| 个人简历 | 第1-6页 |
| 英文缩略语表 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 引言 | 第12-19页 |
| 第一章 鸟分枝杆菌二元调控系统PhoP基因的克隆与分析 | 第19-24页 |
| 1 材料与方法 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-20页 |
| 2 结果 | 第20-24页 |
| ·目的基因的克隆和重组载体的构建 | 第20-21页 |
| ·测序结果 | 第21-22页 |
| ·PhoP基因氨基酸序列比对与系统进化树的构建 | 第22-24页 |
| 第二章 鸟分枝杆菌PhoP DNA结合区的克隆及表达 | 第24-44页 |
| 1 实验材料 | 第24-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·特异引物 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-35页 |
| ·感受态制备的工作 | 第27-28页 |
| ·pGEX-4T-3扩增及其产物回收 | 第28-30页 |
| ·PCR扩增及其产物回收 | 第30-31页 |
| ·连接反应 | 第31页 |
| ·重组表达质粒的获得 | 第31-32页 |
| ·重组质粒双酶切与PCR验证 | 第32-33页 |
| ·表达重组菌的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE检测蛋白纯化 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-44页 |
| ·PhoPC基因的克隆及序列测定 | 第35-38页 |
| ·细菌表达载体的构建与签定 | 第38-40页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)的转化与鉴定 | 第40-41页 |
| ·pGEX-4T-3/PhoPC的表达与纯化 | 第41-44页 |
| 第三章 鸟分枝杆菌PhoP功能的初步及分析 | 第44-49页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-46页 |
| 2 实验结果 | 第46-49页 |
| ·PCR扩增反应 | 第46-47页 |
| ·凝胶迁移率移动实验(EMSA) | 第47-49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 结论与展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 课题综述 | 第60-67页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 附件 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69页 |