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牛白细胞介素32基因β、γ亚型的分子克隆与功能验证

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-20页
 第一章 白细胞介素 32 基因研究进展第12-20页
   ·IL-32 的生物学特性第12-13页
     ·IL-32 的来源第12页
     ·IL-32 的亚型第12-13页
   ·IL-32 的生物学功能第13-15页
     ·IL-32 诱导细胞因子产生炎症反应第13-15页
     ·IL-32 介导 T 细胞凋亡第15页
   ·IL-32 的受体及信号转导第15-16页
   ·IL-32 与疾病发生第16-20页
     ·IL-32 与类风湿关节炎第16-17页
     ·IL-32 与克罗恩病第17页
     ·IL-32 与癌症第17-18页
     ·IL-32 与流感第18页
     ·IL-32 基因与结核菌第18-20页
试验研究第20-55页
 第二章 牛白细胞介素 32 基因Β、Γ亚型的序列分析与分子克隆第20-35页
   ·试验材料第20-22页
     ·试验用组织、工程菌及载体第20页
     ·试验用主要试剂及工具酶第20页
     ·试验用主要仪器与设备第20-21页
     ·主要试剂配方第21页
     ·分子生物学与生物信息学软件、数据库、网站第21-22页
   ·试验方法第22-27页
     ·数据库中牛白细胞介素 32 基因的序列比对第22页
     ·牛白细胞介素 32 基因的分子克隆第22-27页
     ·牛 IL-32β的组织表达特异性分析第27页
     ·牛 IL-32 基因生物信息学预测与分析第27页
   ·试验结果第27-33页
     ·牛白细胞介素 32 基因的序列分析第27-29页
     ·牛白细胞介素 32 基因的分子克隆第29-30页
     ·牛 IL-32β的组织特异性表达第30-31页
     ·牛 IL-32 基因生物信息学分析第31-33页
   ·讨论第33-34页
   ·小结第34-35页
 第三章 牛白细胞介素 32 基因的原核表达第35-41页
   ·试验材料第35-36页
     ·试验用工程菌及载体第35页
     ·试验用主要试剂及工具酶第35页
     ·试验用主要仪器与设备第35-36页
     ·主要试剂配方第36页
   ·试验方法第36-38页
     ·白细胞介素 32 基因的原核表达载体的构建第36-37页
     ·白细胞介素 32 基因在大肠杆菌 BL21(DE3)菌体中的原核表达第37页
     ·SDS-PAGE 检测 IL-32γ基因的表达第37-38页
   ·试验结果第38-39页
     ·原核表达载体的构建及酶切鉴定第38-39页
     ·SDS-PAGE 检测 IL-32 基因的表达第39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
 第四章 牛白细胞介素 32 基因的真核表达及稳转细胞系的筛选第41-50页
   ·试验材料第41-42页
     ·试验用材料、工程菌、细胞及载体第41页
     ·试验用主要试剂及工具酶第41页
     ·试验用主要仪器与设备第41-42页
     ·主要试剂配方第42页
   ·试验方法第42-44页
     ·白细胞介素 32 基因的真核表达载体的构建第42页
     ·真核表达载体的细胞水平验证第42-43页
     ·pIRES-IL32γ-GFP 稳定转染小鼠巨噬细胞 RAW264.7第43-44页
   ·试验结果第44-49页
     ·真核表达载体的构建及酶切鉴定第44-45页
     ·在巨噬细胞中表达 IL-32第45-47页
     ·建立牛和人 IL32γ-GFP 稳转小鼠巨噬细胞系第47-49页
   ·讨论第49页
   ·小结第49-50页
 第五章 牛白细胞介素 32 基因的功能验证第50-55页
   ·试验材料第50页
     ·试验用主要试剂及工具酶第50页
     ·试验用主要仪器与设备第50页
   ·试验方法第50-51页
     ·引物设计与合成第50-51页
     ·半定量 PCR 检测瞬转 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达情况第51页
     ·实时定量 PCR 检测稳定转染 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达情况第51页
   ·试验结果第51-54页
     ·半定量 PCR 检测瞬转 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达情况第51-52页
     ·实时定量 PCR 检测稳定转染 IL-32 基因的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞的免疫细胞因子表达第52-54页
   ·讨论第54页
   ·小结第54-55页
结论第55-56页
创新点第56-57页
参考文献第57-62页
缩略词表第62-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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