| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 縮略词表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-18页 |
| ·鸡毒支原体的危害和防治 | 第13-14页 |
| ·鸡毒支原体的危害 | 第13-14页 |
| ·鸡毒支原体的防治 | 第14页 |
| ·pMGA1.2研究进展 | 第14-15页 |
| ·ApoA-I研究进展 | 第15-16页 |
| ·蛋白结构域 | 第16-17页 |
| ·研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-37页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·实验样本 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第19页 |
| ·主要溶液的配制 | 第19-21页 |
| ·实验方法 | 第21-37页 |
| ·生物信息学预测pMGA1.2的功能结构域 | 第21-22页 |
| ·pMGA1.2片段(1,2,3,4)的克隆 | 第22-26页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)原核表达质粒的构建 | 第26-28页 |
| ·KG-pMGA1.2-N(N=1,2)的诱导表达 | 第28页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白纯化 | 第28-29页 |
| ·表达产物的Western-blot检测 | 第29-30页 |
| ·病毒铺覆蛋白印迹(VOPBA)分析 | 第30页 |
| ·PG、PR、PG-AI、PR-AI菌液复苏 | 第30页 |
| ·PG、PR、PG-AI、PR-AI酶切分析 | 第30-31页 |
| ·pCDNA3.1-GFP/RFP-pMGA1.2-N(N=3,4)真核表达质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·去内毒素质粒的制备 | 第32-33页 |
| ·细胞培养及质粒转染 | 第33-35页 |
| ·转染后细胞状态和融合蛋白的观察 | 第35页 |
| ·流式细胞仪检测蛋白表达量 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-55页 |
| ·生物信息学预测pMGA1.2的功能结构域 | 第37页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2,3,4)的克隆 | 第37-41页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2,3,4)的扩增 | 第37-39页 |
| ·T-pMGA1.2-N(N=1,2,3,4)重组质粒的鉴定 | 第39-41页 |
| ·原核表达质粒KG-pMGA1.2-N(N=1,2)的构建 | 第41-43页 |
| ·原核表达质粒KG-pMGA1.2-N(N=1,2)的鉴定 | 第41-43页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白的诱导表达和纯化 | 第43-45页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白的诱导表达 | 第43-44页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白的免疫原性分析 | 第45-46页 |
| ·pMGA1.2-1蛋白的Western bolt检测 | 第45页 |
| ·pMGA1.2-2蛋白的Western bolt检测 | 第45-46页 |
| ·病毒铺覆蛋白印迹 | 第46页 |
| ·pMGA1.2-1的病毒铺覆蛋白印迹 | 第46页 |
| ·pMGA1.2-2的病毒铺覆蛋白印迹 | 第46页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第46-50页 |
| ·真核表达质粒PG,PR,PG-AI,PR-AI的鉴定 | 第46-47页 |
| ·真核表达质粒PG-3,PR-3的鉴定 | 第47-48页 |
| ·真核表达质粒PG-4,PR-4的鉴定 | 第48-50页 |
| ·真核表达质粒在Hela细胞中的表达 | 第50-51页 |
| ·流式细胞仪检测ApoA-I与pMGA1.2蛋白的表达量 | 第51-55页 |
| 4 讨论 | 第55-60页 |
| ·生物信息学预测功能结构域 | 第55页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2,3,4)的克隆 | 第55-56页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)原核表达质粒的构建 | 第56页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白的诱导表达和纯化 | 第56-57页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白的免疫原性分析 | 第57页 |
| ·pMGA1.2-N(N=1,2)蛋白的病毒铺覆蛋白印迹 | 第57-58页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第58页 |
| ·流式细胞仪检测ApoA-I与pMGA1.2蛋白的表达量 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
