| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| 1. 干扰素-γ | 第10-15页 |
| ·IFN-γ理化特性及分子结构 | 第10-11页 |
| ·IFN-γ的产生及诱导条件 | 第11-12页 |
| ·IFN-γ生物学活性及其作用机制 | 第12-15页 |
| ·抗病毒活性 | 第12页 |
| ·免疫调节活性 | 第12-13页 |
| ·抗肿瘤活性 | 第13-15页 |
| 2. 适配体 | 第15-18页 |
| ·适配体与SELEX技术 | 第15-18页 |
| ·适配体 | 第15页 |
| ·SELEX技术 | 第15-17页 |
| ·适配体vs抗体 | 第17-18页 |
| 3. 适配体在检测中的应用 | 第18-20页 |
| 4. 选题依据及研究意义 | 第20-21页 |
| 5. 研究策略和技术路线 | 第21-23页 |
| ·拟解决的科学问题 | 第21页 |
| ·研究策略 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第23-32页 |
| 1. 实验材料和试剂 | 第23-25页 |
| ·细菌 | 第23页 |
| ·单链寡核苷酸文库和引物 | 第23页 |
| ·蛋白 | 第23页 |
| ·磁珠 | 第23-24页 |
| ·试剂盒 | 第24页 |
| ·试剂及配制方法 | 第24-25页 |
| ·培养用试剂 | 第24页 |
| ·化学试剂 | 第24页 |
| ·配制方法 | 第24-25页 |
| 2. 实验仪器和设备 | 第25-26页 |
| 3. 实验方法 | 第26-32页 |
| ·适配体的体外筛选过程 | 第26-28页 |
| ·IFN-γ蛋白与UF磁珠耦联 | 第26-27页 |
| ·初始随机DNA文库的构建 | 第27页 |
| ·单链DNA文库筛选 | 第27页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·链酶亲和素磁珠分离单链DNA | 第28页 |
| ·适配体的克隆分析和测序 | 第28-29页 |
| ·流式细胞术检测 | 第29页 |
| ·筛选进程监测 | 第29页 |
| ·适配体和靶标的特异性结合的检测 | 第29页 |
| ·适配体Kd值的测定 | 第29页 |
| ·适配体的结构预测 | 第29-30页 |
| ·人外周血单个核细胞(PBMC)的分离 | 第30页 |
| ·基于核酸适配体的胞内IFN-γ检测方法的建立 | 第30-31页 |
| ·统计分析 | 第31-32页 |
| 第三章 实验结果和讨论 | 第32-44页 |
| 1. IFN-γ核酸适配体的筛选过程 | 第32-35页 |
| 2. 适配体性质分析 | 第35-39页 |
| ·适配体的序列与结构 | 第35-36页 |
| ·适配体的结合性质 | 第36-39页 |
| ·B1-4与未修饰及多聚甲醛固定过的靶标蛋白结合 | 第36-37页 |
| ·B1-4与靶标蛋白特异性的结合 | 第37-38页 |
| ·适配体的亲和力 | 第38-39页 |
| 3. 基于核酸适配体的胞内IFN-γ检测方法的建立 | 第39-44页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第44-47页 |
| 1. 讨论 | 第44-46页 |
| 2. 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 非论文综述 | 第52-72页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 附录一 英文缩略词汇表 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |