| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·氧应力 | 第12页 |
| ·氧应力的作用机制 | 第12-14页 |
| ·脂质过氧化物和细胞膜功能的丧失 | 第12-13页 |
| ·DNA 氧化 | 第13页 |
| ·蛋白氧化 | 第13-14页 |
| ·微生物对氧应力的应对机制 | 第14页 |
| ·谷胱甘肽的理化特性 | 第14-16页 |
| ·未知基因克隆研究 | 第16-17页 |
| ·产朊假丝酵母基因敲除系统的研究 | 第17-20页 |
| ·基因敲除系统的构成 | 第17-18页 |
| ·基因敲除组件的构建方法 | 第18-19页 |
| ·基因敲除的验证方法 | 第19-20页 |
| ·国内外研究进展 | 第20-21页 |
| ·本文研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 第二章 Candida utilis 中gsh1 基因的克隆 | 第22-35页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·材料与方法 | 第22-28页 |
| ·菌种和培养基 | 第22页 |
| ·试剂和重组DNA 技术 | 第22-23页 |
| ·gsh1 部分基因的克隆 | 第23-26页 |
| ·gsh1 全基因序列的克隆 | 第26-28页 |
| ·结果 | 第28-33页 |
| ·gsh1 基因的克隆 | 第28-30页 |
| ·gsh1 基因序列 | 第30-33页 |
| ·讨论 | 第33页 |
| ·小结 | 第33-35页 |
| 第三章 Candida utilis 基因敲除系统的建立及其在gsh1 和gsh2 基因敲除中的应用 | 第35-51页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·材料和方法 | 第35-44页 |
| ·菌种和培养基 | 第35页 |
| ·试剂和重组DNA 技术 | 第35-37页 |
| ·酵母GAP 启动子的克隆 | 第37页 |
| ·kan 和Amp 基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·CYH 基因和HPH 基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·gsh1 基因敲除组件的构建 | 第39-40页 |
| ·质粒pPICZalphaA-zeocin，pPICZ-gsh2-kan 和pPICZ-gsh2-zeocin 的构建 | 第40-42页 |
| ·电转化C. utilis | 第42-43页 |
| ·GSH 测定和γ-GCS 酶活检测 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·C. utilis 中gsh1 基因敲除 | 第44-45页 |
| ·gsh1 基因敲除对GSH 生物合成的影响 | 第45-46页 |
| ·gsh1 基因第二拷贝和第三拷贝的敲除 | 第46-47页 |
| ·gsh2 基因敲除 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第四章 gsh1 和gsh2 敲除突变株抗氧胁迫的作用机制 | 第51-58页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料和方法 | 第51-52页 |
| ·菌种和培养基 | 第51-52页 |
| ·摇瓶培养 | 第52页 |
| ·H_2O_2 诱导的氧胁迫 | 第52页 |
| ·GSH 的检测 | 第52页 |
| ·CAT 酶活的检测 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-55页 |
| ·菌株SZU07-01，GSH-3 和GSH-2 摇瓶分批发酵 | 第52-53页 |
| ·H_2O_2 胁迫对细胞增长和 GSH 合成的影响 | 第53-54页 |
| ·H_2O_2 胁迫对菌株GSH-3 和GSH2(2) 细胞增长和GSH 合成的影响 | 第54页 |
| ·CAT 酶活检测 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-58页 |
| 总结和展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第67-68页 |
| 英文缩写与中文名称对照 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
