摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
引言 | 第16-21页 |
1.1 八聚体结合转录因子 4(octamer binding factor 4,OCT4) | 第16-17页 |
1.2 DDX43(DEAD box polypeptide 43) | 第17-19页 |
1.3 急性髓系白血病(Acute myeloid leukaemia,AML) | 第19-21页 |
第一部分 OCT4在急性髓系白血病中表达的临床研究 | 第21-33页 |
第一章 研究的目的、方法及实验方案的设计、意义 | 第21-23页 |
1.1 研究背景及目的 | 第21-22页 |
1.2 研究方法及技术 | 第22页 |
1.2.1 实时定量PCR(RQ-PCR) | 第22页 |
1.3 实验方案 | 第22页 |
1.4 研究的意义 | 第22-23页 |
第二章 AML患者中OCT4表达的临床研究 | 第23-33页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 研究对象 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
2.1.4 引物 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-28页 |
2.2.1 单个核细胞提取和总RNA制备 | 第24-25页 |
2.2.2 逆转录 | 第25页 |
2.2.3 OCT4表达的RQ-PCR检测 | 第25页 |
2.2.4 PCR产物纯化与回收 | 第25-26页 |
2.2.5 重组载体构建 | 第26页 |
2.2.6 重组质粒转化 | 第26页 |
2.2.7 重组质粒提取及鉴定、测序 | 第26-27页 |
2.2.8 阳性模板建立 | 第27页 |
2.2.9 细胞遗传学检查 | 第27页 |
2.2.10 统计学处理 | 第27-28页 |
2.3 实验结果 | 第28-31页 |
2.3.1 对照组中OCT4转录本水平 | 第28页 |
2.3.2 AML患者中OCT4基因转录本水平 | 第28-30页 |
2.3.3 OCT4基因表达具有辅助诊断标记意义 | 第30页 |
2.3.4 OCT4表达与AML预后的关系 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
第二部分 DDX43在AML中的机制研究 | 第33-55页 |
第一章 研究目的、方法及实验方案的设计、意义 | 第33-36页 |
1.1 研究目的及背景 | 第33-34页 |
1.2 实验方法与技术 | 第34页 |
1.2.1 细胞培养技术 | 第34页 |
1.2.2 蛋白印迹法(Western Blot) | 第34页 |
1.3 实验方案 | 第34-36页 |
1.3.1 DDX43慢病毒载体构建及细胞转染 | 第35页 |
1.3.2 体外实验 | 第35-36页 |
1.3.3 体内动物实验 | 第36页 |
1.3.4 机制研究 | 第36页 |
1.4 研究的意义 | 第36页 |
第二章 DDX43促进AML形成的机制研究 | 第36-55页 |
2.1 实验材料 | 第36-39页 |
2.1.1 细胞株 | 第36-37页 |
2.1.2 实验动物 | 第37页 |
2.1.3 引物 | 第37页 |
2.1.4 主要试剂 | 第37-38页 |
2.1.5 主要仪器 | 第38-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-46页 |
2.2.1 细胞培养 | 第39页 |
2.2.2 细胞的换液与传代 | 第39页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第39-40页 |
2.2.4 RQ-PCR测定细胞株中DDX43的表达 | 第40页 |
2.2.5 蛋白提取 | 第40-41页 |
2.2.6 Western Blot测定细胞株中DDX43的表达 | 第41-43页 |
2.2.7 生长实验 | 第43-44页 |
2.2.8 生存实验 | 第44页 |
2.2.9 周期实验 | 第44-45页 |
2.2.10 分化实验 | 第45页 |
2.2.11 肿瘤球形成实验 | 第45-46页 |
2.2.12 裸鼠致瘤实验 | 第46页 |
2.3 实验结果 | 第46-52页 |
2.3.1 荧光下的DDX43细胞 | 第46页 |
2.3.2 RQ-PCR检测DDX43在细胞株中的表达状况 | 第46-47页 |
2.3.3 Western Blot检测DDX43在细胞株中的表达状况 | 第47页 |
2.3.4 生长实验 | 第47-48页 |
2.3.5 生存实验 | 第48页 |
2.3.6 周期实验 | 第48-49页 |
2.3.7 分化实验 | 第49-50页 |
2.3.8 肿瘤球形成实验 | 第50页 |
2.3.9 裸鼠致瘤实验 | 第50-51页 |
2.3.10 裸鼠肿瘤中DDX43的表达状况 | 第51页 |
2.3.11 机制研究 | 第51-52页 |
2.4 讨论 | 第52-55页 |
结论和展望 | 第55-56页 |
1.1 主要结论 | 第55页 |
1.2 展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第67页 |