摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-22页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) | 第12-16页 |
1.1.1 PRRS病原学特征 | 第12-13页 |
1.1.2 PRRSV分子生物学特征 | 第13-16页 |
1.2 TRIM5综述 | 第16-21页 |
1.2.1 TRIM5限制作用的发现 | 第16-17页 |
1.2.2 TRIM5的结构及功能 | 第17-18页 |
1.2.3 TRIM蛋白家族 | 第18-19页 |
1.2.4 几种TRIM5限制模型 | 第19-20页 |
1.2.5 TRIM5α 的抗病毒机制 | 第20-21页 |
1.3 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 TRIM5α抑制PRRSV复制的研究 | 第22-40页 |
2.1 材料和方法 | 第22-28页 |
2.1.1 菌株、毒株、载体和细胞株 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂、仪器和耗材 | 第22页 |
2.1.3 PRRSV-EGFP HuN4全长cDNA克隆的大量提取 | 第22-23页 |
2.1.4 PRRSV-EGFP HuN4全长cDNA克隆的定量 | 第23页 |
2.1.5 PRRSV-EGFP病毒的拯救 | 第23页 |
2.1.6 用TCID50法定量病毒 | 第23-24页 |
2.1.7 细胞培养 | 第24页 |
2.1.8 传代细胞的复苏和冻存 | 第24页 |
2.1.9 磷酸钙转染法 | 第24-25页 |
2.1.10 双荧光素酶活性检测 | 第25页 |
2.1.11 二辛可宁酸(BCA)法测蛋白浓度 | 第25-26页 |
2.1.12 Western blot检测蛋白表达 | 第26页 |
2.1.13 点突变 | 第26-28页 |
2.1.14 免疫共沉淀分析(co-IP) | 第28页 |
2.1.15 脂质体法(Lipofectin-2000)转染 | 第28页 |
2.2 结果 | 第28-38页 |
2.2.1 筛选抑制PRRSV复制的天然免疫分子 | 第28-29页 |
2.2.2 sTRIM5α 抑制PRRSV的复制 | 第29页 |
2.2.3 不同种属TRIM5α 的序列分析 | 第29-30页 |
2.2.4 sTRIM5α 激活AP-1 天然免疫信号通路 | 第30-31页 |
2.2.5 sTRIM5α 激活AP-1 信号通路的关键位点 | 第31页 |
2.2.6 sTRIM5α 和TAK1相互作用 | 第31-32页 |
2.2.7 sTRIM5α 泛素化TAK1 | 第32-33页 |
2.2.8 拮抗sTRIM5α 激活AP-1 信号通路的PRRSV编码分子的筛选 | 第33页 |
2.2.9 Nsp1α 抑制sTRIM5α 与TRAF6表达 | 第33-34页 |
2.2.10 Nsp1α 抑制TAK1与TAB2表达 | 第34-35页 |
2.2.11 Nsp1β 抑制sTRIM5α 与TRAF6表达 | 第35页 |
2.2.12 Nsp1β 抑制TAK1与TAB2表达 | 第35-36页 |
2.2.13 Nsp1α 抑制TAK1的关键位点在ZF1区 | 第36页 |
2.2.14 Nsp1α 的ZF2区不参与对TAK1的抑制 | 第36-37页 |
2.2.15 机制模式图 | 第37-38页 |
2.3 讨论 | 第38-40页 |
第三章 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
附录 | 第49-52页 |
致谢 | 第52-54页 |
作者简介 | 第54页 |