| 3. 结果 | 第63-72页 |
| 3.1 PLC信号影响PMA诱导U937细胞粘附以及pyk2和paxillin信号表达 | 第63-65页 |
| 3.2 PMA诱导单核细胞U937向巨噬细胞的分化受PLC信号调控 | 第65页 |
| 3.3 LPS诱导dU937细胞表达促炎性细胞因子受PLC信号调控 | 第65-67页 |
| 3.4 LPS诱导腹腔巨噬细胞表达促炎性细胞因子受PLC信号调控 | 第67页 |
| 3.5 流感病毒H1N1感染dU937细胞激活PLC-γ1信号 | 第67-69页 |
| 3.6 流感病毒H1N1感染dU937细胞诱导促炎性细胞因子和趋化因子的表达受PLC信号调控 | 第69-70页 |
| 3.7 流感病毒H1N1感染dU937细胞激活NF-κB信号受PLC信号调控 | 第70-71页 |
| 3.8 流感病毒H1N1感染A549细胞诱导ROS产生受PLC信号调控 | 第71-72页 |
| 4. 讨论 | 第72-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 第四章 BoHV-1感染调控PLC信号及PLC介导的炎症反应 | 第79-92页 |
| 1. 材料 | 第80-81页 |
| 1.1 抗体与试剂 | 第80页 |
| 1.2 细胞与病毒 | 第80-81页 |
| 2. 方法 | 第81-82页 |
| 2.1 抑制病毒复制试验 | 第81页 |
| 2.2 细胞内ROS水平检测 | 第81-82页 |
| 2.3 Western blot实验 | 第82页 |
| 3. 结果 | 第82-87页 |
| 3.1 PLC信号对BoHV-1感染MDBK细胞和RS-1细胞起重要作用 | 第82-84页 |
| 3.2 PLC信号对于BoHV-1感染侵入阶段具有重要意义 | 第84页 |
| 3.3 BoHV-1感染MDBK细胞过程中激活PLC信号 | 第84-85页 |
| 3.4 BoHV-1感染激活Erk1/2和p38MAPK通路受PLC信号调控 | 第85-87页 |
| 3.5 BoHV-1感染诱导ROS表达受PLC信号调控 | 第87页 |
| 4. 讨论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-92页 |
| 全文总结 | 第92-93页 |
| 论文创新点 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间文章发表与学术交流情况 | 第95-96页 |
