缩略语索引表 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
引言 | 第14-17页 |
参考文献 | 第16-17页 |
第一部分 结直肠癌肝转移尿蛋白标志物的鉴定 | 第17-58页 |
引言 | 第21-23页 |
材料和方法 | 第23-37页 |
1. 材料 | 第23-26页 |
1.1 标本 | 第23-24页 |
1.2 细胞系 | 第24页 |
1.3 抗体和质粒 | 第24页 |
1.4 主要试剂 | 第24页 |
1.5 常用溶液 | 第24-26页 |
1.6 主要仪器 | 第26页 |
2. 方法 | 第26-37页 |
2.1 尿蛋白富集 | 第26-27页 |
2.2 尿蛋白洗脱 | 第27页 |
2.3 细胞培养 | 第27页 |
2.4 细胞冻存 | 第27-28页 |
2.5 细胞转染 | 第28页 |
2.6 细胞划痕实验 | 第28页 |
2.7 细胞Transwell实验 | 第28-29页 |
2.8 CCK8法检测细胞生长 | 第29页 |
2.9 平板集落形成 | 第29页 |
2.10 细胞全蛋白提取 | 第29页 |
2.11 蛋白定量 | 第29-30页 |
2.12 细菌转化 | 第30页 |
2.13 质粒小量提取 | 第30-31页 |
2.14 质粒大量提取 | 第31页 |
2.15 Western Blot | 第31-32页 |
2.16 尿蛋白Western Blot | 第32-33页 |
2.17 蛋白质二维电泳 | 第33页 |
2.18 银染 | 第33-34页 |
2.19 膜辅助溶液内蛋白酶切 | 第34页 |
2.20 C18固相萃取 | 第34-35页 |
2.21 BCA法测定多肽浓度 | 第35页 |
2.22 TMT标记 | 第35页 |
2.23 离线高pH反相高效液相色谱分离TMT多肽 | 第35-36页 |
2.24 LC-MS/MS分析 | 第36页 |
2.25 数据处理和生物信息学分析 | 第36页 |
2.26 统计学分析 | 第36-37页 |
结果 | 第37-50页 |
1. 硝酸纤维素膜尿蛋白富集法可有效富集尿蛋白 | 第37-40页 |
2. 结直肠癌尿蛋白的定量蛋白质组学分析 | 第40-45页 |
3. 尿蛋白HGS的功能研究 | 第45-50页 |
3.1 结直肠癌伴有肝转移患者尿蛋白HGS含量升高 | 第45-47页 |
3.2 在结直肠癌体外培养细胞中HGS的表达 | 第47页 |
3.3 稳定敲降HGS细胞的构建 | 第47-48页 |
3.4 敲降HGS不影响结肠癌HCT116细胞的增殖 | 第48页 |
3.5 敲降HGS降低结肠癌HCT116细胞的迁移能力 | 第48-50页 |
讨论 | 第50-54页 |
小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
第二部分 基因-环境的交互作用与不同胃粘膜病变关系 | 第58-90页 |
引言 | 第60-62页 |
材料和方法 | 第62-69页 |
1. 材料 | 第62页 |
1.1 研究对象 | 第62页 |
1.2 主要试剂 | 第62页 |
1.3 主要仪器和软件 | 第62页 |
2. 方法 | 第62-69页 |
2.1 外周血基因组DNA提取 | 第62-63页 |
2.2 DNA含量和纯度测定 | 第63-64页 |
2.3 多态位点基因型的检测 | 第64-67页 |
2.4 H.pylori分型检测 | 第67-68页 |
2.5 统计学分析 | 第68-69页 |
结果 | 第69-84页 |
1. 研究对象基本资料分析 | 第69-70页 |
2. 七个多态位点与胃癌风险的主效应分析 | 第70-76页 |
3. 幽门螺杆菌感染、吸烟、饮酒与多态位点基因型分层分析 | 第76-80页 |
4. 幽门螺杆菌感染、吸烟、饮酒与多态位点基因型联合作用分析 | 第80-84页 |
讨论 | 第84-86页 |
小结 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-90页 |
文献综述 | 第90-106页 |
参考文献 | 第102-106页 |
附表 | 第106-116页 |
个人简历 | 第116-118页 |
致谢 | 第118-148页 |