| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| ·植物生长素原初响应基因Aux/IAA的研究进展 | 第11-15页 |
| ·植物的生长素原初响应基因的结构特征 | 第11-12页 |
| ·植物生长素原初响应基因的生物学功能 | 第12-14页 |
| ·植物生长素原初响应基因的调控机制 | 第14-15页 |
| ·植物miRNA的作用机制与功能 | 第15-17页 |
| ·新一代高通量测序技术 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·材料准备 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·试剂与来源 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第21-23页 |
| ·改良CTAB+Trizol法 | 第21-22页 |
| ·改良CTAB+EASYspin试剂盒 | 第22-23页 |
| ·总RNA质量的检测 | 第23页 |
| ·山核桃Aux/IAA基因的RACE扩增 | 第23-25页 |
| ·RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)引物设计 | 第23页 |
| ·第一链cDNA的扩增 | 第23页 |
| ·RACE扩增 | 第23-24页 |
| ·阳性片段的回收 | 第24页 |
| ·PCR回收产物和PMD18-T载体连接，制备感受态并转化 | 第24-25页 |
| ·细菌检测 | 第25页 |
| ·CcIAA基因验证和序列分析 | 第25-26页 |
| ·CcIAA基因生物信息学的分析 | 第26页 |
| ·CcIAA基因在转录水平上的分析 | 第26-27页 |
| ·山核桃不同的嫁接时期嫁接茎总RNA的提取 | 第26页 |
| ·内参与目的基因的引物设计 | 第26页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第26页 |
| ·模板与引物的验证 | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第27页 |
| ·CcIAA基因在翻译水平上的表达分析 | 第27-29页 |
| ·不同嫁接时期山核桃嫁接茎总蛋白提取与检测 | 第27-28页 |
| ·Western blot | 第28-29页 |
| ·山核桃小RNA测序分析 | 第29-33页 |
| ·总RNA提取，miRNA文库构建及Solexa测序 | 第29页 |
| ·山核桃miRNA序列分析 | 第29-30页 |
| ·山核桃miRNA差异表达分析 | 第30页 |
| ·miRNA与靶基因qRT-PCR检测 | 第30-33页 |
| 3 结果分析 | 第33-63页 |
| ·CcIAA基因全长克隆 | 第33-40页 |
| ·山核桃总RNA电泳分析 | 第33页 |
| ·CcIAA基因的RACE扩增结果 | 第33-35页 |
| ·序列分析 | 第35-40页 |
| ·CcIAA的氨基酸组成及理化性质 | 第35-36页 |
| ·CcIAA跨膜分析 | 第36页 |
| ·CcIAA基因同源性的分析和构建系统进化树 | 第36-40页 |
| ·CcIAA基因在转录水平的表达分析 | 第40-45页 |
| ·不同嫁接时期山核桃茎的总RNA | 第40-41页 |
| ·不同激素处理条件下CcIAA基因在山核桃嫁接不同时期的表达分析 | 第41-45页 |
| ·CcIAA基因在翻译水平上的表达分析 | 第45-47页 |
| ·山核桃嫁接相关miRNA分析 | 第47-63页 |
| ·山核桃嫁接相关miRNA序列的基本情况 | 第47-50页 |
| ·山核桃嫁接过程中中保守miRNA的分析 | 第50-52页 |
| ·山核桃中新miRNA分析 | 第52-54页 |
| ·山核桃嫁接不同时期miRNA的差异性表达分析 | 第54-58页 |
| ·山核桃miRNA靶基因预测以及表达模式 | 第58-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 5 结论与展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 作者简介及在学成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
