摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
前言 | 第14-17页 |
第一章 ataxin-3磷酸化位点缺失突变体和拟磷酸化突变体真核表达质粒的构建 | 第17-38页 |
1. 材料与仪器 | 第17-20页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·主要试剂与耗材 | 第17-18页 |
·主要试剂的配制 | 第18-20页 |
2. 实验方法 | 第20-29页 |
·本节构建真核表达载体技术路线如下 | 第20-21页 |
·真核表达质粒载体的构建 | 第21-24页 |
·定点突变体的构建 | 第24-28页 |
·酶切、克隆 | 第28-29页 |
3. 结果 | 第29-35页 |
·抽提质粒的酶切鉴定 | 第29-30页 |
·质粒测序结果 | 第30-35页 |
4. 分析讨论 | 第35-36页 |
附录 | 第36-38页 |
第二章 自吞噬与ataxin-3降解的关系 | 第38-55页 |
1. 材料与仪器 | 第38-43页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·主要试剂、耗材 | 第38-40页 |
·主要试剂的配制 | 第40-43页 |
2. 实验方法 | 第43-49页 |
·HEK293T细胞的培养 | 第43页 |
·3-MA对细胞内蛋白降解的影响 | 第43-48页 |
·Rapamycin对细胞内ataxin-3蛋白降解的影响 | 第48-49页 |
3. 结果 | 第49-51页 |
·3-MA对细胞内ataxin-3降解的影响 | 第49-50页 |
·Rapamycin对细胞内ataxin-3蛋白降解的影响 | 第50-51页 |
4. 讨论 | 第51-55页 |
·自吞噬与ataxin-3降解 | 第51-52页 |
·自吞噬与ataxin-3毒性短片段的关系 | 第52页 |
·Ataxin-3的260位丝氨酸磷酸化参与调控自吞噬对ataxin-3的降 | 第52-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
综述 | 第62-69页 |
参考文献 | 第65-69页 |
致谢 | 第69页 |