| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-18页 |
| ·肝癌的现状 | 第11-12页 |
| ·全基因组测序简介 | 第12-13页 |
| ·全外显子组测序简介 | 第13-16页 |
| ·外显子测序在揭示基因遗传变异中的应用 | 第16页 |
| ·本实验研究背景 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-31页 |
| ·试验材料和试剂 | 第18-20页 |
| ·试验仪器 | 第18-19页 |
| ·生化试剂 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-31页 |
| ·细胞培养 | 第20-21页 |
| ·细胞冻存、复苏及传代 | 第21页 |
| ·肝癌组织标本的获得与处理 | 第21页 |
| ·组织DNA提取 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增 | 第22页 |
| ·文库构建,外显子捕获及测序 | 第22-23页 |
| ·测序数据分析 | 第23页 |
| ·基于PCR反应的Sanger测序 | 第23页 |
| ·RNA干扰筛选 | 第23-25页 |
| ·质粒转染及克隆形成 | 第25页 |
| ·细胞裂解及蛋白定量 | 第25页 |
| ·蛋白印迹(Western Blot) | 第25-27页 |
| ·transwell实验 | 第27页 |
| ·细胞RNA抽提 | 第27页 |
| ·组织RNA抽提 | 第27-28页 |
| ·半定量PCR | 第28-29页 |
| ·实时定量PCR | 第29页 |
| ·软琼脂克隆形成实验 | 第29-30页 |
| ·细胞凋亡分析 | 第30-31页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第31-66页 |
| ·实验室前期研究发现的体细胞突变进行分析 | 第31-33页 |
| ·Sanger测序法对381个候选突变进行验证 | 第33-35页 |
| ·PVTT中的体细胞突变 | 第35-43页 |
| ·突变基因所参与的信号通路 | 第43-47页 |
| ·肝细胞癌形成的潜在驱动基因 | 第47-54页 |
| ·重要基因在肝细胞癌中作用的研究 | 第54-58页 |
| ·TMEM35基因表达对肝癌细胞生长及细胞周期的影响 | 第58-64页 |
| ·人TMEM35基因编码四跨膜蛋白 | 第59页 |
| ·TMEM35在肝癌病例中表达紊乱 | 第59-60页 |
| ·RNA干扰TMEM35基因表达抑制肝癌细胞生长 | 第60-61页 |
| ·RNA干扰TMEM35基因表达影响细胞周期 | 第61-62页 |
| ·TMEM35蛋白预测的功能搭档 | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71页 |