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犬瘟热病毒N蛋白C端变异分析及表位ELISA检测方法的建立

摘要第6-7页
abstract第7-8页
第一章 引言第15-24页
    1.1 犬瘟热病毒第15-19页
        1.1.1 犬瘟热病毒病原学第15-16页
        1.1.2 流行病学第16-17页
        1.1.3 临诊症状及病理变化第17-18页
        1.1.4 犬瘟热的防制第18-19页
    1.2 犬瘟热病毒分子生物学研究进展第19-22页
        1.2.1 犬瘟热病毒基因组及结构蛋白第19-21页
        1.2.2 犬瘟热细胞受体的研究进展第21-22页
    1.3 犬瘟热病毒诊断技术第22-24页
        1.3.1 病原学诊断方法第22页
        1.3.2 血清学诊断方法第22-23页
        1.3.3 分子生物学诊断方法第23-24页
第二章 犬瘟热病毒N蛋白C端高变区变异分析第24-37页
    2.1 材料与方法第24-26页
        2.1.1 主要试剂第24页
        2.1.2 主要仪器设备第24-25页
        2.1.3 样品采集第25页
        2.1.4 实验方法第25-26页
    2.2 实验结果第26-35页
        2.2.1 样品采集结果第26-27页
        2.2.2 临床观察结果第27页
        2.2.3 RT-PCR结果第27-28页
        2.2.4 基因序列相似度分析第28-30页
        2.2.5 系统发育树构建第30-32页
        2.2.6 N基因C端变异结果第32-35页
    2.3 讨论第35-36页
    2.4 小结第36-37页
第三章 犬瘟热病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其线性抗原表位鉴定第37-45页
    3.1 材料与方法第37-40页
        3.1.1 主要实验材料及实验动物第37页
        3.1.2 主要试剂第37-38页
        3.1.3 主要仪器设备第38页
        3.1.4 动物免疫程序第38页
        3.1.5 N蛋白间接ELISA检测方法的建立第38页
        3.1.6 细胞融合试验第38页
        3.1.7 阳性杂交瘤细胞的筛选第38-39页
        3.1.8 MAb腹水的制备第39页
        3.1.9 间接免疫荧光试验(IFA)第39页
        3.1.10 MAb的效价测定第39页
        3.1.11 MAb稳定性的测定及亚类鉴定第39页
        3.1.12 MAb与CDV PS株和CDV3株的Western blot分析第39页
        3.1.13 MAb抗原表位筛选第39-40页
    3.2 结果第40-43页
        3.2.1 CDV重组N蛋白鉴定第40页
        3.2.2 间接ELISA检测法的建立第40页
        3.2.3 杂交瘤细胞株的建立第40页
        3.2.4 间接免疫荧光试验第40-41页
        3.2.5 MAb效价测定第41页
        3.2.6 MAb稳定性的测定及亚类鉴定第41-42页
        3.2.7 MAb与CDV疫苗株和强毒株Western blot分析第42页
        3.2.8 MAb抗原表位筛选第42-43页
    3.3 讨论第43-44页
    3.4 小结第44-45页
第四章 犬瘟热病毒N蛋白 440aa-454aa表位ELISA检测方法的建立第45-54页
    4.1 材料与方法第45-47页
        4.1.1 主要试剂第45页
        4.1.2 主要仪器设备第45页
        4.1.3 动物血清第45页
        4.1.4 多肽的制备与保存第45-46页
        4.1.5 ELISA试验操作步骤第46页
        4.1.6 ELISA反应条件的优化第46-47页
        4.1.7 阴阳性血清临界值的确定第47页
        4.1.8 重复性试验第47页
        4.1.9 敏感性试验第47页
        4.1.10 特异性试验第47页
        4.1.11 与江苏宝莱生物CDV ELISA试剂盒对比分析第47页
    4.2 结果第47-52页
        4.2.1 多肽ELISA条件的优化第47-50页
        4.2.2 阴阳性血清临界值的确定第50页
        4.2.3 重复性试验第50-51页
        4.2.4 敏感性试验第51页
        4.2.5 特异性试验第51页
        4.2.6 与商品化CDV ELISA试剂盒对比分析第51-52页
    4.3 讨论第52-53页
    4.4 小结第53-54页
第五章 全文结论第54-55页
参考文献第55-60页
附录第60-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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