摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
缩略语(Abbreviation) | 第17-19页 |
第一篇 文献综述 | 第19-65页 |
第一章 玉米赤霉烯酮的研究进展 | 第19-39页 |
1 ZEA的产生 | 第19-20页 |
2 ZEA的生物学特性 | 第20页 |
3 ZEA的吸收、分布与代谢 | 第20-21页 |
3.1 ZEA的吸收与分布 | 第20-21页 |
3.2 ZEA的代谢 | 第21页 |
4 ZEA的毒性 | 第21-25页 |
4.1 ZEA的生殖毒性 | 第21-23页 |
4.1.1 ZEA对雌性动物的生殖毒性 | 第21-22页 |
4.1.2 ZEA对雄性动物的生殖毒性 | 第22-23页 |
4.2 ZEA的免疫毒性 | 第23页 |
4.3 ZEA的遗传毒性 | 第23-24页 |
4.4 ZEA的致癌性 | 第24页 |
4.5 玉米赤霉烯酮的肝肾毒性 | 第24页 |
4.6 玉米赤霉烯酮的内分泌毒性 | 第24-25页 |
4.7 玉米赤霉烯酮的细胞毒性 | 第25页 |
5 玉米赤霉烯酮的作用机制 | 第25-26页 |
5.1 雌激素受体途径 | 第25-26页 |
5.2 氧化损伤途径 | 第26页 |
5.3 DNA损伤途径 | 第26页 |
6 玉米赤霉烯酮的检测方法 | 第26-27页 |
7 玉米赤霉烯酮等真菌毒素的预防 | 第27页 |
7.1 田间霉菌毒素的预防 | 第27页 |
7.2 仓储霉菌毒素的预防 | 第27页 |
8 玉米赤霉烯酮的降解与脱毒技术 | 第27-29页 |
8.1 玉米赤霉烯酮的降解机制 | 第27-28页 |
8.2 玉米赤霉烯酮的脱毒技术 | 第28-29页 |
8.2.1 物理处理 | 第28-29页 |
8.2.2 化学降解 | 第29页 |
8.2.3 生物降解 | 第29页 |
9 玉米赤霉烯酮的污染现状 | 第29-31页 |
参考文献 | 第31-39页 |
第二章 子宫内膜基质细胞的研究进展 | 第39-49页 |
1 子宫内膜基质细胞的培养 | 第39-41页 |
1.1 选材 | 第39页 |
1.2 子宫内膜的消化 | 第39-40页 |
1.3 子宫内膜基质细胞的纯化 | 第40页 |
1.4 子宫内膜基质细胞的形态 | 第40-41页 |
1.5 子宫内膜基质细胞的鉴定 | 第41页 |
2 子宫内膜基质细胞的功能 | 第41-43页 |
2.1 子宫内膜基质细胞蜕膜化 | 第41-43页 |
2.1.1 子宫内膜基质细胞蜕膜化的过程 | 第41-42页 |
2.1.2 子宫内膜基质细胞蜕膜化的调控 | 第42页 |
2.1.3 子宫内膜基质细胞蜕膜化的功能 | 第42-43页 |
2.2 子宫内膜基质细胞对上皮细胞的作用 | 第43页 |
3 体外培养子宫内膜基质细胞的应用 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
第三章 细胞凋亡研究进展 | 第49-65页 |
1 细胞凋亡的概述 | 第49-50页 |
1.1 细胞凋亡与细胞坏死的区别 | 第49-50页 |
1.2 细胞凋亡的主要特征 | 第50页 |
2 细胞凋亡的分子机制 | 第50-57页 |
2.1 线粒体途径以及相关凋亡蛋白 | 第51-54页 |
2.1.1 Cytochrome C | 第52页 |
2.1.2 AIF | 第52页 |
2.1.3 Bcl-2蛋白家族 | 第52-54页 |
2.1.4 Caspase蛋白酶家族 | 第54页 |
2.2 死亡受体途径以及相关凋亡蛋白 | 第54-57页 |
2.2.1 Fas/FasL系统 | 第54-55页 |
2.2.2 TRAIL/TRAILRs系统 | 第55-57页 |
2.3 内质网应激途径以及相关凋亡蛋白 | 第57页 |
2.3.1 CHOP通路 | 第57页 |
2.3.2 Caspase-12通路 | 第57页 |
3 细胞凋亡的检测方法 | 第57-62页 |
3.1 形态学检测细胞凋亡 | 第58-59页 |
3.1.1 常规染色法 | 第58页 |
3.1.2 透射电镜检测细胞凋亡 | 第58-59页 |
3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第59-61页 |
3.2.1 基于形态学的检测 | 第59-60页 |
3.2.2 基于细胞内DNA含量的检测 | 第60页 |
3.2.3 基于细胞膜结构与完整性的检测 | 第60-61页 |
3.3 测定DNA断裂检测细胞凋亡 | 第61-62页 |
3.3.1 DNA梯状电泳 | 第61页 |
3.3.2 DNA片段原位末端标记 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
第二篇 试验研究 | 第65-147页 |
第四章 玉米赤霉烯酮对青春期雌性小鼠的毒性作用 | 第65-83页 |
1 材料与方法 | 第65-70页 |
1.1 试验材料 | 第65-66页 |
1.1.1 试验动物 | 第65页 |
1.1.2 试验试剂、耗材及仪器 | 第65-66页 |
1.2 试验方法 | 第66-70页 |
1.2.1 分组与药物注射 | 第66页 |
1.2.2 小鼠发情周期鉴定 | 第66-67页 |
1.2.3 指标测定方法 | 第67页 |
1.2.4 组织总RNA提取与保存 | 第67页 |
1.2.5 RNA浓度和纯度检测 | 第67-68页 |
1.2.6 荧光定量PCR | 第68-70页 |
1.2.7 数据统计分析 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-76页 |
2.1 ZEA对雌性小鼠生长发育的影响 | 第70页 |
2.2 ZEA对雌性小鼠器官指数的影响 | 第70-71页 |
2.3 ZEA对雌性小鼠不同组织中抗氧化物酶基因mRNA表达的影响 | 第71-72页 |
2.4 ZEA对凋亡相关基因mRNA表达的影响 | 第72-74页 |
2.5 ZEA对类固醇激素受体基因mRNA表达的影响 | 第74-75页 |
2.6 ZEA对雌性小鼠发情周期的影响 | 第75页 |
2.7 ZEA对雌性小鼠繁殖力的影响 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
4 小结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
第五章 玉米赤霉烯酮对小鼠子宫内膜基质细胞的毒性作用 | 第83-101页 |
1 材料与方法 | 第83-87页 |
1.1 试验材料 | 第83-84页 |
1.1.1 试验动物 | 第83页 |
1.1.2 试验试剂、耗材及仪器 | 第83-84页 |
1.2 试验方法 | 第84-87页 |
1.2.1 小鼠子宫内膜基质细胞的分离与纯化 | 第84页 |
1.2.2 小鼠子宫内膜基质细胞生长曲线的绘制 | 第84-85页 |
1.2.3 CCK-8检测ZEA小鼠子宫内膜基质细胞活力 | 第85页 |
1.2.4 细胞周期检测 | 第85-86页 |
1.2.5 细胞凋亡检测 | 第86-87页 |
1.2.6 数据统计分析 | 第87页 |
2 结果与分析 | 第87-95页 |
2.1 小鼠子宫内膜基质细胞的生长曲线 | 第87-88页 |
2.2 ZEA对小鼠子宫内膜基质细胞活力的影响 | 第88-89页 |
2.3 ZEA对小鼠子宫内膜基质细胞形态的影响 | 第89-91页 |
2.4 ZEA对小鼠子宫内膜基质细胞周期的影响 | 第91-92页 |
2.5 ZEA对小鼠子宫内膜基质细胞凋亡的影响 | 第92-95页 |
3 讨论 | 第95-98页 |
4 小结 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-101页 |
第六章 玉米赤霉烯酮对小鼠子宫内膜基质细胞毒性作用的机制研究 | 第101-119页 |
1 材料与方法 | 第101-108页 |
1.1 试验材料 | 第101页 |
1.1.1 试验动物 | 第101页 |
1.1.2 试验试剂、耗材以及仪器 | 第101页 |
1.2 试验方法 | 第101-108页 |
1.2.1 小鼠子宫内膜基质细胞的分离与纯化 | 第101-102页 |
1.2.2 CCK-8检测ZEA小鼠子宫内膜基质细胞增殖的影响 | 第102页 |
1.2.3 Annexin V/PI双染检测细胞凋亡 | 第102页 |
1.2.4 细胞内ROS的检测 | 第102页 |
1.2.5 线粒体膜电位的检测 | 第102-103页 |
1.2.6 细胞总RNA的提取与保存 | 第103页 |
1.2.7 RNA浓度和纯度检测 | 第103-104页 |
1.2.8 荧光定量PCR | 第104-105页 |
1.2.9 Caspases活性测定 | 第105页 |
1.2.10 Western Blot分析 | 第105-107页 |
1.2.11 数据统计分析 | 第107-108页 |
2 结果与分析 | 第108-115页 |
2.1 G2/M期阻滞相关基因的mRNA表达水平 | 第108页 |
2.2 细胞凋亡相关基因的mRNA表达水平 | 第108-110页 |
2.3 细胞凋亡相关基因的蛋白水平以及Caspases活性 | 第110-111页 |
2.4 ZEA处理引起细胞内ROS水平以及线粒体膜电位的变化 | 第111-113页 |
2.5 抑制剂Z-VAD-FMK和Z-LEHD-FMK挽救ZEA引起的细胞凋亡 | 第113-115页 |
3 讨论 | 第115-116页 |
4 小结 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-119页 |
第七章 玉米赤霉烯酮处理的小鼠子宫内膜基质细胞的转录组特征 | 第119-147页 |
1 材料与方法 | 第119-128页 |
1.1 试验材料 | 第119-120页 |
1.1.1 试验动物 | 第119页 |
1.1.2 试验样品 | 第119-120页 |
1.1.3 试验试剂、耗材及仪器 | 第120页 |
1.2 试验方法 | 第120-128页 |
1.2.1 小鼠子宫内膜基质细胞的分离与纯化 | 第120页 |
1.2.2 细胞总RNA的提取与保存 | 第120页 |
1.2.3 RNA-Seq样品旳准备及上机测序 | 第120-121页 |
1.2.4 RNA-Seq测序数据处理及生物信息学分析 | 第121-127页 |
1.2.5 差异表达基因荧光定量PCR验证 | 第127-128页 |
1.2.6 数据统计分析 | 第128页 |
2 结果与分析 | 第128-139页 |
2.1 RNA提取与质量检测 | 第128-130页 |
2.2 RNA-Seq原始序列数据质量控制 | 第130-131页 |
2.3 RNA-Seq测序数据与参考序列比对 | 第131-133页 |
2.3.1 与参考基因组和参考基因比对结果 | 第131-132页 |
2.3.2 随机性检测 | 第132页 |
2.3.3 基因覆盖度 | 第132-133页 |
2.4 基因差异表达分析 | 第133-136页 |
2.4.1 GO功能富集分析 | 第134-135页 |
2.4.2 KEGG Pathway功能富集分析 | 第135-136页 |
2.5 可变剪接分析 | 第136-137页 |
2.6 基因结构优化 | 第137-138页 |
2.7 新转录本预测 | 第138-139页 |
2.8 差异表达基因荧光定量PCR验证 | 第139页 |
3 讨论 | 第139-143页 |
4 小结 | 第143-144页 |
参考文献 | 第144-147页 |
全文结论 | 第147-149页 |
创新点 | 第149-151页 |
附录 | 第151-157页 |
致谢 | 第157-159页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第159页 |