中文摘要 | 第4-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
缩略语/符号说明 | 第17-18页 |
前言 | 第18-21页 |
研究现状、成果 | 第18-20页 |
研究目的、方法 | 第20-21页 |
一、乳腺癌中DNA甲基化抑制FOXF2的表达 | 第21-42页 |
1.1 对象和方法 | 第21-31页 |
1.1.1 标本采集 | 第21页 |
1.1.2 细胞系来源及培养 | 第21-22页 |
1.1.3 总RNA的提取 | 第22页 |
1.1.4 cDNA的合成 | 第22-23页 |
1.1.5 实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
1.1.6 Western blot | 第24-26页 |
1.1.7 染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecitation,Ch IP) | 第26-27页 |
1.1.8 组织和细胞基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
1.1.9 亚硫酸氢盐测序PCRPCR(bisulfite sequencing PCR,BSP) | 第28-30页 |
1.1.10 5-aza-dC诱导乳腺癌细胞去甲基化 | 第30页 |
1.1.11 DNA甲基化对FOXF2启动子的影响 | 第30-31页 |
1.1.12 siRNA和细胞转染 | 第31页 |
1.1.13 统计学分析 | 第31页 |
1.2 结果 | 第31-39页 |
1.2.1 乳腺癌中FOXF2启动子的甲基化程度与其表达水平呈负相关 | 第31-33页 |
1.2.2 5-aza-d C 诱导 MCF-7 和 MDA-MB-453 细胞中 FOXF2 的表达 | 第33-35页 |
1.2.3 DNMTs抑制MCF-7 和MDA-MB-453细胞中FOXF2的表达 | 第35-38页 |
1.2.4 DNA甲基化抑制FOXF2启动子的转录活性 | 第38-39页 |
1.3 讨论 | 第39-41页 |
1.4 小结 | 第41-42页 |
二、DNA甲基化在FOXF2介导SP1调控乳腺癌细胞的转移和增殖中的作用 | 第42-57页 |
2.1 对象和方法 | 第42-46页 |
2.1.1 细胞系来源及培养 | 第42页 |
2.1.2 MTM处理乳腺癌细胞 | 第42页 |
2.1.3 总RNA提取、cDNA合成、RT-QPCR和ChIP | 第42页 |
2.1.4 Western blot | 第42页 |
2.1.5 质粒、siRNA和细胞转染 | 第42-44页 |
2.1.6 双荧光素酶报告系统检测启动子活性 | 第44页 |
2.1.7 MTT检测细胞增殖能力 | 第44页 |
2.1.8 Transwell检测细胞体外迁移和侵袭能力 | 第44-45页 |
2.1.9 基因表达谱数据库及分析 | 第45-46页 |
2.1.10 统计学分析 | 第46页 |
2.2 结果 | 第46-53页 |
2.2.1 DNA甲基化抑制SP1对FOXF2启动子的转录激活 | 第46-49页 |
2.2.2 SP1转录促进FOXF2启动子低甲基化的乳腺癌细胞中FOXF2的表达 | 第49-50页 |
2.2.3 FOXF2介导SP1在乳腺癌中增殖和转移的作用 | 第50-53页 |
2.3 讨论 | 第53-55页 |
2.4 小结 | 第55-57页 |
全文结论 | 第57-59页 |
论文创新点 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第69-70页 |
附录 | 第70-73页 |
综述 肿瘤的表观遗传学研究 | 第73-103页 |
综述参考文献 | 第86-103页 |
致谢 | 第103页 |