摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第15-24页 |
1.1 犬瘟热病毒 | 第15-19页 |
1.1.1 犬瘟热病毒病原学 | 第15-16页 |
1.1.2 流行病学 | 第16-17页 |
1.1.3 临诊症状及病理变化 | 第17-18页 |
1.1.4 犬瘟热的防制 | 第18-19页 |
1.2 犬瘟热病毒分子生物学研究进展 | 第19-22页 |
1.2.1 犬瘟热病毒基因组及结构蛋白 | 第19-21页 |
1.2.2 犬瘟热细胞受体的研究进展 | 第21-22页 |
1.3 犬瘟热病毒诊断技术 | 第22-24页 |
1.3.1 病原学诊断方法 | 第22页 |
1.3.2 血清学诊断方法 | 第22-23页 |
1.3.3 分子生物学诊断方法 | 第23-24页 |
第二章 犬瘟热病毒N蛋白C端高变区变异分析 | 第24-37页 |
2.1 材料与方法 | 第24-26页 |
2.1.1 主要试剂 | 第24页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.3 样品采集 | 第25页 |
2.1.4 实验方法 | 第25-26页 |
2.2 实验结果 | 第26-35页 |
2.2.1 样品采集结果 | 第26-27页 |
2.2.2 临床观察结果 | 第27页 |
2.2.3 RT-PCR结果 | 第27-28页 |
2.2.4 基因序列相似度分析 | 第28-30页 |
2.2.5 系统发育树构建 | 第30-32页 |
2.2.6 N基因C端变异结果 | 第32-35页 |
2.3 讨论 | 第35-36页 |
2.4 小结 | 第36-37页 |
第三章 犬瘟热病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其线性抗原表位鉴定 | 第37-45页 |
3.1 材料与方法 | 第37-40页 |
3.1.1 主要实验材料及实验动物 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
3.1.4 动物免疫程序 | 第38页 |
3.1.5 N蛋白间接ELISA检测方法的建立 | 第38页 |
3.1.6 细胞融合试验 | 第38页 |
3.1.7 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第38-39页 |
3.1.8 MAb腹水的制备 | 第39页 |
3.1.9 间接免疫荧光试验(IFA) | 第39页 |
3.1.10 MAb的效价测定 | 第39页 |
3.1.11 MAb稳定性的测定及亚类鉴定 | 第39页 |
3.1.12 MAb与CDV PS株和CDV3株的Western blot分析 | 第39页 |
3.1.13 MAb抗原表位筛选 | 第39-40页 |
3.2 结果 | 第40-43页 |
3.2.1 CDV重组N蛋白鉴定 | 第40页 |
3.2.2 间接ELISA检测法的建立 | 第40页 |
3.2.3 杂交瘤细胞株的建立 | 第40页 |
3.2.4 间接免疫荧光试验 | 第40-41页 |
3.2.5 MAb效价测定 | 第41页 |
3.2.6 MAb稳定性的测定及亚类鉴定 | 第41-42页 |
3.2.7 MAb与CDV疫苗株和强毒株Western blot分析 | 第42页 |
3.2.8 MAb抗原表位筛选 | 第42-43页 |
3.3 讨论 | 第43-44页 |
3.4 小结 | 第44-45页 |
第四章 犬瘟热病毒N蛋白 440aa-454aa表位ELISA检测方法的建立 | 第45-54页 |
4.1 材料与方法 | 第45-47页 |
4.1.1 主要试剂 | 第45页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第45页 |
4.1.3 动物血清 | 第45页 |
4.1.4 多肽的制备与保存 | 第45-46页 |
4.1.5 ELISA试验操作步骤 | 第46页 |
4.1.6 ELISA反应条件的优化 | 第46-47页 |
4.1.7 阴阳性血清临界值的确定 | 第47页 |
4.1.8 重复性试验 | 第47页 |
4.1.9 敏感性试验 | 第47页 |
4.1.10 特异性试验 | 第47页 |
4.1.11 与江苏宝莱生物CDV ELISA试剂盒对比分析 | 第47页 |
4.2 结果 | 第47-52页 |
4.2.1 多肽ELISA条件的优化 | 第47-50页 |
4.2.2 阴阳性血清临界值的确定 | 第50页 |
4.2.3 重复性试验 | 第50-51页 |
4.2.4 敏感性试验 | 第51页 |
4.2.5 特异性试验 | 第51页 |
4.2.6 与商品化CDV ELISA试剂盒对比分析 | 第51-52页 |
4.3 讨论 | 第52-53页 |
4.4 小结 | 第53-54页 |
第五章 全文结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
附录 | 第60-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |