| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 1 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 苹果病毒病国内外研究进展 | 第12页 |
| 1.2 苹果病毒的特性及危害特点 | 第12-14页 |
| 1.2.1 苹果茎沟病毒 | 第12-13页 |
| 1.2.2 苹果褪绿叶斑病毒 | 第13页 |
| 1.2.3 苹果茎痘病毒 | 第13页 |
| 1.2.4 苹果锈果类病毒 | 第13页 |
| 1.2.5 苹果花叶病毒 | 第13-14页 |
| 1.3 我国苹果病毒的分布 | 第14页 |
| 1.4 苹果病毒的传播途径 | 第14-15页 |
| 1.5 外界环境对植物病毒体内分布的影响 | 第15页 |
| 1.6 苹果病毒脱毒技术 | 第15-17页 |
| 1.7 病毒检测技术 | 第17-19页 |
| 1.7.1 指示植物检测法 | 第17页 |
| 1.7.2 电子显微技术 | 第17页 |
| 1.7.3 酶联免疫吸附法 | 第17-18页 |
| 1.7.4 分子生物学方法 | 第18-19页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.2 试剂和仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第20页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.3 总 RNA 的提取和质量检测 | 第21页 |
| 2.3.1 总 RNA 的提取 | 第21页 |
| 2.3.2 总 RNA 质量检测 | 第21页 |
| 2.4 苹果潜隐性病毒 RT-PCR 检测体系 | 第21-23页 |
| 2.4.1 引物序列合成 | 第21-22页 |
| 2.4.2 反转录体系 | 第22页 |
| 2.4.3 PCR 检测体系 | 第22-23页 |
| 2.4.4 PCR 产物凝胶分析 | 第23页 |
| 2.5 ASGV 和 ACLSV 荧光定量 PCR 体系 | 第23-24页 |
| 2.6 组培条件下 ASGV 和 ACLSV 的分布与含量变化研究 | 第24-25页 |
| 2.7 变温处理对苹果潜隐性病毒的脱除效果研究 | 第25页 |
| 2.7.1 变温处理过程 | 第25页 |
| 2.7.2 结果统计 | 第25页 |
| 2.8 组培条件下 ASGV 和 ACLSV 的传播途径研究 | 第25-27页 |
| 2.8.1 苹果潜隐性病毒的传播途径研究 | 第25-26页 |
| 2.8.2 苹果潜隐性病毒的传播速度研究 | 第26页 |
| 2.8.3 检测结果统计 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-40页 |
| 3.1 总 RNA 提取及苹果病毒 RT-PCR 检测效果图 | 第27-28页 |
| 3.1.1 样品的总 RNA 提取效果图 | 第27页 |
| 3.1.2 苹果潜隐性病毒两步多重 PCR 检测效果图 | 第27-28页 |
| 3.2 荧光定量检测体系可靠性验证 | 第28-30页 |
| 3.3 组培条件下 ASGV 和 ACLSV 的分布与含量变化研究 | 第30-32页 |
| 3.3.1 同一株带毒组培苗，不同部位 ASGV 和 ACLSV 相对含量的差异 | 第30页 |
| 3.3.2 一个继代周期不同继代天数，ASGV 和 ACLSV 相对含量的变化趋势 | 第30-31页 |
| 3.3.3 不同培养温度对 ASGV 和 ACLSV 相对含量的影响 | 第31-32页 |
| 3.4 变温处理对苹果潜隐性病毒的脱除效果研究 | 第32-35页 |
| 3.4.1 变温处理对植株生长的影响 | 第32页 |
| 3.4.2 不同变温处理条件对病毒脱除的影响 | 第32-33页 |
| 3.4.3 不同苹果基因型的脱毒效果比较 | 第33页 |
| 3.4.4 不同病毒类型脱除效果比较 | 第33-34页 |
| 3.4.5 不同时间病毒检出率比较 | 第34-35页 |
| 3.5 组培条件下 ASGV 和 ACLSV 的传播途径研究 | 第35-40页 |
| 3.5.1 组培条件下，不同传毒途径苹果潜隐性病毒传毒情况检测 | 第35-36页 |
| 3.5.2 组培苗中 ASGV 和 ACLSV 传毒差异比较 | 第36-37页 |
| 3.5.3 苹果潜隐性病毒传播速度及积累规律研究 | 第37页 |
| 3.5.4 组培苗中 ASGV 和 ACLSV 传播速度和积累规律差异比较 | 第37-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| 4.1 ASGV 和 ACLSV 在组培苗不同部位及不同培养天数下的相对含量变化 | 第40-41页 |
| 4.2 组织培养温度对苹果潜隐性病毒含量变化的影响 | 第41页 |
| 4.3 组培条件下苹果潜隐性病毒的传播途径研究 | 第41-42页 |
| 4.4 苹果潜隐性病毒的变温热处理脱毒效果分析 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 在读期间发表论文 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
