摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
第一章 前言 | 第8-14页 |
·细胞周期的研究现状 | 第8-9页 |
·SILAC定量蛋白质组学技术 | 第9-10页 |
·蛋白质组学技术在细胞周期研究中的应用 | 第10-12页 |
·利用SILAC技术研究细胞周期中蛋白质的更新 | 第12-14页 |
第二章 技术路线 | 第14-15页 |
第三章 材料与方法 | 第15-24页 |
·细胞系 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·细胞培养试剂 | 第15页 |
·Western blot试剂及部分试剂配方 | 第15-16页 |
·胶内酶解试剂 | 第16页 |
·主要仪器 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-24页 |
·普通培养基细胞培养与细胞周期同步化 | 第17页 |
·SILAC培养基配制 | 第17-18页 |
·SILAC培养基细胞培养与细胞周期同步化 | 第18页 |
·流式监测细胞周期 | 第18-19页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第19页 |
·BCA法蛋白浓度测定 | 第19-20页 |
·Western blot检测过程 | 第20页 |
·胶内酶解 | 第20-21页 |
·质谱分析 | 第21-22页 |
·定量(MaxQuant)与搜库(Mascot) | 第22-23页 |
·Gene Ontology(GO)分析 | 第23页 |
·Cytoscape构建蛋白质相互作用网络 | 第23-24页 |
第四章 结果 | 第24-34页 |
·BCA法测蛋白浓度 | 第24-25页 |
·细胞周期同步化的流式结果 | 第25-26页 |
·细胞周期同步化的Western blot验证 | 第26页 |
·质谱平台的细胞样品测试 | 第26-27页 |
·蛋白质更新的总体动态 | 第27-28页 |
·Gene Ontology分析 | 第28-32页 |
·细胞组分(Cellular component)分析 | 第28-30页 |
·分子功能(Molecular function)分析 | 第30-31页 |
·生物过程(Biological process)分析 | 第31-32页 |
·蛋白复合体的更新模式 | 第32页 |
·蛋白质相互作用网络分析 | 第32-34页 |
第五章 结论与讨论 | 第34-40页 |
·细胞周期中蛋白质更新速率与功能密切相关 | 第34页 |
·中心体周期 | 第34-35页 |
·驱动蛋白 | 第35-36页 |
·细胞周期中的细胞形态变化 | 第36-38页 |
·内质网和高尔基体 | 第38页 |
·过氧化物酶体和代谢 | 第38-39页 |
·线粒体与代谢 | 第39-40页 |
第六章 总结 | 第40-41页 |
·主要结果 | 第40页 |
·本研究的创新之处 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
附录 | 第45-47页 |
在学期间发表文章 | 第47-48页 |
致谢 | 第48页 |