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皮质酮对肉鸡骨骼发育影响机理的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词第11-12页
前言第12-13页
上篇 文献综述第13-45页
 第一章 皮质酮的来源及生理功能第13-25页
   ·皮质酮简介第13-15页
     ·皮质酮的理化性质第13页
     ·皮质酮的合成及衍生第13-14页
     ·皮质酮的代谢第14-15页
   ·皮质酮的功能第15-16页
   ·皮质酮信号通路第16-18页
   ·应激与皮质酮第18-19页
   ·禽类与皮质酮第19-20页
   ·小结第20-22页
  参考文献第22-25页
 第二章 长骨的生长发育及其调控第25-45页
   ·软骨内成骨的发育过程第25-30页
     ·软骨细胞第27页
     ·成骨细胞第27页
     ·破骨细胞第27-28页
     ·细胞外基质第28-30页
   ·生长板第30-32页
   ·生长板的调控第32-38页
     ·激素调控第32-35页
     ·局部调控第35-37页
     ·生物力学因素第37-38页
   ·小结第38-39页
  参考文献第39-45页
下篇 试验研究第45-91页
 第三章 皮质酮对肉鸡骨骼发育的影响第45-67页
  摘要第45-46页
  1 材料和方法第46-51页
   ·试验材料第46-47页
     ·主要仪器和设备第46页
     ·主要试剂第46-47页
   ·实验动物的饲养第47页
   ·样品采集第47页
   ·骨指数和骨长度的检测第47页
   ·骨放射密度的检测第47-48页
   ·骨强度的检测第48页
   ·石蜡切片的制备第48-50页
     ·载玻片防脱片处理第48页
     ·取样第48页
     ·脱水第48-49页
     ·透明第49页
     ·浸蜡与包埋第49页
     ·切片第49页
     ·组织切片常规脱蜡至水第49-50页
   ·组织切片的HE染色第50页
   ·免疫组织化学检测生长板X型胶原分布和表达第50-51页
  2 统计分析第51页
  3 结果与分析第51-59页
   ·体重、相对器官重和采食量变化第51页
   ·血浆钙、磷水平和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性变化第51-52页
   ·骨参数变化第52-54页
   ·生长板HE染色结果第54-56页
   ·X型胶原的免疫组织化学检测结果第56-59页
  4 讨论第59-61页
   ·皮质酮对体重和采食量的影响第59页
   ·皮质酮对相对器官重的影响第59页
   ·皮质酮对血浆骨钙代谢生化标志物和骨参数的影响第59-60页
   ·皮质酮对生长板发育和X型胶原表达的影响第60页
   ·小结第60-61页
  参考文献第61-65页
  ABSTRACT第65-67页
 第四章 皮质酮对体外培养的鸡生长板软骨细胞的影响第67-91页
  摘要第67-68页
  1 材料和方法第68-77页
   ·试验材料第68-69页
     ·主要仪器和设备第68页
     ·试验试剂第68-69页
     ·实验动物第69页
   ·软骨细胞的原代培养第69-70页
     ·培养基和试验药品的的准备第69-70页
     ·软骨细胞的分离与原代培养第70页
   ·噻唑蓝(Thiazolyl blue,MTT)法检测细胞活性第70-71页
   ·ALP活性的检测第71页
     ·二乙醇胺(DEA)缓冲液第71页
     ·pNp标准液第71页
     ·ALP活性检测方法第71页
   ·实时定量荧光PCR检测软骨细胞mRNA表达第71-74页
     ·总RNA的提取与纯化第71-72页
     ·样品cDNA的制备第72页
     ·引物设计与合成第72-73页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第73页
     ·2~(-△△C)_T法分析基因的相对表达量第73-74页
   ·蛋白免疫印迹(WB)检测软骨细胞蛋白表达第74-77页
     ·主要溶液的配制第74-75页
     ·细胞裂解液第75页
     ·BCA法蛋白测定第75-76页
     ·蛋白样品的处理第76页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳第76-77页
  2 统计与分析第77页
  3 结果与分析第77-82页
   ·软骨细胞增殖活性检测结果第77-78页
   ·ALP活性测定结果第78页
   ·PTHrP、Ihh、Runx2和X型胶原的mRNA表达变化第78页
   ·X型胶原的蛋白表达变化第78-82页
  4 讨论第82-83页
   ·CORT对软骨细胞增殖的影响第82页
   ·CORT对软骨细胞的ALP活性的影响第82-83页
   ·CORT对Ihh/PTHrP信号通路的影响第83页
   ·CORT对Runx2和X型胶原mRNA表达的影响第83页
  5 小结第83-85页
  参考文献第85-89页
  ABSTRACT第89-91页
全文总结第91-93页
本论文创新之处第93-95页
攻读硕士期间发表论文第95-97页
致谢第97页

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