缩略词表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1 流感病毒免疫防御研究进展 | 第13-18页 |
·流感病毒概述 | 第13-14页 |
·流感病毒感染过程中的免疫防御机制 | 第14-18页 |
·流感病毒感染的天然免疫防御 | 第15-16页 |
·流感病毒感染的获得性免疫防御 | 第16-18页 |
2 Itk 信号转导通路研究进展 | 第18-21页 |
·Itk 信号转导通路 | 第18-20页 |
·Itk 分子的基本结构 | 第19页 |
·Itk 活化 TCR 下游信号 | 第19-20页 |
·Itk 信号转导通路对 T 细胞功能的影响 | 第20-21页 |
3 研究目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 实验研究 | 第23-82页 |
引言 | 第23-24页 |
1 材料与方法 | 第24-45页 |
·材料 | 第24-27页 |
·菌株、细胞株及病毒株 | 第24页 |
·实验动物和鸡胚 | 第24页 |
·质粒 | 第24-25页 |
·引物序列及 shRNA 干扰序列 | 第25-26页 |
·实验主要试剂 | 第26-27页 |
·主要实验仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-45页 |
·重组流感病毒的增殖培养及毒力测定[108] | 第27-29页 |
·流感病毒感染 BALB/c 小鼠病理组织切片的制备 | 第29页 |
·淋巴细胞分离实验 | 第29-30页 |
·细胞凋亡分析 | 第30-31页 |
·流式细胞分析及细胞分选 | 第31页 |
·细胞培养及转染 | 第31-33页 |
·质粒构建 | 第33-37页 |
·定点突变 | 第37-38页 |
·Itk 基因沉默细胞系的构建[110] | 第38-40页 |
·流感病毒感染细胞实验 | 第40页 |
·Real-time PCR | 第40-42页 |
·质膜分离实验[110] | 第42-43页 |
·蛋白免疫印迹(Western blot) | 第43-44页 |
·免疫荧光实验(Confocal) | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-79页 |
·甲型流感病毒 A/WSN/33(H1N1)的培养及毒力的测定 | 第45-47页 |
·甲型流感病毒 A/WSN/33(H1N1)的扩增及血凝价的测定 | 第45页 |
·甲型流感病毒感染 MDCK 细胞的空斑测定 | 第45-46页 |
·甲型流感病毒 A/WSN/33(H5N1)对 BALB/C 小鼠毒力的测定 | 第46-47页 |
·甲型流感病毒感染 BALB/c 小鼠后,导致小鼠脾脏和胸腺组织结构的破坏 | 第47-53页 |
·甲型流感病毒感染 BALB/c 小鼠的临床表现和大体病变 | 第47-50页 |
·甲型流感病毒感染 BALB/c 小鼠脾脏和胸腺的病理组织学变化 | 第50-53页 |
·甲型流感病毒感染 BALB/c 小鼠后,实验发现小鼠体内有一群 T 淋巴细胞对甲型流感病毒具有易感性 | 第53-63页 |
·Western blot 及细胞免疫荧光检测病毒感染小鼠淋巴细胞内的流感病毒 | 第53-55页 |
·细胞免疫荧光检测病毒感染小鼠 CD3+ T 淋巴细胞内的流感病毒 | 第55-57页 |
·细胞免疫荧光检测病毒感染小鼠 CD3+ T 淋巴细胞表面的流感病毒α-2,6唾液酸受体 | 第57-58页 |
·流感病毒感染淋巴细胞的凋亡分析 | 第58-60页 |
·流式细胞术检测病毒感染小鼠 CD4+和 CD8+T 淋巴细胞中的流感病毒 | 第60-63页 |
·通过体外实验发现,甲型流感病毒能够感染原代 T 细胞和 Jurkat T 细胞 | 第63-69页 |
·Western blot 及细胞免疫荧光检测小鼠原代 CD3+ T 细胞内的流感病毒. | 第63-65页 |
·流式细胞术检测小鼠原代 CD4+和 CD8+T 淋巴细胞中的流感病毒 | 第65-67页 |
·甲型流感病毒感染 Jurkat T 细胞中流感病毒的检测 | 第67-69页 |
·甲型流感病毒感染 Jurkat T 细胞能够影响 Itk 在细胞内的表达和定位 | 第69-72页 |
·Real-time PCR 检测甲型流感病毒感染 Jurkat T 细胞中 Itk 的表达情况 | 第69-70页 |
·细胞免疫荧光及 Western blot 检测甲型流感病毒感染 Jurkat T 细胞中 Itk 的定位情况 | 第70-72页 |
·在甲型流感病毒感染的 Jurkat T 细胞中,PLC-γ1 磷酸化水平的上调是 Itk 依赖性的 | 第72-75页 |
·甲型流感病毒感染 Jurkat T 细胞中,PLC-γ1 磷酸化水平上调 | 第72页 |
·Itk 干扰细胞系的构建 | 第72-74页 |
·Itk 分子的缺失对甲型流感病毒感染 Jurkat T 细胞中,PLC-γ1 磷酸化的影响 | 第74-75页 |
·在 JurkatT 细胞中干扰 Itk,将抑制流感病毒在细胞中的复制 | 第75-79页 |
·在 JurkatT 细胞中干扰 Itk 对流感病毒复制的影响 | 第75-77页 |
·干扰 Itk 影响流感病毒复制的验证实验 | 第77-79页 |
3 总结与讨论 | 第79-82页 |
参考文献 | 第82-94页 |
附录 | 第94-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
博士期间发表的论文 | 第98页 |