摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
缩略语及专有词汇检索表 | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-28页 |
1 根际促生有益菌 | 第18-20页 |
1.1 根际促生有益菌的作用机理与应用 | 第18页 |
1.2 芽孢杆菌类的拮抗物质 | 第18-20页 |
2 根际 | 第20-21页 |
2.1 根际与根系分泌物 | 第20-21页 |
2.2 根系分泌物对芽孢杆菌的影响 | 第21页 |
3 拮抗物质对土壤微生物的影响 | 第21-22页 |
4 土壤微生物群落结构和多样性的研究方法 | 第22-24页 |
4.1 土壤微生物群落结构和多样性概述 | 第22-23页 |
4.2 变性梯度凝胶电泳图谱(DGGE) | 第23页 |
4.3 高通量测序技术 | 第23-24页 |
5 本研究的目的、意义和技术路线 | 第24-28页 |
5.1 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
5.2 问题与解决方法 | 第25-26页 |
5.3 本研究的技术路线 | 第26-28页 |
第二章 菌株NJN-6非挥发性拮抗物质的分离鉴定 | 第28-42页 |
1 材料与方法 | 第29-32页 |
1.1 材料 | 第29页 |
1.2 方法 | 第29-32页 |
1.2.1 发酵液中Iturin A类物质的提取 | 第29页 |
1.2.2 粗提液的拮抗效果实验 | 第29-30页 |
1.2.3 粗提液IturinA类拮抗物质的鉴定 | 第30页 |
1.2.4 发酵液中Bacillomycin和macrolactin类拮抗物质的提取 | 第30-31页 |
1.2.5 粗提液中Bacillomycin和macrolactin类拮抗物质的纯化 | 第31页 |
1.2.6 Bacillomycin和macrolactin类拮抗物质的抗菌实验 | 第31页 |
1.2.7 Bacillomycin和macrolactin类拮抗物质的HPLC-ESI-MS鉴定 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-38页 |
2.1 iturinA粗提物对FOC的抑制作用 | 第32页 |
2.2 粗提物中iturinA的鉴定 | 第32-34页 |
2.3 发酵液中Bacillomycin和macrolactin类拮抗物质的提取 | 第34-35页 |
2.4 Bacillomycin和macrolactin的纯化及抗菌实验 | 第35-36页 |
2.5 Bacillomycin和macrolactin的鉴定 | 第36-38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
4 小结 | 第40-42页 |
第三章 发酵液中脂肽类物质的快速定量方法研究 | 第42-48页 |
1 材料与方法 | 第42-44页 |
1.1 材料 | 第42-43页 |
1.2 方法 | 第43-44页 |
1.2.1 IturinA的发酵制备 | 第43页 |
1.2.2 双水相系统的构建 | 第43页 |
1.2.3 双水相萃取 | 第43页 |
1.2.4 HPLC检测条件的优化 | 第43页 |
1.2.5 标准曲线的绘制及方法回收率测定 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-46页 |
2.1 双水相系统的构建 | 第44页 |
2.2 双水相萃取中pH的优化 | 第44-45页 |
2.3 HPLC检测中柱温的优化 | 第45页 |
2.4 标准曲线的绘制 | 第45-46页 |
2.5 Iturin A的定量分析及回收率实验 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-47页 |
4 小结 | 第47-48页 |
第四章 NJN-6菌株挥发性拮抗物质的分离鉴定 | 第48-60页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
1.1 材料 | 第49页 |
1.2 方法 | 第49-51页 |
1.2.1 菌株NJN-6产挥发性物质对真菌菌丝生长和孢子萌发的抑制 | 第49-50页 |
1.2.2 菌株NJN-6产挥发性物质对土壤中尖孢镰刀菌的抑制 | 第50页 |
1.2.3 菌株NJN-6所产VOCs的固相微萃取(SPME)富集 | 第50页 |
1.2.4 菌株NJN-6所产挥发性物质的GC-MS鉴定 | 第50页 |
1.2.5 挥发性物质的纯品对尖孢镰刀菌菌丝生长的抑制效率 | 第50-51页 |
2 结果与分析 | 第51-57页 |
2.1 菌株NJN-6产挥发性物质对真菌菌丝生长和孢子萌发的抑制 | 第51页 |
2.2 菌株NJN-6产挥发性物质对土壤中尖孢镰刀菌的抑制 | 第51-52页 |
2.3 菌株NJN-6产挥发性物质的GC-MS鉴定及其纯品的抗真菌效果 | 第52-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
4 小结 | 第58-60页 |
第五章 根系分泌物对菌株NJN-6根际定殖和拮抗物质产生的影响 | 第60-70页 |
1 材料与方法 | 第61-63页 |
1.1 材料 | 第61-62页 |
1.2 方法 | 第62-63页 |
1.2.1 香蕉根系分泌物的收集 | 第62页 |
1.2.2 菌株NJN-6在香蕉根系定殖能力研究 | 第62-63页 |
1.2.3 香蕉根系定殖后菌株NJN-6中拮抗物质基因和生物膜形成基因的表达 | 第63页 |
1.2.4 香蕉根系分泌物中菌株NJN-6活性物质的产生 | 第63页 |
2 结果与分析 | 第63-68页 |
2.1 菌株NJN-6生物膜形成及其在香蕉根际定殖能力分析 | 第63-64页 |
2.2 香蕉根系分泌物中菌株NJN-6产活性物质的检测 | 第64-65页 |
2.3 香蕉根系定殖后菌株NJN-6功能基因的表达 | 第65-68页 |
3 讨论 | 第68-69页 |
4 小结 | 第69-70页 |
第六章 抗细菌性拮抗物质对土壤细菌区系及PKS基因丰度的影响 | 第70-84页 |
1 材料与方法 | 第71-74页 |
1.1 材料 | 第71页 |
1.2 方法 | 第71-74页 |
1.2.1 抗细菌性拮抗物质的获得 | 第71-72页 |
1.2.2 抗细菌性拮抗物质的HPLC检测 | 第72页 |
1.2.3 土壤处理 | 第72-73页 |
1.2.4 土壤总DNA的提取及16S rRNA基因的扩增 | 第73页 |
1.2.5 高通量数据基本分析 | 第73-74页 |
1.2.6 总细菌和PKS基因的定量 | 第74页 |
1.2.7 生物数据统计分析 | 第74页 |
2 结果与分析 | 第74-81页 |
2.1 抗细菌性拮抗物质的提取 | 第74-76页 |
2.2 抗细菌性拮抗物质对土壤中16S rRNA和PKS基因丰度的影响 | 第76-77页 |
2.3 抗细菌性拮抗物质对土壤细菌群落组成的影响 | 第77-78页 |
2.4 抗细菌性拮抗物质对土壤细菌群落多样性的影响 | 第78-80页 |
2.5 抗细菌性拮抗物质对土壤细菌功能的潜在影响 | 第80-81页 |
3 讨论 | 第81-83页 |
4 小结 | 第83-84页 |
第七章 抗真菌性拮抗物质对土壤真菌区系及NRPS基因丰度的影响 | 第84-98页 |
1 材料与方法 | 第85-88页 |
1.1 材料 | 第85页 |
1.2 方法 | 第85-88页 |
1.2.1 抗真菌性拮抗物质的获得 | 第85-86页 |
1.2.2 抗真菌性拮抗物质的HPLC检测 | 第86页 |
1.2.3 土壤处理 | 第86页 |
1.2.4 土壤总DNA的提取及ITS基因的扩增 | 第86-87页 |
1.2.5 高通量数据基本分析 | 第87页 |
1.2.6 总真菌和NRPS基因的定量 | 第87-88页 |
1.2.7 生物数据统计分析 | 第88页 |
2 结果与分析 | 第88-95页 |
2.1 抗真菌性拮抗物质的分离 | 第88-89页 |
2.2 抗真菌性拮抗物质对土壤真菌群落组成的影响 | 第89-94页 |
2.3 抗真菌性拮抗物质对土壤真菌群落alpha多样性的影响 | 第94-95页 |
2.4 抗真菌性拮抗物质对土壤真菌丰度和NRPS基因丰度的影响 | 第95页 |
3 讨论 | 第95-97页 |
4 小结 | 第97-98页 |
第八章 NJN-6菌株产挥发性有机物对土壤微生物区系和功能基因丰度的影响 | 第98-110页 |
1 材料与方法 | 第99-100页 |
1.1 材料 | 第99页 |
1.2 方法 | 第99-100页 |
1.2.1 VOCs类物质的产生 | 第99页 |
1.2.2 土壤处理 | 第99页 |
1.2.3 土壤总DNA的提取及16S和ITS基因的扩增 | 第99-100页 |
1.2.4 高通量数据基本分析 | 第100页 |
1.2.5 土壤总真菌、总细菌、PKS基因、NRPS基因和N循环相关基因的定量 | 第100页 |
1.2.6 生物数据统计分析 | 第100页 |
2 结果与分析 | 第100-108页 |
2.1 挥发性物质对土壤细菌丰度、真菌丰度、PKS基因、NRPS基因和N循环相关基因的影响 | 第100-102页 |
2.2 挥发性物质对土壤细菌群落组成的影响 | 第102-104页 |
2.3 挥发性物质对土壤细菌群落多样性的影响 | 第104-105页 |
2.4 挥发性物质对土壤真菌群落组成的影响 | 第105-106页 |
2.5 挥发性物质对土壤真菌群落多样性的影响 | 第106-108页 |
3 讨论 | 第108-109页 |
4 小结 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-130页 |
全文总结及展望 | 第130-132页 |
创新点 | 第132-134页 |
博士期间发表论文 | 第134-136页 |
致谢 | 第136-137页 |