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Carm1在P19细胞神经分化过程中的调控机制初探

缩写词表第1-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-11页
前言第11-17页
材料与方法第17-30页
 一、试剂和材料第17-20页
 二、菌株、细胞株和质粒第20-21页
 三、主要实验方法第21-30页
  1. 限制性内切酶的酶切反应第21页
  2. 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段第21页
  3. PCR产物纯化第21-22页
  4. DNA片段的连接第22页
  5. 质粒DNA的转化第22页
  6. 质粒DNA的碱裂解法小量制备第22-23页
  7. 质粒DNA的大量制备第23页
  8. HEK-293T细胞培养第23页
  9. P19细胞培养第23页
  10. 细胞计数第23-24页
  11. 细胞复苏第24页
  12. 细胞传代第24页
  13. 细胞冻存第24页
  14. 质粒转染细胞第24页
  15. 包装慢病毒并感染目标细胞第24页
  16. 细胞总RNA的制备第24-25页
  17. 逆转录反应第25页
  18. PCR扩增第25页
  19. 退火反应第25页
  20. 琼脂糖凝胶电泳第25页
  21. Real-time PCR第25-26页
  22. 免疫印迹分析(immunobloting assays,IB)第26-28页
  23. 酸抽提组蛋白第28页
  24. 免疫荧光第28页
  25. 基于pLKO.1载体的shRNA质粒构建第28-30页
实验结果第30-45页
 一、RA诱导P19细胞神经分化第30-31页
 二、Carml在P19细胞神经分化过程中的表达第31-32页
 三、稳定敲低Carml的P19细胞系的建立第32-37页
 四、Carml敲低对P19细胞中神经分化潜能的影响第37-39页
 五、多能性基因在Carml敲低细胞系中的表达第39-41页
 六、敲低Carml对多能转录调控因子Sox2蛋白及其R113甲基化的影响第41页
 七、敲低Carml对组蛋白H3甲基化修饰的影响第41-42页
 八、Carml在其稳定敲低的P19细胞系中的转录共激活作用第42-43页
 九、组蛋白去甲基化酶Kdm3a在P19细胞诱导分化早期的表达第43-45页
讨论第45-49页
小结第49-50页
参考文献第50-54页
附录:综述第54-60页
 参考文献第57-60页
个人简历第60-61页
致谢第61-62页

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