| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-26页 |
| 1 抗流感病毒主要宿主限制因子研究进展 | 第12-20页 |
| ·流感病毒概述 | 第12页 |
| ·宿主限制因子抗流感病毒作用 | 第12-20页 |
| 2 IFITMs研究进展 | 第20-24页 |
| ·IFITMs家族 | 第20-21页 |
| ·IFITMs广谱抗病毒作用 | 第21-22页 |
| ·IFITMs蛋白结构和细胞分布 | 第22-23页 |
| ·IFITM3抗病毒作用机制 | 第23-24页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 材料和方法 | 第26-45页 |
| 1 材料 | 第26-29页 |
| ·细胞、质粒、酶 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·主要溶液及培养基 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-45页 |
| ·含hIFITM3基因的重组腺病毒穿梭质粒的构建与鉴定 | 第29-31页 |
| ·携带hIFITM3基因的重组腺病毒的包装 | 第31-35页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第35-40页 |
| ·重组腺病毒扩增及滴度测定 | 第40-41页 |
| ·重组腺病毒表达IFITM3蛋白体外抗流感作用分析 | 第41-45页 |
| 结果 | 第45-59页 |
| 1 含hIFITM3基因的重组腺病毒穿梭质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| ·目的基因的获取 | 第45页 |
| ·含IFITM3基因重组腺病毒穿梭质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| 2 携带IFITM3基因的重组腺病毒包装 | 第46-48页 |
| ·质粒大提与浓度鉴定 | 第46页 |
| ·质粒线性化 | 第46-47页 |
| ·质粒抽提纯化 | 第47页 |
| ·重组腺病毒转染(包装) | 第47-48页 |
| 3 重组腺病毒的鉴定 | 第48-50页 |
| ·细胞基因组提取及PCR鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组腺病毒PCR鉴定 | 第49页 |
| ·Western blot分析靶蛋白表达 | 第49-50页 |
| ·Western blot分析IFITM3在细胞中的定位 | 第50页 |
| 4 重组腺病毒扩增及滴度测定 | 第50-53页 |
| ·重组腺病毒扩增 | 第50-51页 |
| ·重组腺病毒滴度测定 | 第51-52页 |
| ·重组腺病毒电镜观察 | 第52-53页 |
| 5 重组腺病毒表达IFITM3蛋白体外抗流感作用分析 | 第53-59页 |
| ·MTS分析腺病毒对细胞活性或增值的影响 | 第53-54页 |
| ·重组腺病毒在细胞中过表达外源基因研究 | 第54-56页 |
| ·重组腺病毒体外抗流感作用研究 | 第56-59页 |
| 讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
