摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-16页 |
·拟穴青蟹养殖及病害研究进展 | 第9-10页 |
·拟穴青蟹免疫因子研究进展 | 第10-11页 |
·Toll 样受体研究进展 | 第11-15页 |
·Toll 样受体(Toll-like receptor, TLR) 的发现及其免疫学功能研究进展 | 第11-14页 |
·甲壳动物Toll 样受体研究进展 | 第14-15页 |
·本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
·本研究的目的 | 第15页 |
·本研究的意义 | 第15-16页 |
第二章 拟穴青蟹Toll 样受体的基因克隆与表达分析 | 第16-37页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·实验动物 | 第16页 |
·细菌及培养基 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·主要仪器设备 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-22页 |
·总RNA 的提取 | 第17页 |
·mRNA 反转录 | 第17页 |
·简并PCR 扩增 | 第17-19页 |
·RACE 技术 | 第19-20页 |
·PCR 产物纯化和酶连 | 第20页 |
·感受态细胞的制备 | 第20页 |
·转化 | 第20页 |
·阳性克隆子的鉴定及测序 | 第20-21页 |
·生物信息学分析 | 第21页 |
·Realtime PCR(SYBR GreenⅠ法) | 第21-22页 |
·免疫刺激 | 第22页 |
·结果 | 第22-35页 |
·拟穴青蟹Toll 样受体的全长cDNA 克隆 | 第22-23页 |
·拟穴青蟹Toll 样受体基因的生物信息学分析 | 第23-33页 |
·拟穴青蟹SpToll 基因组织表达特异性分析 | 第33页 |
·免疫刺激前后拟穴青蟹SpToll 基因的表达变化 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第三章 拟穴青蟹Toll 受体 LRRs 区SNPs 多态性分析 | 第37-51页 |
·材料与方法 | 第37-40页 |
·基因组DNA 的提取 | 第37页 |
·变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术 | 第37-39页 |
·统计分析方法 | 第39-40页 |
·实验结果 | 第40-48页 |
·拟穴青蟹SpToll 基因LRRs 区PCR-DGGE 结果 | 第40-41页 |
·SpToll LRRs 区基因组DNA 水平和cDNA 水平的SNPs 比较 | 第41-47页 |
·高频突变位点c.1847A>G 的功能预测及遗传变异分析 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
结论 | 第51-52页 |
附章 穴青蟹SpLRR 基因的克隆及生物信息学分析 | 第52-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63页 |