摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-10页 |
英文缩写词 | 第10-11页 |
前言 | 第11-29页 |
一、 细胞迁移的概述 | 第11页 |
二、 黏附受体介导的细胞迁移过程 | 第11-14页 |
三、 白细胞的迁移过程 | 第14-16页 |
四、 细胞黏附分子与白细胞迁移 | 第16-18页 |
五、 c-Abl 激酶概述 | 第18-24页 |
(一) c-Abl 的基本结构 | 第18-20页 |
(二) c-Abl 激酶的生理功能及骨架调节机制 | 第20-23页 |
(三) c-Abl 激酶的抑制剂 | 第23-24页 |
六、 鸟苷酸交换因子 Vav1 概述 | 第24-28页 |
(一) Rho GTP 酶家族与细胞骨架调控 | 第24-25页 |
(二) Vav 鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)家族 | 第25-26页 |
(三) Vav1 的活性调节 | 第26-27页 |
(四) Vav1 的功能 | 第27-28页 |
七、 本论文的研究目的和意义 | 第28-29页 |
实验材料与方法 | 第29-41页 |
一、 实验材料 | 第29-33页 |
(一) 菌株、细胞、质粒、抗体及主要试剂 | 第29-30页 |
(二) 主要仪器 | 第30页 |
(三) 溶液配制 | 第30-33页 |
二、 实验方法 | 第33-41页 |
(一) 中性粒细胞的分离 | 第33页 |
(二) HL-60 细胞的中性粒细胞样分化 | 第33页 |
(三) 小鼠急性腹腔炎实验 | 第33-34页 |
(四) Transwell 迁移模型 | 第34页 |
(五) 琼脂糖悬滴迁移模型 | 第34页 |
(六) F-actin 含量分析 | 第34-35页 |
(七) 流式细胞术 | 第35页 |
(八) Zigmond 小室细胞迁移分析 | 第35页 |
(九) 免疫荧光双标 | 第35-36页 |
(十) 引物设计 | 第36页 |
(十一)PCR产物酶切 | 第36-37页 |
(十二)琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
(十三)切胶回收DNA片段 | 第37页 |
(十四)质粒的小量抽提 | 第37-38页 |
(十五)GST融合蛋白原核表达 | 第38页 |
(十六)GST融合蛋白纯化 | 第38-39页 |
(十七)GST pull-down 实验 | 第39页 |
(十八)免疫印记 | 第39页 |
(十九)免疫沉淀及体外激酶反应实验 | 第39-40页 |
(二十)数据分析 | 第40-41页 |
实验结果与分析 | 第41-60页 |
一、 中性粒细胞向炎症部位募集与体外迁移依赖 c-Abl 激酶活性 | 第41-43页 |
二、 c-Abl激酶对β2整联蛋白介导的中性粒细胞迁移行为的影响 | 第43-44页 |
三、 中性粒细胞膜的外伸和β2整联蛋白介导的actin聚合依赖c-Abl激酶活性 | 第44-47页 |
(一) 中性粒细胞前缘的伸出依赖 c-Abl 激酶活性 | 第44-46页 |
(二) c-Abl激酶参与调节β2整联蛋白依赖的actin聚合 | 第46-47页 |
四、 c-Abl 激酶的活化依赖β2整联蛋白与配体交联 | 第47-51页 |
五、 c-Abl激酶与Vav1相互作用并被募集到迁移细胞的前缘 | 第51-55页 |
六、 Vav1 是 c-Abl 激酶下游重要效应分子 | 第55-60页 |
讨论 | 第60-64页 |
一、 c-Abl 激酶参与调控β2 整联蛋白介导的中性粒细胞迁移 | 第60-61页 |
二、 Vav1是c-Abl激酶调控中性粒细胞迁移进程中的重要下游效应分子 | 第61-64页 |
主要结论和创新点 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
攻读博士学位期间发表文章 | 第82页 |