致谢 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略语 | 第14-20页 |
前言 | 第20-23页 |
第一章 聚乙烯亚胺碳纳米管的制备与表征 | 第23-42页 |
1.1 实验试剂与仪器 | 第23-24页 |
1.1.1 实验试剂 | 第23页 |
1.1.2 仪器 | 第23-24页 |
1.2 实验方法与步骤 | 第24-27页 |
1.2.1 聚乙烯亚胺胆固醇的合成及表征 | 第24-25页 |
1.2.2 聚乙烯亚胺碳纳米管(PCs)的制备 | 第25页 |
1.2.3 紫外-近红外及红外光谱测定 | 第25-26页 |
1.2.4 透射电镜及电位测定 | 第26页 |
1.2.5 光热转换能力测定 | 第26页 |
1.2.6 琼脂糖凝胶电泳及体外光热促释放评价 | 第26-27页 |
1.3 实验结果 | 第27-40页 |
1.3.1 PEI-Chol红外光谱及核磁共振结果 | 第27-30页 |
1.3.2 PCS理化性质评价 | 第30-34页 |
1.3.3 PCS/pDNA的光热转换能力 | 第34-36页 |
1.3.4 PCS的DNA结合能力及复合物体外光热促释放行为 | 第36-40页 |
1.4 讨论与结论 | 第40-42页 |
第二章 聚乙烯亚胺碳纳米管摄取及转染研究 | 第42-62页 |
2.1 实验试剂与仪器 | 第42-43页 |
2.1.1 实验试剂 | 第42-43页 |
2.1.2 仪器 | 第43页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第43-47页 |
2.2.1 HEK293细胞及HeLa细胞的培养 | 第43页 |
2.2.2 细胞毒性测定 | 第43-44页 |
2.2.3 体外光热转染效率评价 | 第44页 |
2.2.4 异硫氰酸荧光素(FITC)标记PCS | 第44-45页 |
2.2.5 PCS/DNA细胞内光促解离考察 | 第45页 |
2.2.6 PCS/DNA入胞机制考察 | 第45-46页 |
2.2.7 溶酶体共定位 | 第46页 |
2.2.8 小窝蛋白蛋白共定位 | 第46页 |
2.2.9 统计学分析 | 第46-47页 |
2.3 实验结果 | 第47-60页 |
2.3.1 细胞毒性测定 | 第47-48页 |
2.3.2 光热基因转染考察 | 第48-50页 |
2.3.3 PCS/DNA细胞内促解离考察 | 第50-51页 |
2.3.4 PCS/DNA入胞机制考察 | 第51-58页 |
2.3.5 溶酶体共定位 | 第58-59页 |
2.3.6 小窝蛋白共定位 | 第59-60页 |
2.4 讨论与结论 | 第60-62页 |
第三章 聚乙烯亚胺碳纳米管的体内外药效学评价 | 第62-78页 |
3.1 实验试剂与仪器 | 第62-63页 |
3.1.1 实验试剂 | 第62页 |
3.1.2 仪器 | 第62-63页 |
3.2 实验方法与步骤 | 第63-68页 |
3.2.1 pTP53转染实验 | 第63页 |
3.2.2 周期阻滞实验 | 第63-64页 |
3.2.3 细胞凋亡检测 | 第64页 |
3.2.4 Hoechst核凋亡及线粒体形态 | 第64页 |
3.2.5 线粒体膜电位检测 | 第64-65页 |
3.2.6 p53、Bcl-2及Bax蛋白水平 | 第65-66页 |
3.2.7 肿瘤模型的建立 | 第66页 |
3.2.8 体内光热基因转染 | 第66页 |
3.2.9 体内抗肿瘤基因治疗 | 第66-67页 |
3.2.10 统计学分析 | 第67-68页 |
3.3 实验结果 | 第68-76页 |
3.3.1 周期阻滞实验 | 第68页 |
3.3.2 细胞凋亡检测 | 第68-69页 |
3.3.3 Hoechst核凋亡及线粒体形态 | 第69-70页 |
3.3.4 线粒体膜电位检测 | 第70-72页 |
3.3.5 p53、Bax、Bcl-2蛋白水平 | 第72-73页 |
3.3.6 体内光热基因转染 | 第73-74页 |
3.3.7 体内抗肿瘤治疗评价 | 第74-76页 |
3.4 讨论与结论 | 第76-78页 |
第四章 非溶酶体途径的阳离子脂质体的制备 | 第78-92页 |
4.1 实验试剂与仪器 | 第78-79页 |
4.1.1 实验试剂 | 第78页 |
4.1.2 仪器 | 第78-79页 |
4.2 实验方法与步骤 | 第79-83页 |
4.2.1 FAL-PEG-DSPE的合成 | 第79-80页 |
4.2.2 非溶酶体途径阳离子脂质体的制备 | 第80-82页 |
4.2.3 TEM考察及电位测定 | 第82页 |
4.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第82-83页 |
4.2.5 统计学分析 | 第83页 |
4.3 实验结果 | 第83-89页 |
4.3.1 DSPE-PEG-FAL的表征 | 第83-85页 |
4.3.2 非溶酶体途径的阳离子脂质体处方筛选及制备 | 第85-87页 |
4.3.3 TEM及电位结果 | 第87-89页 |
4.3.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第89页 |
4.4 讨论与结论 | 第89-92页 |
第五章 阳离子脂质体的转染及治疗研究 | 第92-106页 |
5.1 实验试剂与仪器 | 第92-93页 |
5.1.1 实验试剂 | 第92页 |
5.1.2 仪器 | 第92-93页 |
5.2 实验方法与步骤 | 第93-95页 |
5.2.1 DSPE-PEG-Par的亚细胞共定位 | 第93页 |
5.2.2 阳离子脂质体的体外转染研究 | 第93-94页 |
5.2.3 阳离子脂质体的细胞毒性测定 | 第94页 |
5.2.4 阳离子脂质体的体内转染研究 | 第94页 |
5.2.5 阳离子脂质体的体内抑瘤研究 | 第94-95页 |
5.2.6 统计学分析 | 第95页 |
5.3 实验结果 | 第95-103页 |
5.3.1 DSPE-PEG-FAL的亚细胞共定位 | 第95-96页 |
5.3.2 阳离子脂质体的细胞转染效率 | 第96-97页 |
5.3.3 阳离子脂质体的细胞毒性 | 第97-98页 |
5.3.4 体内转染结果 | 第98-99页 |
5.3.5 体内抑瘤结果 | 第99-103页 |
5.4 讨论与结论 | 第103-106页 |
全文总结 | 第106-109页 |
参考文献 | 第109-115页 |
综述 | 第115-140页 |
参考文献 | 第130-140页 |
作者简历 | 第140-142页 |
在学期间所取得的科研成果 | 第142页 |