| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 旱稻 | 第10-11页 |
| 1.1.1 旱稻的生理特性 | 第10-11页 |
| 1.1.2 旱稻对水稻的优势 | 第11页 |
| 1.1.3 发展旱稻生产的意义 | 第11页 |
| 1.2 抗除草剂基因和lea基因的作用机制及应用 | 第11-12页 |
| 1.2.1 bar基因作用机制及应用 | 第11-12页 |
| 1.2.2 lea基因作用机制及应用 | 第12页 |
| 1.3 常用转化方法 | 第12-14页 |
| 1.3.1 基因枪法 | 第12-13页 |
| 1.3.2 农杆菌转化法 | 第13页 |
| 1.3.3 PEG法 | 第13-14页 |
| 1.3.4 花粉管通道转化法 | 第14页 |
| 1.4 转基因植株抗逆性鉴定方法 | 第14-15页 |
| 1.4.1 转基因植株抗旱鉴定方法研究 | 第14-15页 |
| 1.4.2 转基因植株抗盐鉴定方法研究 | 第15页 |
| 1.5 研究课题的来源 | 第15页 |
| 1.6 课题的研究目的和内容 | 第15-17页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第15-16页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 第2章 转化受体的获得 | 第17-24页 |
| 2.1 概述 | 第17页 |
| 2.2 实验材料、试剂及设备 | 第17-19页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.3 实验设备及仪器 | 第18-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.3.1 母液的配制 | 第19-21页 |
| 2.3.2 旱稻愈伤组织的诱导及培养基配制 | 第21页 |
| 2.3.3 愈伤组织继代 | 第21页 |
| 2.3.4 数据统计 | 第21页 |
| 2.4 结果与分析 | 第21-22页 |
| 2.4.1 胚性愈伤组织的诱导结果 | 第21-22页 |
| 2.4.2 愈伤组织诱导率 | 第22页 |
| 2.5 讨论 | 第22页 |
| 2.6 本章小结 | 第22-24页 |
| 第3章 基因枪法转化旱稻 | 第24-31页 |
| 3.1 概述 | 第24页 |
| 3.2 实验材料、试剂及设备 | 第24页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第24页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第24页 |
| 3.2.3 实验设备及仪器 | 第24页 |
| 3.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 3.3.1 培养基配制 | 第24-26页 |
| 3.3.2 含目的基因质粒的提取 | 第26-27页 |
| 3.3.3 愈伤组织的高渗处理 | 第27页 |
| 3.3.4 DNA微子弹的制备 | 第27页 |
| 3.3.5 基因枪转化过程 | 第27-28页 |
| 3.3.6 恢复培养 | 第28页 |
| 3.4 结果分析与讨论 | 第28-29页 |
| 3.4.1 不同金粉用量和质粒浓度组合对旱稻转化的影响 | 第28-29页 |
| 3.4.2 轰击压力与轰击距离对旱稻转化的影响 | 第29页 |
| 3.5 讨论 | 第29-30页 |
| 3.6 本章小结 | 第30-31页 |
| 第4章 农杆菌介导法转化旱稻 | 第31-36页 |
| 4.1 概述 | 第31页 |
| 4.2 实验材料、试剂及设备 | 第31-32页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第31页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第31页 |
| 4.2.3 实验设备 | 第31-32页 |
| 4.3 试验方法 | 第32-33页 |
| 4.3.1 培养基的配制 | 第32-33页 |
| 4.3.2 转化过程 | 第33页 |
| 4.3.3 脱菌 | 第33页 |
| 4.4 实验结果 | 第33-34页 |
| 4.4.1 农杆菌菌液浓度对转化的影响 | 第33-34页 |
| 4.4.2 农杆菌菌液侵染时间对转化的影响 | 第34页 |
| 4.4.3 抗生素浓度对转化的影响 | 第34页 |
| 4.5 讨论 | 第34-35页 |
| 4.6 本章小结 | 第35-36页 |
| 第5章 抗性愈伤的筛选与分化 | 第36-41页 |
| 5.1 概述 | 第36页 |
| 5.2 实验材料、试剂及设备 | 第36页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第36页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第36页 |
| 5.2.3 实验设备 | 第36页 |
| 5.3 实验方法 | 第36-37页 |
| 5.3.1 培养基的配制 | 第36-37页 |
| 5.3.2 筛选剂浓度的选择 | 第37页 |
| 5.3.3 抗性愈伤组织的分化成苗 | 第37页 |
| 5.4 实验结果 | 第37-39页 |
| 5.4.1 筛选剂浓度的选择 | 第37-38页 |
| 5.4.2 预分化对分化率的影响 | 第38-39页 |
| 5.4.3 旱稻的分化及成苗 | 第39页 |
| 5.5 讨论 | 第39页 |
| 5.6 本章小结 | 第39-41页 |
| 第6章 转基因旱稻的分子检测 | 第41-46页 |
| 6.1 概述 | 第41页 |
| 6.2 实验材料、试剂及仪器 | 第41-42页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第41页 |
| 6.2.2 实验试剂 | 第41页 |
| 6.2.3 主要溶液配制 | 第41页 |
| 6.2.4 主要仪器 | 第41-42页 |
| 6.3 实验方法 | 第42-43页 |
| 6.3.1 旱稻DNA的提取 | 第42页 |
| 6.3.2 PCR筛选阳性转基因植株 | 第42-43页 |
| 6.4 实验结果 | 第43-44页 |
| 6.4.1 目的基因PCR反应结果 | 第43页 |
| 6.4.2 测序结果 | 第43-44页 |
| 6.4.3 数据处理结果 | 第44页 |
| 6.5 讨论 | 第44-45页 |
| 6.6 本章小结 | 第45-46页 |
| 第7章 转基因旱稻的纯合体筛选及抗逆性研究 | 第46-53页 |
| 7.1 概述 | 第46页 |
| 7.2 实验材料、试剂及仪器 | 第46-47页 |
| 7.2.1 实验材料 | 第46页 |
| 7.2.2 实验试剂 | 第46页 |
| 7.2.3 实验设备 | 第46-47页 |
| 7.3 实验方法 | 第47-48页 |
| 7.3.1 大田除草剂筛选 | 第47页 |
| 7.3.2 种子消毒和除草剂筛选 | 第47页 |
| 7.3.3 T2代植株DNA的提取 | 第47页 |
| 7.3.4 PCR鉴定纯合体转基因植株 | 第47页 |
| 7.3.5 纯合体植株抗旱性鉴定 | 第47-48页 |
| 7.3.6 纯合体植株抗盐性鉴定 | 第48页 |
| 7.4 实验结果 | 第48-51页 |
| 7.4.1 大田喷洒除草剂对T1代植株的影响 | 第48页 |
| 7.4.2 转基因植株纯合体的筛选研究 | 第48-49页 |
| 7.4.3 不同浓度PEG6000处理对转基因旱稻株高的影响 | 第49-50页 |
| 7.4.4 不同浓度NaCl处理对纯合体植株萌发的影响 | 第50-51页 |
| 7.5 讨论 | 第51-52页 |
| 7.6 本章小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 攻读硕士期间所发表的论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
