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小麦赤霉病Ⅱ型抗性机理研究及相关基因的功能鉴定

中文摘要第1-13页
ABSTRACT第13-16页
1 前言第16-39页
   ·小麦赤霉病概述第16-17页
   ·小麦赤霉病的病害特征第17页
   ·赤霉病菌的来源、发生和传播第17-18页
   ·小麦赤霉病病原菌的侵染过程第18-19页
   ·小麦赤霉病的有效治理第19-21页
   ·小麦赤霉菌毒素与致病性第21-23页
     ·小麦赤霉菌毒素研究第21页
     ·赤霉菌产毒素能力与致病力第21-23页
   ·小麦赤霉病抗源研究进展第23-26页
     ·小麦赤霉病抗源类型及特征分析第23-25页
     ·小麦赤霉病抗性资源第25-26页
   ·小麦抗赤霉病机理研究现状第26-36页
     ·小麦形态结构抗病性研究第27-29页
     ·小麦赤霉病抗性生理生化机制研究第29-34页
       ·活性氧在植物抗病中的作用第29-30页
       ·酶活性对赤霉病的影响第30-32页
       ·致病性相关的其他物质第32-34页
     ·植物激素在植物抗病中的作用第34-36页
       ·SA抗病信号转导途径第34页
       ·JA/ET抗病信转导第34页
       ·JA与ET之间的相互协同第34-35页
       ·JA/ET与SA之间互相拮抗第35-36页
   ·小麦赤霉病抗病相关基因研究进展第36-38页
   ·本研究的目的和意义第38-39页
   ·本研究的主要研究内容第39页
2 材料与方法第39-61页
   ·材料第39-42页
     ·植物材料第39页
     ·试验地点第39页
     ·菌株与质粒第39-40页
     ·酶及生化试剂第40页
     ·主要溶液和培养基配制第40-41页
     ·主要仪器第41-42页
   ·实验方法第42-60页
     ·实验材料的处理及保存第42页
     ·植物基因组DNA提取第42-43页
     ·植物组织总RNA提取第43页
     ·第一链cDNA的合成及PCR反应第43-44页
     ·目的核酸片段的纯化回收第44-45页
     ·回收产物与T载体连接第45页
     ·热激法转化E.col1感受态细胞第45页
     ·普通质粒小量提取第45-46页
     ·农杆菌感受态的制备第46页
     ·冻融法转化农杆菌感受态细胞第46-47页
     ·生物信息学分析第47页
     ·BSMV-VIGS体系的在小麦赤霉病抗病路径研究中的应用第47-48页
       ·BSMV基因沉默载体的构建第47页
       ·BSMV-VIGS技术诱导小麦穗部基因沉默第47-48页
     ·qRT-PCR在基因表达分析中的应用第48-50页
     ·禾谷镰刀菌培养和小麦赤霉病抗性鉴定第50页
       ·小麦穗部赤霉病接种方法及抗病性鉴定第50页
       ·胚芽鞘赤霉病接种方法及抗病性鉴定第50页
       ·离体叶片赤霉病接种方法及抗病性鉴定第50页
     ·TaUGT5基因的小麦遗传转化第50-52页
       ·TaUGT5基因克隆第50-51页
       ·TaUGT5基因小麦过表达载体的构建第51页
       ·TaUGT5的小麦遗传转化第51-52页
     ·小麦TaUGT5的染色体定位第52页
     ·小麦TaUGT5的亚细胞定位第52-54页
       ·小麦TaUGT5的亚细胞定位载体构建第52-53页
       ·农杆菌介导烟草叶片表皮细胞的亚细胞定位步骤第53页
       ·烟草叶片表皮细胞的原生质体制备第53-54页
     ·植物组织解剖观察及染色观察第54-55页
       ·植物组织的解剖观察第54页
       ·植物组织的染色观察第54-55页
     ·转录组测序及数据分析第55-58页
       ·RNA文库的构建第55-58页
       ·转录组测序及差异表达分析第58页
     ·小麦穗部激素测定第58-60页
       ·激素测定所需试剂和耗材第58页
       ·激素测定所需主要实验仪器第58页
       ·激素测定的实验操作第58-60页
   ·技术路线第60-61页
3 结果与分析第61-90页
   ·转录组数据分析第61-65页
     ·转录组数据质量评估第61页
     ·差异表达基因分析第61-62页
     ·GO及KEGG分析第62-65页
   ·小麦穗部接菌后新陈代谢过程第65-72页
     ·小麦穗部内源激素变化规律第69-70页
     ·外源激素处理对小麦赤霉病抗性的影响第70-72页
   ·SA和JA通路关键基因的表达分析第72-74页
   ·通路关键基因的BSMV-VIGS功能验证第74-75页
   ·接菌小穗HR反应与SA信号途径的关系第75-78页
     ·接菌小穗组织ROS鉴定第75-76页
     ·禾谷镰刀菌对接菌小穗的侵染过程第76-77页
     ·植物体HR反应与SA之间的调控第77-78页
   ·去毒化基因TaUGT5在小麦赤霉病中的功能研究第78-90页
     ·TaUGT5基因的克隆及序列分析第78-80页
     ·TaUGT5基因的染色体定位和特异性分析第80-82页
     ·TaUGT5基因的亚细胞定位第82-83页
     ·TaUGT5基因的表达分析第83-85页
     ·TaUGT5基因转基因植物功能验证第85-90页
       ·TaUGT5转基因拟南芥的表型鉴定第85页
       ·TaUGT5转基因小麦的表型鉴定第85-90页
4 讨论第90-97页
   ·禾谷镰刀菌胁迫下小麦转录组数据分析第90-92页
   ·SA和JA对小麦赤霉病抗性影响第92-94页
   ·活性氧迸发在小麦赤霉病抗性中的作用第94-95页
   ·TaUGT5是一个新的DON去毒化基因第95页
   ·TaUGT5存在等位点变异第95-96页
   ·TaUGT5过表达植物的赤霉病抗性第96-97页
5 结论第97-98页
参考文献第98-116页
附录第116-118页
致谢第118-119页
攻读博士期间发表论文情况第119页

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