| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 英文缩写说明 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1. SHG-44(human malignant glioma cells) | 第10-12页 |
| ·恶性神经胶质瘤的治疗现状 | 第10-11页 |
| ·治疗恶性神经胶质瘤的靶点 | 第11-12页 |
| 2. AGAP(analgesic antitumoral peptide) | 第12-16页 |
| ·蝎毒素简介 | 第12-13页 |
| ·蝎毒素抗肿瘤研究进展 | 第13-14页 |
| ·蝎毒素抗肿瘤的作用机制 | 第14页 |
| ·AGAP简介 | 第14-16页 |
| 第二章 重组蛋白rAGAP的制备 | 第16-29页 |
| 1. 实验材料 | 第16-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·实验材料和试剂 | 第16-17页 |
| ·菌种和质粒 | 第17页 |
| ·主要溶液的配制 | 第17-18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-24页 |
| ·pET29a-AGAP融合载体的构建 | 第18-21页 |
| ·pET29a-AGAP在大肠杆菌中的表达 | 第21-22页 |
| ·Western blot鉴定 | 第22-24页 |
| 3. 实验结果 | 第24-27页 |
| ·rAGAP表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·rAGAP蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| ·western blot鉴定rAGAP蛋白 | 第26-27页 |
| 4. 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 rAGAP对神经胶质瘤细胞SHG-44增殖迁移的影响及其机制的探索 | 第29-52页 |
| 1. 实验材料 | 第29-31页 |
| ·细胞系 | 第29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29-30页 |
| ·抗体 | 第30页 |
| ·主要试剂配制 | 第30-31页 |
| 2. 实验方法 | 第31-40页 |
| ·细胞培养、冻存与复苏 | 第31-32页 |
| ·细胞的传代培养 | 第32页 |
| ·MTT法测定重组蛋白rAGAP对SHG-44和C6胶质瘤细胞的增殖抑制率 | 第32-33页 |
| ·流式细胞仪检测rAGAP对SHG-44胶质瘤细胞周期的影响 | 第33页 |
| ·用单层伤口愈合实验检测rAGAP对SHG-44胶质瘤细胞迁移的影响 | 第33-34页 |
| ·用western blot从蛋白水平研究rAGAP阻滞SHG-44细胞周期和抑制细胞迁移的作用机制 | 第34-36页 |
| ·用RT-PCR从mRNA水平研究rAGAP阻滞SHG-44细胞周期和抑制细胞迁移的作用机制 | 第36-39页 |
| ·明胶酶谱实验 | 第39-40页 |
| ·统计学方法 | 第40页 |
| 4. 实验结果 | 第40-46页 |
| ·不同浓度的rAGAP对SHG-44胶质瘤细胞增殖活性的影响 | 第40-41页 |
| ·流式细胞仪检测rAGAP对SHG-44神经胶质瘤细胞周期的阻滞 | 第41-42页 |
| ·rAGAP对SHG-44细胞迁移的抑制 | 第42-43页 |
| ·western blot检测rAGAP对SHG-44细胞周期蛋白表达量的影响 | 第43-44页 |
| ·Western blot检测rAGAP对SHG-44细胞增殖迁移相关信号通路蛋白表达量的影响 | 第44-45页 |
| ·rAGAP对SHG-44细胞增殖迁移相关基因的影响 | 第45页 |
| ·明胶酶谱分析 | 第45-46页 |
| 5. 讨论 | 第46-52页 |
| ·MTT检测rAGAP对SHG-44胶质瘤细胞毒性 | 第46-47页 |
| ·rAGAP对SHG-44胶质瘤细胞周期的影响 | 第47-48页 |
| ·rAGAP对SHG-44胶质瘤细胞迁移的影响 | 第48-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录:在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
