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DDX43促进AML形成作用及相关基因OCT4在AML中表达研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
引言第16-21页
    1.1 八聚体结合转录因子 4(octamer binding factor 4,OCT4)第16-17页
    1.2 DDX43(DEAD box polypeptide 43)第17-19页
    1.3 急性髓系白血病(Acute myeloid leukaemia,AML)第19-21页
第一部分 OCT4在急性髓系白血病中表达的临床研究第21-33页
    第一章 研究的目的、方法及实验方案的设计、意义第21-23页
        1.1 研究背景及目的第21-22页
        1.2 研究方法及技术第22页
            1.2.1 实时定量PCR(RQ-PCR)第22页
        1.3 实验方案第22页
        1.4 研究的意义第22-23页
    第二章 AML患者中OCT4表达的临床研究第23-33页
        2.1 实验材料第23-24页
            2.1.1 研究对象第23页
            2.1.2 主要试剂第23页
            2.1.3 主要仪器第23-24页
            2.1.4 引物第24页
        2.2 实验方法第24-28页
            2.2.1 单个核细胞提取和总RNA制备第24-25页
            2.2.2 逆转录第25页
            2.2.3 OCT4表达的RQ-PCR检测第25页
            2.2.4 PCR产物纯化与回收第25-26页
            2.2.5 重组载体构建第26页
            2.2.6 重组质粒转化第26页
            2.2.7 重组质粒提取及鉴定、测序第26-27页
            2.2.8 阳性模板建立第27页
            2.2.9 细胞遗传学检查第27页
            2.2.10 统计学处理第27-28页
        2.3 实验结果第28-31页
            2.3.1 对照组中OCT4转录本水平第28页
            2.3.2 AML患者中OCT4基因转录本水平第28-30页
            2.3.3 OCT4基因表达具有辅助诊断标记意义第30页
            2.3.4 OCT4表达与AML预后的关系第30-31页
        2.4 讨论第31-33页
第二部分 DDX43在AML中的机制研究第33-55页
    第一章 研究目的、方法及实验方案的设计、意义第33-36页
        1.1 研究目的及背景第33-34页
        1.2 实验方法与技术第34页
            1.2.1 细胞培养技术第34页
            1.2.2 蛋白印迹法(Western Blot)第34页
        1.3 实验方案第34-36页
            1.3.1 DDX43慢病毒载体构建及细胞转染第35页
            1.3.2 体外实验第35-36页
            1.3.3 体内动物实验第36页
            1.3.4 机制研究第36页
        1.4 研究的意义第36页
    第二章 DDX43促进AML形成的机制研究第36-55页
        2.1 实验材料第36-39页
            2.1.1 细胞株第36-37页
            2.1.2 实验动物第37页
            2.1.3 引物第37页
            2.1.4 主要试剂第37-38页
            2.1.5 主要仪器第38-39页
        2.2 实验方法第39-46页
            2.2.1 细胞培养第39页
            2.2.2 细胞的换液与传代第39页
            2.2.3 细胞冻存第39-40页
            2.2.4 RQ-PCR测定细胞株中DDX43的表达第40页
            2.2.5 蛋白提取第40-41页
            2.2.6 Western Blot测定细胞株中DDX43的表达第41-43页
            2.2.7 生长实验第43-44页
            2.2.8 生存实验第44页
            2.2.9 周期实验第44-45页
            2.2.10 分化实验第45页
            2.2.11 肿瘤球形成实验第45-46页
            2.2.12 裸鼠致瘤实验第46页
        2.3 实验结果第46-52页
            2.3.1 荧光下的DDX43细胞第46页
            2.3.2 RQ-PCR检测DDX43在细胞株中的表达状况第46-47页
            2.3.3 Western Blot检测DDX43在细胞株中的表达状况第47页
            2.3.4 生长实验第47-48页
            2.3.5 生存实验第48页
            2.3.6 周期实验第48-49页
            2.3.7 分化实验第49-50页
            2.3.8 肿瘤球形成实验第50页
            2.3.9 裸鼠致瘤实验第50-51页
            2.3.10 裸鼠肿瘤中DDX43的表达状况第51页
            2.3.11 机制研究第51-52页
        2.4 讨论第52-55页
结论和展望第55-56页
    1.1 主要结论第55页
    1.2 展望第55-56页
参考文献第56-66页
致谢第66-67页
攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他科研成果第67页

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