| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-21页 |
| 一、胃癌的分子靶向治疗 | 第9页 |
| 二、NRPs 的简介 | 第9页 |
| 三、NRP-1 的结构 | 第9-11页 |
| 四、NRP-1 的配体 | 第11-12页 |
| 1.VEGFs | 第11-12页 |
| 2.SEMA 家族 | 第12页 |
| 五、NRP-1 的共受体 | 第12-15页 |
| 1.Plexins | 第12-13页 |
| 2.EGFR | 第13页 |
| 3. c-met | 第13-14页 |
| 4. TGFR | 第14页 |
| 5.整合素 | 第14-15页 |
| 六、NRP-1 的作用 | 第15-19页 |
| 1 NRP-1 与肿瘤 | 第15-17页 |
| ·NRP‐1 与肿瘤血管 | 第15-16页 |
| ·NRP‐1 与肿瘤干细胞 | 第16-17页 |
| ·NRP‐1 与肿瘤预后 | 第17页 |
| 2 NRP-1 与免疫 | 第17-19页 |
| ·NRP‐1 与胸腺细胞分化 | 第17页 |
| ·NRP‐1 与免疫效应 | 第17-18页 |
| ·NRP‐1 与免疫疾病 | 第18-19页 |
| 七、展望 | 第19-20页 |
| 八、本实验研究的内容与目的 | 第20-21页 |
| 第一章 NRP-1 b1b2 的表达、纯化及复性 | 第21-34页 |
| 一、材料与方法 | 第21-27页 |
| 1.材料 | 第21-27页 |
| ·菌株及质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第21页 |
| ·主要仪器及设备 | 第21-22页 |
| ·主要溶液及试剂 | 第22-27页 |
| 二、方法 | 第27-31页 |
| ·NRP-1 蛋白生产流程图 | 第27页 |
| ·质粒提取 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的转化 | 第28页 |
| ·NRP-1 b1b2 融合蛋白的表达 | 第28-29页 |
| ·NRP-1 b1b2 融合蛋白的纯化及复性 | 第29-31页 |
| 三、结果与分析 | 第31-32页 |
| ·NRP-1 b1b2 蛋白的表达、纯化及复性 | 第31-32页 |
| ·NRP-1 b1b2 蛋白的浓度测定 | 第32页 |
| 四、讨论 | 第32-34页 |
| ·目的蛋白的表达形式 | 第32-33页 |
| ·目的蛋白的复性 | 第33-34页 |
| 第二章 抗 NRP-1 b1b2 单克隆抗体的纯化及鉴定 | 第34-48页 |
| 一、材料与方法 | 第34-39页 |
| 1.材料 | 第34-39页 |
| ·抗体及细胞 | 第34页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第34-35页 |
| ·主要仪器及设备 | 第35页 |
| ·主要溶液的配制 | 第35-39页 |
| 二、方法 | 第39-42页 |
| ·抗体的纯化 | 第39页 |
| ·抗体透析及冻干 | 第39-40页 |
| ·抗体 SDS-PAGE 分析 | 第40-41页 |
| ·抗体滴度分析 | 第41页 |
| ·流式细胞分析 | 第41-42页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第42页 |
| 三、结果分析 | 第42-46页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第42-43页 |
| ·ELISA 监测抗体效价 | 第43-44页 |
| ·流式细胞术分析 | 第44-45页 |
| ·细胞免疫荧光分析 | 第45-46页 |
| 四、讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 抗 NRP-1 b1b2 单克隆抗体抑制胃癌细胞增殖、迁移的研究 | 第48-55页 |
| 一、材料 | 第48-49页 |
| 1.材料 | 第48-49页 |
| ·抗体与细胞 | 第48页 |
| ·主要设备与耗材 | 第48-49页 |
| ·主要溶液的配置 | 第49页 |
| 二、实验方法 | 第49-50页 |
| ·细胞培养 | 第49页 |
| ·MTT 实验（细胞增殖抑制实验） | 第49页 |
| ·细胞划痕实验 | 第49-50页 |
| 三、实验结果 | 第50-53页 |
| ·细胞增殖抑制实验 | 第50-52页 |
| ·抗 NRP-1 抗体抑制细胞迁移 | 第52-53页 |
| 四、讨论 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55页 |
| 本文存在的问题及今后应开展的研究 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 综述 | 第62-67页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |