| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·前言 | 第10页 |
| ·RNA 反转录转座子 | 第10-13页 |
| ·non-LTRs 转座子的结构与分类 | 第10-11页 |
| ·LTR 转座子的结构与分类 | 第11-12页 |
| ·LTR 转座子的转座机制 | 第12-13页 |
| ·活性 LTR 转座子的研究 | 第13-16页 |
| ·活性转座子的发现 | 第13页 |
| ·转座子的插入偏好性 | 第13-14页 |
| ·转座子活性的影响因素 | 第14-15页 |
| ·转座子的应用 | 第15-16页 |
| ·基因标签 | 第15页 |
| ·插入型突变及基因功能的分析 | 第15页 |
| ·进化时间分析 | 第15-16页 |
| ·研究目的与意义 | 第16-17页 |
| ·技术路线图 | 第17-18页 |
| 第二章 菲白竹、龟甲竹及毛竹中 LINEs 的克隆与进化分析 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·材料与菌种及质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·克隆引物设计 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·提取植物材料 DNA | 第19-20页 |
| ·LINEs 的扩增 | 第20-21页 |
| ·PCR 产物回收 | 第21页 |
| ·回收产物与载体连接 | 第21页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第21-22页 |
| ·连接产物转化及阳性克隆筛选 | 第22-23页 |
| ·菌检及测序 | 第23页 |
| ·基因序列分析 | 第23页 |
| ·实验结果 | 第23-29页 |
| ·菲白竹、龟甲竹及毛竹的 DNA 提取 | 第23-24页 |
| ·LINEs 的 PCR 扩增 | 第24页 |
| ·LINEs 基因序列比对 | 第24-29页 |
| ·LINEs 序列比对 | 第24-25页 |
| ·LINEs 氨基酸比对及系统进化树分析 | 第25-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 毛竹全长 LTR 转座子的克隆、鉴定及系统进化分析 | 第30-42页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·材料与菌株及质粒 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·基因克隆引物设计 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·提取植物材料 DNA | 第31页 |
| ·毛竹 Ph-LTR1 转座子的获得 | 第31-32页 |
| ·Ph-LTR1 转座子序列生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·开放阅读框与氨基酸序列 | 第32页 |
| ·毛竹中 Ph-LTR1 同源序列分析 | 第32-33页 |
| ·实验结果 | 第33-39页 |
| ·毛竹 DNA 的提取 | 第33页 |
| ·Ph-LTR1 全长 PCR 扩增 | 第33-34页 |
| ·基因的序列分析 | 第34-39页 |
| ·Ph-LTR1 转座子序列结构分析 | 第34-36页 |
| ·Ph-LTR1 的 LTR 序列分析 | 第36-37页 |
| ·Ph-LTR1 家族序列结构分析 | 第37-38页 |
| ·Ph-LTR1 家族元件插入时间的估算 | 第38-39页 |
| ·Ph-LTR1 家族元件在基因组分布 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 植物表达载体的构建及遗传转化拟南芥 | 第42-58页 |
| ·实验材料 | 第42-44页 |
| ·材料与菌种及质粒 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·引物设计 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-52页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·质粒的提取 | 第44-45页 |
| ·pMD20-LTR1 及 pC1301 质粒酶切 | 第45页 |
| ·酶切产物的连接 | 第45页 |
| ·连接产物转化及阳性克隆筛选验证 | 第45-46页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌及阳性克隆筛选 | 第46-47页 |
| ·电击法农杆菌感受态的制备 | 第46页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第46-47页 |
| ·农杆菌菌液提取质粒及 PCR 验证 | 第47页 |
| ·拟南芥遗传转化 | 第47-48页 |
| ·野生型拟南芥的栽培 | 第47-48页 |
| ·浸花法介导拟南芥的遗传转化 | 第48页 |
| ·转基因种子的筛选 | 第48页 |
| ·拟南芥再生植株的验证 | 第48-51页 |
| ·再生植株 PCR 验证 | 第48-49页 |
| ·再生植株转录水平验证 | 第49-51页 |
| ·提取总 RNA | 第49-50页 |
| ·反转录成 cDNA | 第50页 |
| ·cDNA 的 PCR 检测 | 第50-51页 |
| ·转基因植株纯合子的获得 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-57页 |
| ·植物表达载体 pC1301-LTR1 的构建 | 第52-53页 |
| ·转基因再生植株筛选 | 第53-54页 |
| ·潮霉素筛选 | 第53-54页 |
| ·GUS 验证 | 第54页 |
| ·PCR 鉴定 | 第54-56页 |
| ·DNA 水平 PCR 验证 | 第54-55页 |
| ·cDNA 水平 PCR 验证 | 第55-56页 |
| ·转基因拟南芥表型观察 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 个人简介 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
