摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
1 综述 | 第10-21页 |
·逆境胁迫对植物的损害 | 第10-14页 |
·干旱胁迫对植物的损害 | 第10-11页 |
·高盐胁迫对植物的损害 | 第11-13页 |
·低温胁迫对植物的损害 | 第13-14页 |
·逆境胁迫下植物细胞的信号传导 | 第14-16页 |
·植物AP2/EREBP 转录因子家族 | 第16-19页 |
·转录因子概述 | 第16-17页 |
·植物AP2/EREBP 转录因子家族 | 第17页 |
·EREBP 转录因子在植物抗逆中的作用 | 第17-18页 |
·AP2/EREBP 转录因子与植物进化的关系 | 第18-19页 |
·本研究的内容和意义 | 第19-21页 |
2 材料和方法 | 第21-42页 |
·试验材料 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌株及质粒载体 | 第21页 |
·酶和试剂 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-42页 |
·长穗偃麦草cDNA 第一条链获得方法 | 第22-23页 |
·长穗偃麦草基因组DNA 的提取 | 第23-24页 |
·EeAP2.2 基因的克隆 | 第24-30页 |
·EeAP2-1.1 基因的克隆 | 第30-32页 |
·EeAP2.2 基因真核表达载体构建 | 第32-34页 |
·EeAP2-1.1 基因真核表达载体构建 | 第34页 |
·烟草的遗传转化 | 第34-37页 |
·酵母单杂交验证EeAP2.2 编码的蛋白与DRE 顺式作用元件的结合 | 第37-40页 |
·茎尖法小麦转EeAP2-1.1 基因 | 第40页 |
·EeAP2.2 和EeAP2-1.1 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第40-42页 |
3 结果与分析 | 第42-57页 |
·长穗偃麦草EeAP2.2 基因的克隆 | 第42-46页 |
·长穗偃麦草总RNA 检测 | 第42页 |
·EeAP2.2 RT-PCR 扩增结果 | 第42-43页 |
·EeAP2.2 基因3'_RACE 扩增结果 | 第43页 |
·EeAP2.2 基因 Genome Walking 扩增结果 | 第43-44页 |
·测序结果的分析,拼接及ORF 框的扩增 | 第44-46页 |
·长穗偃麦草EeAP2-1.1 基因的克隆 | 第46-47页 |
·EeAP2-1.1 基因开放读码框的扩增结果 | 第46-47页 |
·EeAP2-1.1 基因3'_RACE 扩增结果 | 第47页 |
·EeAP2.2 基因真核表达载体的构建 | 第47-49页 |
·获得完整目的基因片段的BamHⅠ酶切条件摸索 | 第47-48页 |
·EeAP2.2 真核表达载体的构建及酶切鉴定 | 第48-49页 |
·EeAP2-1.1 基因真核表达载体的构建 | 第49-50页 |
·获得完整目的基因片段的BamHⅠ酶切条件摸索 | 第49-50页 |
·EeAP2-1.1 真核表达载体的构建及酶切鉴定 | 第50页 |
·EeAP2-1.1 和EeAP2.2 转化农杆菌C58 的阳性克隆鉴定 | 第50页 |
·PCR 检测卡那抗性烟草植株 | 第50-52页 |
·组织化学法检测GUS 基因的表达 | 第52页 |
·酵母单杂交 | 第52-55页 |
·用于构建AD 融合表达载体的EeAP2.2 基因ORF 框的扩增结果 | 第52-53页 |
·pGAD- EeAP2.2 的构建及鉴定结果 | 第53-54页 |
·酵母转化子的PCR 鉴定 | 第54页 |
·EeAP2.2 转录激活作用的验证 | 第54-55页 |
·茎尖法小麦转EeAP2-1.1 基因 | 第55页 |
·EeAP2.2 及EeAP2-1.1 基因生物信息学分析 | 第55-57页 |
·EeAP2.2 编码的氨基酸序列与其他植物氨基酸序列同源性的比较 | 第55页 |
·EeAP2-1.1 编码的氨基酸序列与其他植物氨基酸序列同源性的比较 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-62页 |
·关于基因克隆 | 第57-58页 |
·关于部分双酶切 | 第58-59页 |
·关于酵母单杂交 | 第59页 |
·关于长穗偃麦草AP2/EREBP 家族的转录因子 | 第59-61页 |
·关于茎尖法小麦转基因 | 第61-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
在读期间发表论文 | 第67-68页 |
作者简历 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录I:试验中载体构建流程图 | 第70-71页 |