| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| ·问题的提出 | 第12-13页 |
| ·影响植物从营养生长向生殖发育转变的因素 | 第13-15页 |
| ·影响成花的因素 | 第13-15页 |
| ·温度和光照诱导 | 第14页 |
| ·植物营养代谢作用 | 第14页 |
| ·植物生长调节剂 | 第14-15页 |
| ·植物生殖发育转变的促进途径 | 第15-20页 |
| ·光周期途径(photoperiodic pathway)促进成花转变的研究 | 第15-17页 |
| ·春化途径(vernalization pathway)促进成花转变的研究 | 第17-18页 |
| ·自主途径(autonomous pathway)促进成花转变的研究 | 第18-19页 |
| ·赤霉素途径(Gibberellin,GA pathway)促进成花转变的研究 | 第19-20页 |
| ·促进植物成花转变的基因研究 | 第20-27页 |
| ·成花相关基因的研究 | 第21-22页 |
| ·FT/TFL1/MFT基因家族 | 第22-24页 |
| ·早花基因FT的功能 | 第24-26页 |
| ·FT基因的研究发展史 | 第24-25页 |
| ·本实验对FT基因的研究 | 第25-26页 |
| ·TFL1基因的功能研究 | 第26-27页 |
| ·MFT基因的功能研究 | 第27页 |
| ·本实验研究的内容和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-44页 |
| ·实验材料 | 第28-31页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·农杆菌材料 | 第28页 |
| ·质粒材料 | 第28-30页 |
| ·实验主要试剂和引物 | 第30-31页 |
| ·实验用各种培养基的配方 | 第31页 |
| ·烟草培养基配方 | 第31页 |
| ·草莓培养基配方 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-44页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第31-32页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·载体构建 | 第33-37页 |
| ·载体构建的引物设计 | 第33页 |
| ·质粒载体pBI121酶切 | 第33-34页 |
| ·目的基因片段PtFT的酶切 | 第34页 |
| ·酶切产物的回收 | 第34-35页 |
| ·pBI121载体和PtFT基因片段的链接 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态转化 | 第35-36页 |
| ·转化后产物的PCR检测 | 第36页 |
| ·转化产物PCR检测后的测序 | 第36页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·农杆菌感受态转化 | 第37页 |
| ·对转化农杆菌感受态后的菌液进行阳性检测 | 第37页 |
| ·预转化外植体材料的制备 | 第37页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第37-38页 |
| ·农杆菌侵染菌液的制备方法 | 第37页 |
| ·烟草外植体的准备 | 第37-38页 |
| ·烟草叶片侵染与共培养 | 第38页 |
| ·转化后烟草叶片筛选及生根培养 | 第38页 |
| ·转基因烟草苗的初步分子生物学检测 | 第38-40页 |
| ·转基因烟草基因组DNA提取 | 第38-39页 |
| ·转基因烟草材料的PCR鉴定 | 第39-40页 |
| ·转基因烟草的移栽 | 第40页 |
| ·转基因烟草的转录水平检测 | 第40-41页 |
| ·烟草基因组RNA的提取 | 第40-41页 |
| ·烟草基因组RNA质量检测 | 第41-42页 |
| ·提取RNA的纯化 | 第42页 |
| ·RNA的反转录 | 第42页 |
| ·反转录产物的PCR检测 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的草莓转化 | 第42-43页 |
| ·草莓外植体的准备 | 第42页 |
| ·草莓叶片侵染与共培养 | 第42-43页 |
| ·转化后草莓苗筛选及生根培养 | 第43页 |
| ·草莓基因DNA的提取与目的基因检测 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-59页 |
| ·PtFTl、PtFT2和PtFT3的序列分析 | 第44-46页 |
| ·PtFT的保守性分析 | 第44-45页 |
| ·PtFT的全序列分析 | 第45页 |
| ·PtFT1、PtFT2和PtFT3序列差异性分析 | 第45-46页 |
| ·PtFT1、PtFT2和PtFT3转化烟草和转化材料分子鉴定 | 第46-53页 |
| ·烟草转农杆菌目的基因的分化生长过程 | 第46页 |
| ·烟草农杆菌转PtFT系列基因植株的阳性率PCR检测 | 第46-48页 |
| ·烟草转农杆菌目的基因叶片的RNA检测 | 第48页 |
| ·烟草转农杆菌目的基因的反转录PCR检测 | 第48-50页 |
| ·转基因烟草的表型分析 | 第50页 |
| ·转基因烟草的表型差异性分析 | 第50-53页 |
| ·PBI121载体构建 | 第53-55页 |
| ·pBI121载体构建的载体及其目的基因的酶切 | 第53页 |
| ·pBI121载体构建的大肠杆菌目的基因PCR检测 | 第53-54页 |
| ·pBI121载体构建的农杆菌目的基因PCR检测 | 第54-55页 |
| ·草莓无菌体系及其转化体系的建立 | 第55-59页 |
| ·草莓无菌体系的建立 | 第55-56页 |
| ·草莓农杆菌转化体系的建立 | 第56-59页 |
| ·用于农杆菌转基因的草莓品种选取 | 第56-57页 |
| ·草莓分化培养基的优化 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| ·PtFT在进化上高度保守 | 第59页 |
| ·PtFT1/PtFT2/PtFT3转基因烟草的表型变化 | 第59-60页 |
| ·PtFT冗余片段的功能分析 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 附录 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
