| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 一、前言 | 第11-12页 |
| 二、立题依据 | 第12-15页 |
| 1 中医体质研究 | 第12-13页 |
| ·中医体质学的概述 | 第12页 |
| ·中医体质学的应用 | 第12-13页 |
| 2 NONFH 的中医研究 | 第13页 |
| 3 痰湿体质与 NONFH 的联系及意义 | 第13-14页 |
| 4 NONFH 痰湿体质与基因多态性的研究及意义 | 第14-15页 |
| 三、材料与方法 | 第15-20页 |
| 1 病例资料 | 第15页 |
| 2 诊断及纳入标准 | 第15-16页 |
| ·西医诊断标准 | 第15页 |
| ·中医诊断标准 | 第15页 |
| ·纳入标准 | 第15页 |
| ·排除标准 | 第15页 |
| ·病例剔除和脱落标准 | 第15-16页 |
| 3 中医体质分类及判定标准 | 第16页 |
| 4 研究方法 | 第16页 |
| ·调查方法 | 第16页 |
| ·血液标本采集 | 第16页 |
| ·体质判定方法 | 第16页 |
| 5 资料处理与分组 | 第16-17页 |
| ·建立病例数据库 | 第16-17页 |
| ·病例分组 | 第17页 |
| 6 实验方法 | 第17页 |
| 7 分子生物学试剂与仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| 8 统计 | 第18-19页 |
| 9 技术路线图 | 第19-20页 |
| 四、分子生物学实验研究 | 第20-26页 |
| 1 血液基因组 DNA 提取 | 第20-21页 |
| ·血液基因组 DNA 提取 | 第20页 |
| ·操作步骤 | 第20-21页 |
| ·DNA 提取物检测 | 第21页 |
| ·DNA 所得率及纯度测定 | 第21页 |
| ·DNA 储存 | 第21页 |
| 2 NONFH 目标基因 SNP 位点选择 | 第21-22页 |
| 3 SREBPS 基因位点相应序列引物设计及合成 | 第22页 |
| ·引物设计与合成 | 第22页 |
| ·引物的配置 | 第22页 |
| ·引物验证 | 第22页 |
| 4 目的基因序列的 PCR 扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR 反应体系 | 第22-23页 |
| ·PCR 反应条件 | 第23页 |
| ·PCR 扩增产物验证 | 第23页 |
| 5 琼脂糖水平平板凝胶电泳实验 | 第23-25页 |
| ·胶液的制备 | 第23页 |
| ·胶板的制备 | 第23页 |
| ·电泳缓冲液 | 第23页 |
| ·加样 | 第23-24页 |
| ·电泳 | 第24页 |
| ·观察和拍照 | 第24-25页 |
| 6 PCR 扩增产物纯化 | 第25页 |
| ·PCR 反应液纯化 DNA 片段的试剂盒组成 | 第25页 |
| ·操作步骤 | 第25页 |
| 7 PCR 纯化产物测序分析 | 第25-26页 |
| ·测序引物的设计 | 第25页 |
| ·PCR 纯化产物测序 | 第25-26页 |
| 五、结果 | 第26-38页 |
| 1 临床资料结果 | 第26-27页 |
| ·性别与 NONFH 相关性分析 | 第26页 |
| ·NONFH 实验室检查分析结果 | 第26-27页 |
| 2 分子生物学实验研究结果 | 第27-38页 |
| ·基因组 DNA 提取结果 | 第27页 |
| ·SREBP-2、SREBP-1C 基因位点相应序列的 PCR 扩增结果 | 第27-28页 |
| ·基因测序结果 | 第28-30页 |
| ·SREBP-2 基因 SNP 位点测序结果 | 第28-29页 |
| ·SREBP-1C 基因 SNP 位点测序结果 | 第29-30页 |
| ·SREBPS 基因 SNP 位点实验结果统计分析 | 第30-38页 |
| ·SREBP-2 基因 RS2267439 SNP 位点实验结果 | 第30-35页 |
| ·SREBP-1C 基因 RS2297508 SNP 位点实验结果 | 第35-38页 |
| 六、讨论 | 第38-44页 |
| 1 脂类代谢紊乱学说与 NONFH 发生机制 | 第38页 |
| 2 中医体质与 NONFH 的联系及意义 | 第38-39页 |
| 3 NONFH 及中医体质与 SREBPS 基因多态性的相关性 | 第39-44页 |
| ·NONFH 及中医体质与 SREBP-2 基因多态性的相关性 | 第39-41页 |
| ·NONFH 与 SNP 位点基因型的相关性 | 第40页 |
| ·NONFH 与 SNP 位点等位基因的相关性 | 第40页 |
| ·NONFH 平和质与痰湿质的 SNP 位点基因型的相关性 | 第40页 |
| ·NONFH 平和质与痰湿质的 SNP 位点等位基因的相关性 | 第40页 |
| ·NONFH 平和质及痰湿质与健康对照组基因型的相关性 | 第40-41页 |
| ·NONFH 平和质及痰湿质与健康对照组等位基因的相关性 | 第41页 |
| ·NONFH 与 SREBP-1C 基因 RS2297508 位点基因多态性的相关性 | 第41-42页 |
| ·NONFH 与 SNP 位点基因型的相关性 | 第42页 |
| ·NONFH 与 SNP 位点等位基因的相关性 | 第42页 |
| ·NONFH 平和质与痰湿质的 SNP 位点基因型的相关性 | 第42页 |
| ·NONFH 平和质与痰湿质的 SNP 位点等位基因的相关性 | 第42页 |
| ·NONFH 平和质及痰湿质与健康对照组基因型的相关性 | 第42页 |
| ·NONFH 平和质及痰湿质与健康对照组等位基因的相关性 | 第42页 |
| ·NONFH 与 SREBP-1C 基因 RS13306739 SNP 位点基因型的相关性 | 第42-44页 |
| 七、结语 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 八、综述 | 第47-55页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-91页 |
| 附录 1 伦理审查表 | 第56-57页 |
| 附录 2 病例调查材料证明 | 第57-58页 |
| 附录 3 兰州军区总医院实验场地证明 | 第58-59页 |
| 附录 4 SREBPS 基因库查询 SNP 序列 | 第59-60页 |
| 附录 5 非创伤性股骨头坏死中医体质类型及相关基因多态性研究病例调查表 | 第60-88页 |
| 附录 6 实验、临床瞬间生活集锦 | 第88-91页 |
| 附录 7 在校期间学习情况 | 第91页 |
