| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 昆虫滞育的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 昆虫滞育解除的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 柞蚕蛹滞育及解除研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 糖含量测定 | 第16页 |
| 1.5 海藻糖及其功能 | 第16-18页 |
| 1.6 昆虫代谢的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.7 昆虫海藻糖合成酶基因的研究现状 | 第19-20页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 光照解除柞蚕蛹滞育过程中糖含量的变化 | 第21-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-22页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 仪器与试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第21-22页 |
| 2.2 结果与分析 | 第22-25页 |
| 2.2.1 光照处理对柞蚕蛹滞育解除效果的影响 | 第22页 |
| 2.2.2 不同光照处理对柞蚕蛹滞育解除后羽化率的影响 | 第22-23页 |
| 2.2.3 柞蚕蛹滞育解除期间糖含量的变化 | 第23-25页 |
| 2.3 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 柞蚕海藻糖合成酶基因的克隆与序列分析 | 第27-38页 |
| 3.1 试验材料与仪器 | 第27-28页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第27页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 3.2 试验方法 | 第28-32页 |
| 3.2.1 感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 3.2.2 总RNA的提取试验准备 | 第28页 |
| 3.2.3 总RNA提取 | 第28-29页 |
| 3.2.4 cDNA的合成 | 第29页 |
| 3.2.5 ApTPS基因的扩增 | 第29-30页 |
| 3.2.6 目的基因的回收纯化 | 第30页 |
| 3.2.7 目的基因的连接与转化 | 第30-31页 |
| 3.2.8 3'RACE扩增 | 第31页 |
| 3.2.9 ApTPS基因序列分析及系统发育树的构建 | 第31-32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-37页 |
| 3.3.1 总RNA的提取及测定 | 第32页 |
| 3.3.2 ApTPS基因的克隆及序列分析 | 第32-35页 |
| 3.3.3 ApTPS基因同源比对和系统进化分析 | 第35-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 柞蚕滞育蛹海藻糖合成酶基因的表达分析 | 第38-42页 |
| 4.1 试验材料与仪器 | 第38页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第38页 |
| 4.2 试验方法 | 第38-40页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第38-39页 |
| 4.2.2 ApTPS基因组织特异性分析 | 第39页 |
| 4.2.3 柞蚕蛹解除滞育期间ApTPS基因的表达 | 第39-40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-41页 |
| 4.3.1 柞蚕ApTPS基因组织表达谱分析 | 第40页 |
| 4.3.2 柞蚕蛹解除滞育期间ApTPS基因实时荧光定量表达分析 | 第40-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 海藻糖合成酶基因的原核表达 | 第42-52页 |
| 5.1 试验材料与器材 | 第42-43页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第42页 |
| 5.1.2 仪器设备 | 第42页 |
| 5.1.3 试验试剂 | 第42-43页 |
| 5.2 试验方法 | 第43-47页 |
| 5.2.1 柞蚕海藻糖合成酶基因原核表达载体的构建 | 第43页 |
| 5.2.2 连接反应 | 第43-44页 |
| 5.2.3 质粒的提取 | 第44页 |
| 5.2.4 转化到BL21 (DE3) | 第44页 |
| 5.2.5 融合蛋白ApTPS-pET-28a的表达和分析 | 第44-45页 |
| 5.2.6 ApTPS-pET-28a蛋白的纯化 | 第45页 |
| 5.2.7 ApTPS-pET-28a变复性及分析 | 第45页 |
| 5.2.8 抗体的制备 | 第45页 |
| 5.2.9 蛋白质提取 | 第45-46页 |
| 5.2.10 蛋白质浓度的测定 | 第46页 |
| 5.2.11 目的蛋白的Western Blot | 第46-47页 |
| 5.3 结果与分析 | 第47-50页 |
| 5.3.1 构建ApTPS基因原核表达载体 | 第47-48页 |
| 5.3.2 ApTPS基因原核表达蛋白的纯化、变复性和分析 | 第48-49页 |
| 5.3.3 蛋白质标准曲线的绘制 | 第49页 |
| 5.3.4 Western Blot验证 | 第49页 |
| 5.3.5 柞蚕蛹滞育解除过程中海藻糖合成酶的含量分析 | 第49-50页 |
| 5.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第六章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
