| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 马铃薯的研究现状 | 第10-11页 |
| 1.2 通过转基因提高马铃薯抗逆性的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 植物的逆境胁迫 | 第12-15页 |
| 1.3.1 土壤盐渍化对农业生产的影响 | 第12-13页 |
| 1.3.2 盐胁迫对植物的危害 | 第13页 |
| 1.3.3 植物对盐胁迫的应答机制 | 第13-15页 |
| 1.3.4 干旱对农业的影响 | 第15页 |
| 1.3.5 干旱胁迫对植物的危害 | 第15页 |
| 1.3.6 植物对干旱胁迫的应答机制 | 第15页 |
| 1.4 植物Na~+/H~+反向交换体的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.4.1 质膜Na~+/H~+反向交换体 | 第16-17页 |
| 1.4.2 液胞膜Na~+/H~+反向交换体 | 第17页 |
| 1.4.3 内膜体Na~+/H~+反向交换体 | 第17-18页 |
| 1.5 实验意义及目的 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-36页 |
| 2.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.2 质粒与菌株 | 第19-20页 |
| 2.3 试剂 | 第20页 |
| 2.4 仪器与设备 | 第20页 |
| 2.5 耗材 | 第20-21页 |
| 2.6 培养基 | 第21页 |
| 2.7 试剂的配置方法 | 第21-22页 |
| 2.8 目的基因CDS序列的扩增 | 第22-24页 |
| 2.8.1 目的基因的克隆 | 第22-23页 |
| 2.8.2 目的基因凝胶回收 | 第23-24页 |
| 2.9 Gateway反应构建表达载体 | 第24-28页 |
| 2.9.1 入门载体的构建 | 第24页 |
| 2.9.2 大肠杆菌DH5α感受态制备 | 第24页 |
| 2.9.3 BP反应产物转化大肠杆菌 | 第24-25页 |
| 2.9.4 含入门载体的大肠杆菌菌落PCR鉴定 | 第25-26页 |
| 2.9.5 含入门载体大肠杆菌菌种活化及菌种保存 | 第26页 |
| 2.9.6 提取含入门载体大肠杆菌质粒及测序 | 第26-27页 |
| 2.9.7 表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.9.8 含表达载体的大肠杆菌菌落PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 2.9.9 含表达载体大肠杆菌菌种活化及菌种保存 | 第28页 |
| 2.9.10 表达载体的酶切鉴定和测序 | 第28页 |
| 2.10 表达载体转化农杆菌LBA4404 | 第28-30页 |
| 2.10.1 农杆菌LBA4404感受态制备 | 第28-29页 |
| 2.10.2 重组质粒转化农杆菌LBA4404 | 第29页 |
| 2.10.3 含表达载体农杆菌菌落PCR鉴定 | 第29页 |
| 2.10.4 扩大培养含表达载体农杆菌及保存菌种 | 第29-30页 |
| 2.11 农杆菌介导转化马铃薯 | 第30-32页 |
| 2.11.1 野生型马铃薯苗种质的保存(以马铃薯苗作为种质) | 第30页 |
| 2.11.2 诱导获得微型马铃薯 | 第30页 |
| 2.11.3 农杆菌介导转化马铃薯 | 第30-32页 |
| 2.12 马铃薯薯片再生苗的检测 | 第32-33页 |
| 2.12.1 马铃薯薯片再生苗的PCR检测 | 第32页 |
| 2.12.2 文中转基因马铃薯苗的自命名规则 | 第32-33页 |
| 2.12.3 PCR检测为阳性的马铃薯再生苗扩繁 | 第33页 |
| 2.12.4 马铃薯薯片再生苗的荧光检测 | 第33页 |
| 2.12.5 荧光检测为阳性的马铃薯再生苗扩繁 | 第33页 |
| 2.13 转基因马铃薯种质的保存 | 第33-34页 |
| 2.14 转基因马铃薯的表型分析 | 第34-36页 |
| 2.14.1 转基因马铃薯苗茎段盐处理生长实验 | 第34页 |
| 2.14.2 盆栽转基因马铃薯的耐盐和抗旱实验 | 第34-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-57页 |
| 3.1 含重组质粒农杆菌的制备 | 第36-39页 |
| 3.1.1 目的基因的扩增 | 第36页 |
| 3.1.2 入门载体构建 | 第36-37页 |
| 3.1.3 表达载体构建 | 第37-38页 |
| 3.1.4 表达载体的酶切鉴定和测序 | 第38页 |
| 3.1.5 制备含目的基因农杆菌 | 第38-39页 |
| 3.2 农杆菌侵染马铃薯薯片 | 第39-42页 |
| 3.3 转基因马铃薯植株的分析鉴定 | 第42-45页 |
| 3.3.1 马铃薯薯片再生苗的PCR检测 | 第42-43页 |
| 3.3.2 马铃薯薯片再生苗的GFP荧光鉴定 | 第43-45页 |
| 3.4 转基因马铃薯生长表型分析 | 第45-57页 |
| 3.4.1 转基因马铃薯苗茎段盐处理分析 | 第45-50页 |
| 3.4.2 盆栽转基因马铃薯的耐盐性分析 | 第50-53页 |
| 3.4.3 盆栽转基因马铃薯的抗旱性分析 | 第53-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-59页 |
| 4.1 外源基因转化马铃薯存在转化率低的问题 | 第57页 |
| 4.2 利用AtNHX5和AtNHX6基因转化马铃薯提高了马铃薯的耐盐性 | 第57-58页 |
| 4.3 AtNHX5、AtNHX6基因转化马铃薯实验展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
