摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
目录 | 第10-12页 |
1. 前言 | 第12-20页 |
1.1 昆虫的先天免疫机制 | 第12-17页 |
1.1.1 体液免疫 | 第13-15页 |
1.1.2 细胞免疫 | 第15-17页 |
1.2 RNAi技术及其应用 | 第17-18页 |
1.2.1 RNAi技术的作用机制 | 第17-18页 |
1.2.2 RNAi技术的应用 | 第18页 |
1.3 本论文研究的目的和意义 | 第18-20页 |
2. 材料与方法 | 第20-39页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 供试昆虫-棉铃虫 | 第20页 |
2.1.2 实验菌株和载体 | 第20页 |
2.1.3 实验仪器和设备 | 第20-21页 |
2.1.4 主要试剂 | 第21-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-39页 |
2.2.1 Ha-DFP1基因的克隆 | 第23-27页 |
2.2.2 Ha-DFP1基因在各组织中的表达 | 第27页 |
2.2.3 注射激素和凝胶珠 | 第27-28页 |
2.2.4 qRT-PCR检测血细胞中Ha-DFP1基因的相对表达量 | 第28页 |
2.2.5 Ha-DFP1基因的原核表达 | 第28-33页 |
2.2.6 重组蛋白的体外功能实验 | 第33-34页 |
2.2.7 RNA干扰 | 第34-39页 |
3. 结果与分析 | 第39-50页 |
3.1 棉铃虫Ha-DFP1基因克隆及序列分析 | 第39-40页 |
3.1.1 基因克隆 | 第39页 |
3.1.2 棉铃虫Ha-DFP1基因的序列分析 | 第39-40页 |
3.2 棉铃虫Ha-DFP1基因的组织特异表达分析 | 第40-41页 |
3.3 注射不同外源物对棉铃虫血细胞中Ha-DFP1基因的表达的影响 | 第41-42页 |
3.3.1 激素刺激对棉铃虫血细胞中Ha-DFP1表达量的影响 | 第41-42页 |
3.3.2 凝胶珠免疫刺激对棉铃虫血细胞中Ha-DFP1表达量的影响 | 第42页 |
3.4 Ha-DFP1基因的重组表达及蛋白纯化 | 第42-44页 |
3.4.1 pET32a-Ha-DFP1重组质粒的构建 | 第42-43页 |
3.4.2 Ha-DFP1的诱导表达和纯化 | 第43-44页 |
3.5 rHa-DFP1免疫功能的研究 | 第44-46页 |
3.5.1 rHa-DFP1对细菌的凝集作用 | 第44-45页 |
3.5.2 rHa-DFP1体外促进血细胞的包囊 | 第45页 |
3.5.3 rHa-DFP1能体外促进酚氧化酶原的激活 | 第45-46页 |
3.6 敲降Ha-DFP1基因的表达对棉铃虫免疫反应的影响 | 第46-50页 |
3.6.1 干扰效果的验证 | 第46-47页 |
3.6.2 干扰棉铃虫Ha-DFP1基因的表达对血细胞包囊能力的影响 | 第47页 |
3.6.3 干扰棉铃虫Ha-DFP1基因的表达对血细胞延展行为的影响 | 第47-48页 |
3.6.4 干扰棉铃虫Ha-DFP1基因的表达对酚氧化酶原激活的影响 | 第48-50页 |
4. 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
硕士期间论文发表情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |