| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-16页 |
| ·仿刺参的介绍 | 第11-13页 |
| ·温度对刺参生长的影响 | 第11-12页 |
| ·温度对刺参繁殖和发育的影响 | 第12页 |
| ·刺参的夏眠 | 第12-13页 |
| ·水产动物耐寒方面研究进展 | 第13-14页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术及其应用 | 第14-15页 |
| ·选题及意义 | 第15-16页 |
| 第二章 刺参尿苷胞苷激酶-1 基因的克隆与分析 | 第16-27页 |
| ·材料与方法 | 第16-18页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·刺参总 RNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·引物设计 | 第17-18页 |
| ·序列分析 | 第18页 |
| ·结果与分析 | 第18-25页 |
| ·刺参尿苷胞苷激酶-1 基因的全长序列 | 第18-21页 |
| ·刺参尿苷胞苷激酶-1 基因的氨基酸组成特征 | 第21-23页 |
| ·刺参与其他物种尿苷胞苷激酶-1 氨基酸序列同源序列分析 | 第23页 |
| ·系统进化树的构建 | 第23-25页 |
| ·讨论 | 第25-27页 |
| ·刺参尿苷胞苷激酶-1 的克隆 | 第25页 |
| ·尿苷胞苷激酶-1 的序列及功能分析 | 第25-27页 |
| 第三章 候选耐寒基因在刺参不同组织及两种降温模式下的表达研究 | 第27-42页 |
| ·材料与方法 | 第27-30页 |
| ·降温试验 | 第27页 |
| ·实验试剂与药品 | 第27页 |
| ·主要的仪器设备 | 第27-28页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·组织分布、低温胁迫后耐寒基因表达检测、数据处理 | 第28-29页 |
| ·总 RNA 提取 | 第29页 |
| ·cDNA 的制备 | 第29页 |
| ·RT-PCR | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-38页 |
| ·总 RNA 提取及检测 | 第30页 |
| ·反转录后的扩增检测结果 | 第30页 |
| ·定量引物的验证 | 第30-32页 |
| ·实时荧光定量 PCR 扩增效率鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·刺参候选耐寒基因在四种不同组织中的表达情况 | 第33页 |
| ·候选耐寒基因在不同低温处理条件下的表达 | 第33-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·内参基因的确定 | 第38-39页 |
| ·两种不同降温模式下刺参耐寒候选基因表达变化规律 | 第39-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第四章 刺参主要卵黄蛋白 MYP1、MYP2 在幼体发育及温度胁迫下的表达研究 | 第42-51页 |
| ·材料与方法 | 第42-45页 |
| ·刺参产卵、受精和幼体培养 | 第42页 |
| ·温度处理 | 第42-43页 |
| ·样品采集 | 第43页 |
| ·总 RNA 提取 | 第43-44页 |
| ·cDNA 的制备 | 第44页 |
| ·引物设计筛选及选择内参基因 | 第44页 |
| ·RT-PCR | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-49页 |
| ·引物筛选结果及内参基因的确立 | 第45页 |
| ·MYP 在刺参不同发育阶段的表达 | 第45-46页 |
| ·MYP 的组织特异性表达 | 第46-47页 |
| ·长时温度胁迫下刺参肠组织中 MYP 的表达 | 第47-48页 |
| ·短时低温胁迫下刺参肠组织中 MYP 的表达 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·内参基因的选择 | 第49页 |
| ·MYP 在阶段发育过程和组织中的表达 | 第49-50页 |
| ·MYP 在不同温度处理下的表达情况 | 第50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
