摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
文献综述 | 第12-20页 |
第一章 白细胞介素 32 基因研究进展 | 第12-20页 |
·IL-32 的生物学特性 | 第12-13页 |
·IL-32 的来源 | 第12页 |
·IL-32 的亚型 | 第12-13页 |
·IL-32 的生物学功能 | 第13-15页 |
·IL-32 诱导细胞因子产生炎症反应 | 第13-15页 |
·IL-32 介导 T 细胞凋亡 | 第15页 |
·IL-32 的受体及信号转导 | 第15-16页 |
·IL-32 与疾病发生 | 第16-20页 |
·IL-32 与类风湿关节炎 | 第16-17页 |
·IL-32 与克罗恩病 | 第17页 |
·IL-32 与癌症 | 第17-18页 |
·IL-32 与流感 | 第18页 |
·IL-32 基因与结核菌 | 第18-20页 |
试验研究 | 第20-55页 |
第二章 牛白细胞介素 32 基因Β、Γ亚型的序列分析与分子克隆 | 第20-35页 |
·试验材料 | 第20-22页 |
·试验用组织、工程菌及载体 | 第20页 |
·试验用主要试剂及工具酶 | 第20页 |
·试验用主要仪器与设备 | 第20-21页 |
·主要试剂配方 | 第21页 |
·分子生物学与生物信息学软件、数据库、网站 | 第21-22页 |
·试验方法 | 第22-27页 |
·数据库中牛白细胞介素 32 基因的序列比对 | 第22页 |
·牛白细胞介素 32 基因的分子克隆 | 第22-27页 |
·牛 IL-32β的组织表达特异性分析 | 第27页 |
·牛 IL-32 基因生物信息学预测与分析 | 第27页 |
·试验结果 | 第27-33页 |
·牛白细胞介素 32 基因的序列分析 | 第27-29页 |
·牛白细胞介素 32 基因的分子克隆 | 第29-30页 |
·牛 IL-32β的组织特异性表达 | 第30-31页 |
·牛 IL-32 基因生物信息学分析 | 第31-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
第三章 牛白细胞介素 32 基因的原核表达 | 第35-41页 |
·试验材料 | 第35-36页 |
·试验用工程菌及载体 | 第35页 |
·试验用主要试剂及工具酶 | 第35页 |
·试验用主要仪器与设备 | 第35-36页 |
·主要试剂配方 | 第36页 |
·试验方法 | 第36-38页 |
·白细胞介素 32 基因的原核表达载体的构建 | 第36-37页 |
·白细胞介素 32 基因在大肠杆菌 BL21(DE3)菌体中的原核表达 | 第37页 |
·SDS-PAGE 检测 IL-32γ基因的表达 | 第37-38页 |
·试验结果 | 第38-39页 |
·原核表达载体的构建及酶切鉴定 | 第38-39页 |
·SDS-PAGE 检测 IL-32 基因的表达 | 第39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第四章 牛白细胞介素 32 基因的真核表达及稳转细胞系的筛选 | 第41-50页 |
·试验材料 | 第41-42页 |
·试验用材料、工程菌、细胞及载体 | 第41页 |
·试验用主要试剂及工具酶 | 第41页 |
·试验用主要仪器与设备 | 第41-42页 |
·主要试剂配方 | 第42页 |
·试验方法 | 第42-44页 |
·白细胞介素 32 基因的真核表达载体的构建 | 第42页 |
·真核表达载体的细胞水平验证 | 第42-43页 |
·pIRES-IL32γ-GFP 稳定转染小鼠巨噬细胞 RAW264.7 | 第43-44页 |
·试验结果 | 第44-49页 |
·真核表达载体的构建及酶切鉴定 | 第44-45页 |
·在巨噬细胞中表达 IL-32 | 第45-47页 |
·建立牛和人 IL32γ-GFP 稳转小鼠巨噬细胞系 | 第47-49页 |
·讨论 | 第49页 |
·小结 | 第49-50页 |
第五章 牛白细胞介素 32 基因的功能验证 | 第50-55页 |
·试验材料 | 第50页 |
·试验用主要试剂及工具酶 | 第50页 |
·试验用主要仪器与设备 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-51页 |
·引物设计与合成 | 第50-51页 |
·半定量 PCR 检测瞬转 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达情况 | 第51页 |
·实时定量 PCR 检测稳定转染 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达情况 | 第51页 |
·试验结果 | 第51-54页 |
·半定量 PCR 检测瞬转 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达情况 | 第51-52页 |
·实时定量 PCR 检测稳定转染 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达 | 第52-54页 |
·讨论 | 第54页 |
·小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
创新点 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
缩略词表 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |