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c-Abl激酶参与调控β2整联蛋白介导的中性粒细胞迁移的机制研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
英文缩写词第10-11页
前言第11-29页
 一、 细胞迁移的概述第11页
 二、 黏附受体介导的细胞迁移过程第11-14页
 三、 白细胞的迁移过程第14-16页
 四、 细胞黏附分子与白细胞迁移第16-18页
 五、 c-Abl 激酶概述第18-24页
  (一) c-Abl 的基本结构第18-20页
  (二) c-Abl 激酶的生理功能及骨架调节机制第20-23页
  (三) c-Abl 激酶的抑制剂第23-24页
 六、 鸟苷酸交换因子 Vav1 概述第24-28页
  (一) Rho GTP 酶家族与细胞骨架调控第24-25页
  (二) Vav 鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)家族第25-26页
  (三) Vav1 的活性调节第26-27页
  (四) Vav1 的功能第27-28页
 七、 本论文的研究目的和意义第28-29页
实验材料与方法第29-41页
 一、 实验材料第29-33页
  (一) 菌株、细胞、质粒、抗体及主要试剂第29-30页
  (二) 主要仪器第30页
  (三) 溶液配制第30-33页
 二、 实验方法第33-41页
  (一) 中性粒细胞的分离第33页
  (二) HL-60 细胞的中性粒细胞样分化第33页
  (三) 小鼠急性腹腔炎实验第33-34页
  (四) Transwell 迁移模型第34页
  (五) 琼脂糖悬滴迁移模型第34页
  (六) F-actin 含量分析第34-35页
  (七) 流式细胞术第35页
  (八) Zigmond 小室细胞迁移分析第35页
  (九) 免疫荧光双标第35-36页
  (十) 引物设计第36页
  (十一)PCR产物酶切第36-37页
  (十二)琼脂糖凝胶电泳第37页
  (十三)切胶回收DNA片段第37页
  (十四)质粒的小量抽提第37-38页
  (十五)GST融合蛋白原核表达第38页
  (十六)GST融合蛋白纯化第38-39页
  (十七)GST pull-down 实验第39页
  (十八)免疫印记第39页
  (十九)免疫沉淀及体外激酶反应实验第39-40页
  (二十)数据分析第40-41页
实验结果与分析第41-60页
 一、 中性粒细胞向炎症部位募集与体外迁移依赖 c-Abl 激酶活性第41-43页
 二、 c-Abl激酶对β2整联蛋白介导的中性粒细胞迁移行为的影响第43-44页
 三、 中性粒细胞膜的外伸和β2整联蛋白介导的actin聚合依赖c-Abl激酶活性第44-47页
  (一) 中性粒细胞前缘的伸出依赖 c-Abl 激酶活性第44-46页
  (二) c-Abl激酶参与调节β2整联蛋白依赖的actin聚合第46-47页
 四、 c-Abl 激酶的活化依赖β2整联蛋白与配体交联第47-51页
 五、 c-Abl激酶与Vav1相互作用并被募集到迁移细胞的前缘第51-55页
 六、 Vav1 是 c-Abl 激酶下游重要效应分子第55-60页
讨论第60-64页
 一、 c-Abl 激酶参与调控β2 整联蛋白介导的中性粒细胞迁移第60-61页
 二、 Vav1是c-Abl激酶调控中性粒细胞迁移进程中的重要下游效应分子第61-64页
主要结论和创新点第64-65页
参考文献第65-81页
致谢第81-82页
攻读博士学位期间发表文章第82页

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