| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 第1章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 微孢子虫的研究进展 | 第14-20页 |
| 1.1.1 微孢子虫概述 | 第14-17页 |
| 1.1.2 微孢子虫的基因组学研究 | 第17页 |
| 1.1.3 微孢子虫蛋白质的研究 | 第17-18页 |
| 1.1.4 微孢子虫代谢的研究 | 第18-20页 |
| 1.2 烯醇化酶的研究进展 | 第20页 |
| 1.3 研究意义及内容 | 第20-21页 |
| 1.4 研究路线 | 第21-22页 |
| 第2章 家蚕微孢子虫烯醇化酶基因NbENO的克隆与序列分析 | 第22-34页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第22页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.2.3 主要试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.3.1 家蚕微孢子虫基因组ＤＮＡ的提取 | 第24页 |
| 2.3.2 家蚕微孢子虫烯醇化酶基因NbENO的克隆 | 第24-27页 |
| 2.3.3 制备大肠埃希氏菌Top 10 感受态细胞 | 第27页 |
| 2.3.4 重组质粒pMD-19T-NbENO的构建及序列测序 | 第27-28页 |
| 2.3.5 烯醇化酶基因NbENO及编码蛋白的生物信息学分析 | 第28页 |
| 2.4 结果与分析 | 第28-31页 |
| 2.4.1 家蚕微孢子虫烯醇化酶基因NbENO的克隆 | 第28-29页 |
| 2.4.2 NbENO基因及蛋白序列分析 | 第29-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-34页 |
| 第3章 家蚕微孢子虫烯醇化酶NbENO的原核表达以及抗体制备 | 第34-48页 |
| 3.1 前言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料 | 第34-37页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第34页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.2.3 主要试剂配制 | 第35-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.3.1 NbENO基因的扩增 | 第37页 |
| 3.3.2 原核表达载体pET-28a-NbENO的构建及鉴定 | 第37-39页 |
| 3.3.3 NbENO重组蛋白的表达与鉴定 | 第39-41页 |
| 3.3.4 重组蛋白NbENO的表达纯化 | 第41-42页 |
| 3.3.5 NbENO多克隆抗体的制备 | 第42页 |
| 3.4 结果与分析 | 第42-46页 |
| 3.4.1 原核表达载体pET-28a-NbENO的构建及鉴定 | 第42-44页 |
| 3.4.2 NbENO重组蛋白的表达与鉴定及纯化 | 第44-45页 |
| 3.4.3 重组蛋白NbENO多克隆抗体的制备 | 第45-46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-48页 |
| 第4章 家蚕微孢子虫NbENO在侵染家蚕过程中的表达特征分析 | 第48-58页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第48页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第48-49页 |
| 4.2.3 主要试剂配制 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-53页 |
| 4.3.1 家蚕微孢子虫感染家蚕后不同时间点的中场组织取样 | 第49页 |
| 4.3.2 家蚕微孢子虫感染家蚕BmN细胞不同时间点取样 | 第49-50页 |
| 4.3.3 家蚕微孢子虫感染样品的总RNA提取 | 第50-51页 |
| 4.3.4 反转录反应 | 第51页 |
| 4.3.5 NbENO不同时间点的表达情况检测 | 第51-53页 |
| 4.4 结果与分析 | 第53-55页 |
| 4.4.1 NbENO表达的半定量检测 | 第53-54页 |
| 4.4.2 NbENO在家蚕微孢子虫侵染家蚕的不同时期的表达情况分析 | 第54-55页 |
| 4.5 讨论 | 第55-58页 |
| 第5章 家蚕微孢子虫烯醇化酶NbENO的亚细胞定位 | 第58-64页 |
| 5.1 前言 | 第58页 |
| 5.2 实验材料 | 第58-59页 |
| 5.2.1 材料与试剂 | 第58页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第58页 |
| 5.2.3 主要试剂配制 | 第58-59页 |
| 5.3 实验方法 | 第59-60页 |
| 5.3.1 家蚕微孢子虫的Percoll纯化 | 第59页 |
| 5.3.2 家蚕微孢子虫发芽处理 | 第59页 |
| 5.3.3 间接免疫荧光实验 | 第59-60页 |
| 5.4 结果与分析 | 第60-63页 |
| 5.4.1 家蚕微孢子虫的Percoll纯化与发芽处理 | 第60-61页 |
| 5.4.2 NbENO在家蚕微孢子虫孢子中的间接免疫荧光定位 | 第61-63页 |
| 5.5 讨论 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
