囊状幼虫病毒在中华蜜蜂幼虫体内的增殖规律研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-19页 |
| 1 研究背景 | 第10-17页 |
| ·中华蜜蜂简介 | 第10页 |
| ·蜜蜂病害 | 第10-12页 |
| ·真菌性疾病 | 第10-11页 |
| ·细菌性疾病 | 第11-12页 |
| ·病毒性疾病 | 第12页 |
| ·囊状幼虫病毒病研究进展 | 第12-14页 |
| ·囊状幼虫病病原及病症 | 第12-13页 |
| ·传播方式 | 第13-14页 |
| ·预防措施 | 第14页 |
| ·检测方法 | 第14页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第14-17页 |
| ·实时荧光定量PCR基本原理 | 第14-15页 |
| ·荧光定量检测技术分类 | 第15-16页 |
| ·荧光探针 | 第15-16页 |
| ·荧光染料 | 第16页 |
| ·定量方法 | 第16-17页 |
| ·绝对定量法 | 第16页 |
| ·相对定量法 | 第16-17页 |
| ·荧光定量PCR应用 | 第17页 |
| 2 本研究的内容与意义 | 第17-19页 |
| 第二章 SBV检测分子标记的克隆 | 第19-31页 |
| 1 材料与方法 | 第19-26页 |
| ·材料与仪器 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·RNA提取 | 第20-21页 |
| ·cDNA合成(RNA反转录) | 第21-22页 |
| ·PCR反应 | 第22-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第22页 |
| ·PCR 反应 | 第22-23页 |
| ·目的基因克隆 | 第23-25页 |
| ·琼脂糖凝胶回收 | 第23页 |
| ·感受态细胞制备 | 第23-24页 |
| ·连接反应 | 第24页 |
| ·重组质粒的转化和重组子的筛选 | 第24页 |
| ·阳性质粒筛选 | 第24-25页 |
| ·SBV分子标记的验证 | 第25-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-29页 |
| ·PCR产物PAGE凝胶电泳结果 | 第26页 |
| ·SBV酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·SBV106测序与分析 | 第27-28页 |
| ·SBV分子标记应用性检测 | 第28-29页 |
| 3 结论与讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 荧光定量PCR检测方法的构建 | 第31-37页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·RNA提取与cDNA合成 | 第31页 |
| ·cDNA质量检验 | 第31-33页 |
| ·重组质粒浓度测定 | 第33页 |
| ·荧光定量标准曲线 | 第33-34页 |
| ·荧光定量灵敏度测定 | 第34-35页 |
| ·荧光定量熔解曲线 | 第35页 |
| 2 病虫体内病毒浓度测定 | 第35页 |
| 3 结论与讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 中华蜜蜂幼虫人工接种感染SBV | 第37-48页 |
| 1 材料与方法 | 第37-40页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-40页 |
| ·-80℃保存病毒侵染活性验证 | 第37-38页 |
| ·中华蜜蜂幼虫的人工饲养 | 第38页 |
| ·室内人工接种SBV | 第38-40页 |
| ·病毒接种 | 第38页 |
| ·病毒接种 | 第38-40页 |
| ·病毒增殖定量测定 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-46页 |
| ·-80℃保存SBV病毒具有侵染活性 | 第40-41页 |
| ·中蜂幼虫的人工饲养 | 第41-42页 |
| ·幼虫每日死亡情况记录 | 第42-43页 |
| ·cDNA质量检测 | 第43-44页 |
| ·病毒浓度测定 | 第44-46页 |
| 3 结论与讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 总结与讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
