致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
符号说明 | 第13-20页 |
1 绪论 | 第20-43页 |
1.1 手性除草剂种类 | 第20-22页 |
1.2 对映体分离及制备方法 | 第22-26页 |
1.2.1 色谱拆分法 | 第22-25页 |
1.2.1.1 气相色谱法(GC) | 第23页 |
1.2.1.2 高效液相色谱法(HPLC) | 第23-24页 |
1.2.1.3 毛细管电泳法(HPCE) | 第24页 |
1.2.1.4 超临界液体色谱(SFC) | 第24-25页 |
1.2.2 化学拆分法 | 第25页 |
1.2.3 结晶拆分法 | 第25页 |
1.2.4 微生物拆分法 | 第25-26页 |
1.3 对映体绝对构型表征方法 | 第26-28页 |
1.3.1 非光谱法 | 第26页 |
1.3.2 光谱法 | 第26-28页 |
1.3.2.1 电子圆二色(ECD)计算 | 第27页 |
1.3.2.2 振动圆二色(VCD)计算 | 第27-28页 |
1.3.2.3 激子手性方法 | 第28页 |
1.4 手性除草剂对映异构体环境行为研究 | 第28-32页 |
1.4.1 手性除草剂在土壤中的行为研究 | 第28-29页 |
1.4.2 手性除草剂在水中的行为研究 | 第29-30页 |
1.4.3 手性除草剂在植物体中的行为研究 | 第30页 |
1.4.4 手性除草剂在动物体中的行为研究 | 第30-31页 |
1.4.5 手性除草剂对映体比例评价指标 | 第31-32页 |
1.5 手性除草剂对映异构体效应毒理研究 | 第32-34页 |
1.6 除草剂污染处理技术 | 第34-35页 |
1.6.1 土壤污染处理技术 | 第34页 |
1.6.2 水体污染处理技术 | 第34-35页 |
1.7 几类供试手性除草剂研究进展 | 第35-41页 |
1.7.1 几种供试手性除草剂的基本性质 | 第35-39页 |
1.7.2 几种供试手性除草剂的手性拆分 | 第39-40页 |
1.7.3 几种供试手性除草剂的对映体选择性 | 第40-41页 |
1.7.4 几类供试手性除草剂作用机理 | 第41页 |
1.8 本论文立题依据、研究目的及意义 | 第41-43页 |
2 除草剂对映体的制备、表征及稳定性判定 | 第43-65页 |
2.1 前言 | 第43-44页 |
2.2 材料与方法 | 第44-48页 |
2.2.1 主要材料与试剂 | 第44页 |
2.2.2 仪器设备 | 第44-46页 |
2.2.3 色谱参数 | 第46-47页 |
2.2.4 实验/计算圆二色(ECD) | 第47页 |
2.2.5 对映体对接模型建立 | 第47-48页 |
2.3 结果与讨论 | 第48-64页 |
2.3.1 酰胺类手性除草剂的HPLC分离优化 | 第48-56页 |
2.3.1.1 不同手性柱及流动相对分离效果的影响 | 第48-51页 |
2.3.1.2 不同流速对分离效果的影响 | 第51-52页 |
2.3.1.3 不同温度对分离效果的影响 | 第52-56页 |
2.3.2 手性识别机理 | 第56-59页 |
2.3.3 手性除草剂对映体的制备 | 第59-62页 |
2.3.4 手性除草剂对映体的绝对构型表征 | 第62页 |
2.3.5 手性除草剂对映体的稳定性 | 第62-64页 |
2.4 小结 | 第64-65页 |
3 三大类手性除草剂生物毒性效应的对映体差异 | 第65-88页 |
3.1 前言 | 第65页 |
3.2 材料与方法 | 第65-69页 |
3.2.1 主要材料与试剂 | 第65-66页 |
3.2.2 仪器设备 | 第66页 |
3.2.3 供试生物培养 | 第66-69页 |
3.2.3.1 稗草培养 | 第66页 |
3.2.3.2 铜绿微囊藻培养 | 第66-68页 |
3.2.3.3 重组酵母双杂交实验 | 第68页 |
3.2.3.4 人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖实验 | 第68-69页 |
3.2.3.5 数据统计 | 第69页 |
3.2.3.6 对映体作用差异分析 | 第69页 |
3.3 结果与分析 | 第69-86页 |
3.3.1 手性除草剂对映体对稗草的选择性差异 | 第69-76页 |
3.3.2 手性除草剂对映体对铜绿微囊藻的选择性差异 | 第76-83页 |
3.3.3 手性除草剂对映体对甲状腺激素干扰的选择性差异 | 第83-85页 |
3.3.4 手性除草剂对映体雌激素干扰效应的选择性差异 | 第85-86页 |
3.4 对映体差异原因分析 | 第86-87页 |
3.5 小结 | 第87-88页 |
4 轴手性酰胺类除草剂除草机制差异研究 | 第88-105页 |
4.1 前言 | 第88页 |
4.2 材料与方法 | 第88-94页 |
4.2.1 实验材料 | 第88-89页 |
4.2.2 稗草培养条件 | 第89页 |
4.2.3 叶绿素含量测定 | 第89页 |
4.2.4 抗氧化系统活性测定 | 第89-91页 |
4.2.5 谷胱甘肽转移酶(GST)测定 | 第91页 |
4.2.6 GST基因转录水平测定 | 第91-94页 |
4.2.6.1 总RNA提取 | 第91-92页 |
4.2.6.2 利用总RNA作为模板合成cDNA第一链 | 第92页 |
4.2.6.3 引物设计 | 第92-93页 |
4.2.6.4 目的片段扩增 | 第93页 |
4.2.6.5 实时定量荧光PCR检测GSTs基因表达 | 第93-94页 |
4.3 结果与分析 | 第94-103页 |
4.3.1 除草剂对映体对叶绿素含量的影响 | 第94-95页 |
4.3.2 除草剂对映体对抗氧化系统的影响 | 第95-100页 |
4.3.2.1 丙二醛含量(MDA)影响 | 第95-96页 |
4.3.2.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性影响 | 第96-97页 |
4.3.2.3 过氧化物酶(POD)活性影响 | 第97-98页 |
4.3.2.4 过氧化氢酶(CAT)活性影响 | 第98-100页 |
4.3.3 除草剂对映体对稗草过氧化物酶(GST)活性的影响 | 第100页 |
4.3.4 除草剂对映体对GST基因表达的影响 | 第100-103页 |
4.3.4.1 总RNA提取 | 第101页 |
4.3.4.2 EcGSTs目的基因片段扩增 | 第101-102页 |
4.3.4.3 EcGSTs目的基因Q-PCR分析 | 第102-103页 |
4.4 小结 | 第103-105页 |
5 碳轴手性酰胺类除草剂在藻液及藻体中的环境行为差异研究 | 第105-120页 |
5.1 前言 | 第105页 |
5.2 材料与方法 | 第105-109页 |
5.2.1 实验材料 | 第105-106页 |
5.2.1.1 药品与试剂 | 第105页 |
5.2.1.2 仪器设备 | 第105-106页 |
5.2.2 实验方法 | 第106页 |
5.2.2.1 除草剂对映体残留实验 | 第106页 |
5.2.2.2 富集实验 | 第106页 |
5.2.2.3 异构化实验 | 第106页 |
5.2.3 铜绿微囊藻生物量测定 | 第106页 |
5.2.4 样品前处理 | 第106-108页 |
5.2.4.1 藻液分离 | 第107页 |
5.2.4.2 培养液处理 | 第107页 |
5.2.4.3 铜绿微囊藻样品含量测定 | 第107-108页 |
5.2.5 标准溶液配制 | 第108页 |
5.2.6 加标回收 | 第108页 |
5.2.7 分析方法 | 第108页 |
5.2.8 数据处理 | 第108-109页 |
5.2.8.1 对映体分数计算 | 第108页 |
5.2.8.2 生物富集倍数计算 | 第108-109页 |
5.3 结果与分析 | 第109-118页 |
5.3.1 方法确证 | 第109-111页 |
5.3.2 除草剂对映体残留 | 第111-113页 |
5.3.3 除草剂对映体富集 | 第113-118页 |
5.3.4 除草剂对映体在藻及藻液中的异构化现象 | 第118页 |
5.4 小结 | 第118-120页 |
6 研究结果与工作展望 | 第120-124页 |
6.1 研究结果 | 第120-122页 |
6.2 创新点 | 第122页 |
6.3 工作展望 | 第122-124页 |
参考文献 | 第124-141页 |
攻读博士学位期间学术成果 | 第141页 |