| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 引言 | 第9-15页 |
| 1.1 榆紫叶甲研究概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 榆紫叶甲生活史 | 第9页 |
| 1.1.2 紫叶甲的危害 | 第9页 |
| 1.1.3 榆紫叶甲的防治 | 第9-10页 |
| 1.2 昆虫的嗅觉感受系统 | 第10-13页 |
| 1.2.1 昆虫嗅觉感受的一般过程 | 第10-11页 |
| 1.2.2 气味结合蛋白 | 第11-12页 |
| 1.2.3 气味结合蛋白空间构象结构 | 第12-13页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第13-15页 |
| 第二章 榆紫叶甲气味结合蛋白AquaOBP4基因克隆及蛋白表达与纯化 | 第15-28页 |
| 2.1 材料与方法 | 第15-22页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 2.1.4 榆紫叶甲触角总RNA的提取 | 第16页 |
| 2.1.5 合成cDNA第一链 | 第16-17页 |
| 2.1.6 引物设计 | 第17页 |
| 2.1.7 PCR扩增 | 第17-18页 |
| 2.1.8 胶回收OBP4的PCR扩增产物 | 第18页 |
| 2.1.9 连接与转化 | 第18-19页 |
| 2.1.10 PCR菌检及质粒提取 | 第19-20页 |
| 2.1.11 pET28a-OBP4表达载体构建 | 第20-21页 |
| 2.1.12 pET28a-OBP4的诱导表达 | 第21页 |
| 2.1.13 pET28a-OBP4蛋白的纯化与定量分析 | 第21-22页 |
| 2.1.14 pET28a-OBP4变复性及定量分析 | 第22页 |
| 2.2 结果与分析 | 第22-27页 |
| 2.2.1 榆紫叶甲触角总RNA的检测 | 第22-23页 |
| 2.2.2 榆紫叶甲AquaOBP4基因PCR扩增 | 第23页 |
| 2.2.3 连入目的片段的pUCm-T载体菌检 | 第23-24页 |
| 2.2.4 AquaOBP4全长测序 | 第24页 |
| 2.2.5 pET28a-OBP4载体PCR菌检 | 第24页 |
| 2.2.6 pET28a-OBP4的诱导表达 | 第24-25页 |
| 2.2.7 pET28a-OBP4蛋白的纯化与定量分析 | 第25-27页 |
| 2.3 讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 榆紫叶甲气味结合蛋白AquaOBP4结合特性研究 | 第28-37页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第28页 |
| 3.1.2 主要设备 | 第28页 |
| 3.1.3 气味标样 | 第28-32页 |
| 3.2 结果与分析 | 第32-35页 |
| 3.2.1 荧光竞争结合 | 第32-35页 |
| 3.3 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 榆紫叶甲气味结合蛋白AquaOBP4空间构象建模及实验验证 | 第37-47页 |
| 4.1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 4.1.1 主要试剂和仪器 | 第37页 |
| 4.1.2 AquaOBP4同源模板筛选 | 第37页 |
| 4.1.3 AquaOBP4建模及分子对接 | 第37页 |
| 4.1.4 AquaOBP4模型实验验证 | 第37页 |
| 4.1.5 PH=5 条件下AquaOBP4荧光竞争结合 | 第37-38页 |
| 4.2 结果与分析 | 第38-46页 |
| 4.2.1 AquaOBP4同源模板筛选 | 第38-40页 |
| 4.2.2 AquaOBP4空间构象模型构建 | 第40页 |
| 4.2.3 分子对接 | 第40-42页 |
| 4.2.4 AquaOBP4模型实验验证 | 第42-44页 |
| 4.2.5 PH=5 条件下荧光竞争结合 | 第44-46页 |
| 4.3 讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
