| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 类黄酮物质的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1.1 类黄酮物质的分布及种类 | 第13-14页 |
| 1.1.2 类黄酮物质的生物合成 | 第14-15页 |
| 1.1.3 类黄酮物质的功能 | 第15-16页 |
| 1.2 棉花中类黄酮相关研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 棉花概述 | 第16页 |
| 1.2.2 棉花中类黄酮研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 查耳酮异构酶（CHI）的研究进展 | 第17-23页 |
| 1.3.1 CHI基因的结构及表达特异性 | 第17-18页 |
| 1.3.2 CHI蛋白的分类 | 第18-19页 |
| 1.3.3 CHI的催化机制 | 第19-20页 |
| 1.3.4 CHI在类黄酮合成中的作用及对植物生长发育的影响 | 第20-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-25页 |
| 2.1 立题依据及研究目的 | 第23-24页 |
| 2.2 技术路线 | 第24-25页 |
| 第三章 材料与方法 | 第25-37页 |
| 3.1 材料 | 第25-29页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 3.1.2 主要溶液及配方 | 第25-27页 |
| 3.1.3 主要培养基及配方 | 第27-28页 |
| 3.1.4 实验中所使用的PCR引物 | 第28-29页 |
| 3.2 方法 | 第29-37页 |
| 3.2.1 大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第29页 |
| 3.2.2 农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第29-30页 |
| 3.2.3 质粒提取及DNA片段回收、连接 | 第30页 |
| 3.2.4 GhCHI重组蛋白的酶活检测 | 第30-32页 |
| 3.2.5 棉花的遗传转化 | 第32页 |
| 3.2.6 转基因植株的鉴定 | 第32页 |
| 3.2.7 基因组g DNA快速提取方法 | 第32页 |
| 3.2.8 RNA快速提取及c DNA合成方法 | 第32-33页 |
| 3.2.9 基因的实时定量RT-PCR分析 | 第33页 |
| 3.2.10 棉花GhCHI蛋白酶活的检测 | 第33-34页 |
| 3.2.11 冰冻切片 | 第34页 |
| 3.2.12 DPBA-类黄酮染色观察 | 第34页 |
| 3.2.13 花色素检测 | 第34-35页 |
| 3.2.14 可溶性原花色素检测 | 第35页 |
| 3.2.15 棉花在低温胁迫时的变化 | 第35-37页 |
| 第四章 结果与分析 | 第37-57页 |
| 4.1 GhCHI基因的生物信息学分析及表达分析 | 第37-44页 |
| 4.1.1 GhCHI的系统进化分析 | 第37-38页 |
| 4.1.2 GhCHI基因序列分析 | 第38-40页 |
| 4.1.3 类黄酮结构基因的表达分析 | 第40-44页 |
| 4.2 GhCHI重组蛋白的酶活检测 | 第44-50页 |
| 4.2.1 GhCHI原核表达载体的构建 | 第44页 |
| 4.2.2 GhCHI重组蛋白的纯化 | 第44-46页 |
| 4.2.3 GhCHI重组蛋白的酶活特性 | 第46-50页 |
| 4.3 GhCHI-A转基因棉花的检测分析 | 第50-57页 |
| 4.3.1 GhCHI-A转基因材料的获得 | 第50页 |
| 4.3.2 棉花GhCHI蛋白的催化酶活测定 | 第50-51页 |
| 4.3.3 GhCHI-A转基因棉花的类黄酮含量检测 | 第51-54页 |
| 4.3.4 GhCHI-A转基因棉花表型分析 | 第54-57页 |
| 第五章 讨论 | 第57-61页 |
| 5.1 GhCHI蛋白的反向酶活 | 第57-58页 |
| 5.2 类黄酮可能参与调控棉花植株的高度 | 第58-59页 |
| 5.3 类黄酮化合物参与植株抵抗低温 | 第59-61页 |
| 第六章 结论 | 第61-63页 |
| 6.1 主要结论 | 第61页 |
| 6.2 论文创新点 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 附录 | 第67-71页 |
| 附录1 缩略词英汉对照表 | 第67-68页 |
| 附录2 表达谱所涉及的类黄酮结构基因序列 | 第68-69页 |
| 附录3 攻读硕士学位期间发表论文及摘要的情况 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |