| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-19页 |
| 1. C2结构域概述 | 第9-10页 |
| 2. synaptotagmin | 第10-18页 |
| ·脊椎动物synaptotagmin的功能及研究进展 | 第10-16页 |
| ·synaptotagmin家族成员的定位研究 | 第10-11页 |
| ·synaptotagmin的结构域 | 第11页 |
| ·synaptotagmin调节膜融合过程的分子机制 | 第11-14页 |
| ·synaptotagmin家族各亚型的生理作用 | 第14-16页 |
| ·拟南芥synaptotagmin的功能及研究进展 | 第16-18页 |
| ·sytA参与拟南芥抗冷胁迫过程中的质膜损伤修复 | 第16-17页 |
| ·sytA能保持质膜的完整以及细胞的生活力 | 第17-18页 |
| ·sytA调节植物病毒运动蛋白的胞间运动P | 第18页 |
| 3. 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 研究内容 | 第19-52页 |
| 1. 材料 | 第19-21页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·菌株及载体 | 第19页 |
| ·主要酶类、药品与试剂 | 第19页 |
| ·抗生素及常用缓冲液、培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·抗生素的配制 | 第19-20页 |
| ·常用溶液的配制 | 第20页 |
| ·常用培养基的配制 | 第20页 |
| ·常用仪器设备 | 第20-21页 |
| 2. 方法 | 第21-32页 |
| ·分子生物学相关方法 | 第21-29页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第21-23页 |
| ·PCR | 第23页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·目的基因的克隆 | 第24-25页 |
| ·DNA片段的回收和纯化 | 第25页 |
| ·载体构建 | 第25-27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和外源基因转化 | 第27-28页 |
| ·农杆菌介导的转基因方法---浸花法 | 第28页 |
| ·转基因种子的筛选及纯合体的获得 | 第28-29页 |
| ·原核表达蛋白质提取纯化方法 | 第29页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第29页 |
| ·蛋白纯化(GST柱亲合层析) | 第29页 |
| ·花粉表型观察相关方法 | 第29-31页 |
| ·花粉体外萌发 | 第29-30页 |
| ·花粉活力检测 | 第30页 |
| ·苯胺蓝染色 | 第30-31页 |
| ·GUS染色 | 第31-32页 |
| ·染液配制 | 第31页 |
| ·染色步骤 | 第31-32页 |
| 3. 结果 | 第32-48页 |
| ·sytB的分子生物学信息分析 | 第32-34页 |
| ·sytB氨基酸序列中含有信号肽和跨膜序列 | 第32页 |
| ·sytB的三级结构预测 | 第32-34页 |
| ·原核表达SYTB蛋白的提取与纯化 | 第34-36页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·SYTB蛋白的提取与纯化 | 第35-36页 |
| ·sytB的组织定位研究 | 第36-39页 |
| ·sytB启动子序列的克隆 | 第36-37页 |
| ·真核表达载体构建 | 第37-38页 |
| ·1300-sytB-GUS转基因植株的获得 | 第38页 |
| ·sytB主要在脉管组织、成熟的花粉中表达 | 第38-39页 |
| ·获得sytB过表达转基因株系 | 第39-41页 |
| ·报告基因GFP的克隆 | 第39-40页 |
| ·真核表达载体构建 | 第40页 |
| ·获得sytB、sytB158、sytB601的过表达植株 | 第40-41页 |
| ·筛选得到T-DNA插入突变体纯合体 | 第41-44页 |
| ·纯合体的鉴定 | 第43页 |
| ·精确插入位点的鉴定 | 第43-44页 |
| ·纯合体中sytB基因表达量的鉴定 | 第44页 |
| ·纯合突变体的表型观察 | 第44-48页 |
| ·突变体与野生型根长比较 | 第44-45页 |
| ·突变体与野生型营养生长过程无明显差异 | 第45-46页 |
| ·sytB的缺失不影响花粉的活力但抑制了花粉管的生长速度 | 第46-48页 |
| ·sytB1突变体果荚生长发育不受sytB缺失的影响 | 第48页 |
| 4. 讨论 | 第48-52页 |
| ·拟南芥synaptotagmin家族 | 第48-49页 |
| ·sytB可能与拟南芥生长过程物质的运输相关 | 第49-50页 |
| ·sytB在成熟的花粉中表达可能参与花粉的相关生理活动 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
