摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-29页 |
1.1 生物固氮简介,农业应用及生物固氮菌群体组成 | 第13-19页 |
1.1.1 氮素营养与生物固氮 | 第13-14页 |
1.1.2 生物固氮在农业上的应用价值 | 第14-16页 |
1.1.3 根瘤内细菌群体组成及研究 | 第16-19页 |
1.1.3.1 共生根瘤菌 | 第16-18页 |
1.1.3.2 非共生根瘤内细菌 | 第18-19页 |
1.2 生物固氮细菌多样性的研究方法 | 第19-23页 |
1.2.1 基于核酸分子的遗传型分类 | 第19-21页 |
1.2.2 基于细胞化学组成成分的分类 | 第21-22页 |
1.2.3 基于表型的多样性研究方法 | 第22-23页 |
1.2.3.1 生理生化性状测定和数值分类 | 第22-23页 |
1.2.3.2 全细胞可溶性蛋白质电泳分析 | 第23页 |
1.2.3.3 多位点酶电泳 | 第23页 |
1.3 立题依据和目的意义 | 第23-29页 |
1.3.1 立题依据 | 第23-28页 |
1.3.1.1 大豆的起源,栽培历史及现状 | 第23-26页 |
1.3.1.2 我国栽培大豆的分布特点及陕西地理环境特点 | 第26-28页 |
1.3.2 目的意义 | 第28-29页 |
第二章 大豆根瘤内细菌分离及主要非共生类群的遗传多样性与系统发育研究 | 第29-52页 |
2.1 引言 | 第29-30页 |
2.2 根瘤的采集及根瘤细菌的分离 | 第30-36页 |
2.2.1 所需仪器设备,耗材,试剂,培养基 | 第30页 |
2.2.2 根瘤采集 | 第30-34页 |
2.2.3 根瘤细菌的分离 | 第34-35页 |
2.2.4 根瘤细菌分离结果 | 第35-36页 |
2.3 菌株遗传多样性的研究 | 第36-51页 |
2.3.1 菌株总DNA的提取 | 第36-37页 |
2.3.2 基于 16S rRNA基因的遗传多样性分析 | 第37-44页 |
2.3.2.1 16S rRNA基因扩增,RFLP分型,代表菌株测序 | 第37-38页 |
2.3.2.2 16S rRNA RFLP-PCR类型 | 第38-40页 |
2.3.2.3 基于 16S rRNA RFLP-PCR图谱的聚类图 | 第40-42页 |
2.3.2.4 基于 16S rRNA基因序列的遗传多样性研究结果分析 | 第42-44页 |
2.3.3 基于RAPD-PCR的遗传性研究 | 第44-48页 |
2.3.3.1 RAPD-PCR | 第44-45页 |
2.3.3.2 RAPD-PCR结果分析 | 第45页 |
2.3.3.3 CCA分析 | 第45-48页 |
2.3.4 固氮还原酶nifH基因分析 | 第48-51页 |
2.3.4.1 固氮酶nifH基因扩增 | 第49页 |
2.3.4.2 固氮酶nifH基因扩增结果 | 第49页 |
2.3.4.3 固氮酶nifH基因测序及系统发育结果分析 | 第49-51页 |
2.4 本章小结 | 第51-52页 |
第三章 大豆根瘤内主要共生类群及其他非优势内生细菌的遗传多样性与系统发育研究 | 第52-66页 |
3.1 引言 | 第52页 |
3.2 材料与方法 | 第52页 |
3.3 结果分析 | 第52-64页 |
3.3.1 基于 16S rRNA基因的遗传多样性分析 | 第52-60页 |
3.3.1.1 分支I | 第54-56页 |
3.3.1.2 分支II | 第56-58页 |
3.3.1.3 分支III | 第58-60页 |
3.3.2 基于nifH和nodC的共生基因多样性研究 | 第60-64页 |
3.3.2.1 固氮酶nifH基因RFLP分类及结果 | 第61-64页 |
3.3.2.2 结瘤素基因nodC-RFLP分类及结果 | 第64页 |
3.4 本章小结 | 第64-66页 |
第四章 内生细菌的促植物生长因子研究及与菌株与地理环境关系研究 | 第66-80页 |
4.1 内生细菌促植物生长因子测定 | 第66-77页 |
4.1.1 引言 | 第66-67页 |
4.1.2 研究材料及方法 | 第67-77页 |
4.1.2.1 所需试剂,仪器,设备 | 第67-68页 |
4.1.2.2 研究方法 | 第68-70页 |
4.1.2.3 试验结果 | 第70-77页 |
4.2 三个生态区大豆根瘤内生细菌菌株与地理环境关系分析 | 第77-79页 |
4.3 本章小结 | 第79-80页 |
第五章 一株分离自大豆根瘤的内生细菌新种的鉴定 | 第80-96页 |
5.1 引言 | 第80页 |
5.2 材料和方法 | 第80-86页 |
5.2.1 材料 | 第80页 |
5.2.2 所需培养基及制备方法 | 第80-81页 |
5.2.3 主要试剂和仪器 | 第81页 |
5.2.4 实验方法 | 第81-86页 |
5.2.4.1 菌株形态学及显微结构特征观察 | 第81页 |
5.2.4.2 菌株的生理生化性质测定 | 第81-84页 |
5.2.4.3 菌体化学组分分析 | 第84-85页 |
5.2.4.4 供试菌株DNA碱基组成(G+C%)及DNA-DNA杂交 | 第85页 |
5.2.4.5 16S rRNA分析 | 第85-86页 |
5.3 结果与分析 | 第86-94页 |
5.3.1 BN30~T形态学特征 | 第86-87页 |
5.3.2 BN30~T生理生化特征 | 第87-91页 |
5.3.3 BN30~T化学分类学特征 | 第91-93页 |
5.3.4 BN30~T菌株DNA的G+C%含量测定及与模式株的DNA杂交 | 第93页 |
5.3.5 BN30~T的 16S rRNA分析 | 第93-94页 |
5.4 种的描述 | 第94-96页 |
第六章 主要结论和创新点 | 第96-98页 |
6.1 主要结论 | 第96页 |
6.2 创新点 | 第96-97页 |
6.3 展望 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-113页 |
附录 | 第113-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
作者简介 | 第118页 |